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摘要：目的：阿德福韦酯于2002年由美国FDA批准上市用于治疗慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B, CHB)，2005年国家食品药品监督管理局(DA)批准在我国运用于临床。至2008年，全世界服用阿德福韦酯的人数大约为41万人/年。但其疗程不固定且需要长期服用，由此其长期服用的安全性引起了广大医务人员和患者的高度关注。阿德福韦酯的作用机制是抑制线粒体DNA(mitochondrial DNA, mtDNA)复制中的关键酶DNA聚合酶γ，由此本探讨主要目的是探讨长期服用阿德福韦酯会不会导致CHB患者外周血单个核细胞(periperal blood mononuclear cells, PBMCs)线粒体损伤，为这种药物长期服用的安全性提供参考和佐证。材料和策略：入组了CHB患者37例，均为单一服用阿德福韦酯抗病毒治疗的患者，CHB诊断符合2005年版《慢性乙型肝炎防治指南》的标准。前瞻性的定期随访，共随访4年。A组：该37例CHB患者未经抗病毒治疗即首次发病；B组：该37例CHB患者单一服用阿德福韦酯满2年；C组：该37例CHB患者单一服用阿德福韦酯满3年；D组：该37例CHB患者单一服用阿德福韦酯满4年。实时定量PCR(Real-timequantitative Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)法检测各组患者PBMCs中mtDNA含量，8-羟基脱氧鸟苷(8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdG)含量；nested PCR法检测mtDNA4977缺失；监测患者ALT、AST、HBV DNA、肌酸激酶(creatine kinase, CK)、血尿素氮(serum urea nitrogen, BUN)、血肌酐(serum creatinine,SCr)、乳酸(lactic acid, LAC)等指标。满足正态性的计量资料采取重复测量方差浅析思想进行多样本均数比较，采取了t检验的策略进行两样本均数比较；不满足正态性的计量资料采取多个相关样本非参数检验思想进行浅析，采取两独立样本非参数检验进行两样本间比较。计数资料采取卡方检验或Fisher’s确切概率法进行组间差别的比较。采取曲线相关浅析及多重线性相关浅析进行关联性检验。结果：1.一般情况：37例患者中男性34例，女性3例，平均年龄(40.11±10.69)岁，最小年龄21岁，最大63岁。ALT4组间相比，F=22.948，P=0.000，差别有统计学作用；A组ALT高于B组、C组、D组，P值均为0.000；而B组、C组、D组间比较，P值均＞0.05。AST4组间相比，F=36.129，P=0.000，差别有统计学作用；A组AST高于B组、C组、D组，P值均为0.000。而B组、C组、D组间比较，P值均＞0.05。HBeAg随访到2年时阴转的为8例，阴转率为33.33%。随访到3年时阴转的为10例，阴转率为41.67%。随访到4年时与随访到3年时相比无变化。HBeAg阳性率4组间相比，χ2=7.400, P=0.060，差别无统计学作用。HBV DNA4组间比较，χ2=62.438, P=0.000；A组HBV DNA高于B组、C组、D组，P值均为0.000，而B组、C组、D组间比较，P值均＞0.05。BMI、CK、BUN、SCr4组间比较，差别无统计作用。2.mtDNA数量变化：mtDNA含量（mtDNA/nDNA RQ值）4年间变化走势为先降低后升高。4组间差别有统计学作用，F=37.110，P=0.000；A组mtDNA含量为14.7±9.5，显著高于B组的7.8±4.2，P=0.028和C组的mtDNA含量8.5±4.4，P=0.045，差别有统计学作用；A组mtDNA含量显著低于D组的36.6±24.0，P=0.000。B组、C组间mtDNA含量相比，P=0.806，差别无统计学作用，但B组、C组均显著低于D组mtDNA含量，P值均为0.000。3.mtDNA缺失：mtDNA4977缺失率4年内的变化走势为先升高后维持在一定水平。4组间差别有统计学作用，F=6.887，P=0.000；A组mtDNA4977缺失率为0.2±0.1，显著低于B组的0.3±0.1，C组的0.3±0.2，D组的0.3±0.2，P值均为0.000。B组、C组、D组间P值均＞0.05，差别均无统计学作用。4.mtDNA点突变：8-OHdG(ΔCt)水平4年内的变化走势为先升高后维持在一定水平。4组间差别有统计学作用，F=5.721，P=0.005；A组8-OHdG水平为2.4±0.9，显著低于B组的3.5±1.2，C组的3.4±0.8，D组的3.4±1.1，P值均为0.000。B组、C组、D组间P值均＞0.05，差别无统计学作用。5.重要临床指标正常与异常组间比较：服药达4年时，LAC升高的有8例，占28.6%，BUN升高者有2例，占5.9%，CK升高者有7例，占20.6%。但LAC、BUN、CK正常组与异常组间mtDNA含量、8-OHdG水平、mtDNA4977缺失率相比，P值均＞0.05，差别无统计学作用。6.关联性浅析：mtDNA含量与mtDNA4977缺失率、8-OHdG曲线相关，决定系数R2分别为0.104,0.053；mtDNA与其他临床指标间无关联性。多重线性回归浅析发现mtDNA4977缺失率仅与8-OHdG正相关，模型F=2.916，P=0.002；R2=0.257，偏回归系数B=0.034，P=0.012；8-OHdG与mtDNA4977缺失率正相关，与CK负相关，模型F=2.268，P=0.014；R2=0.212，B分别为1.755，-0.602；P值分别为0.012，0.044。结论：本探讨入组了37例患者，观察时间长达4年之久，采取重复测量设计的策略，克服了病程、年龄、性别、吸烟、饮酒、饮食习惯等个体间的变异，并以mtDNA数量转变，mtDNA缺失及点突变3方面来探讨，所得结论为服用阿德福韦酯达4年时，暂没有出现有症状的线粒体损伤，总的效应是会引起mtDNA含量反馈性的增加，但线粒体氧化损伤也在加重，暂不能确定更长时间用药是否会出现有症状的线粒体损伤。关键词：阿德福韦酯论文PBMCs论文线粒体损伤论文氧化应激论文8-OHdG论文mtDNA4977论文
摘要4-7
ABSTRACT7-10
前言10
材料与策略10-16
结果16-18
附图18-21
附表21-23
讨论23-25
结论25-26