试谈念珠菌白念珠菌CaFOL1和CaFOL2基因功能鉴定查抄袭率

中文摘要3-4

ABSTRACT4-5

目录5-7

第一章 文献综述7-10

1.1 白念珠菌介绍7-8

1.2 白念珠菌 CaFOL1 和 CaFOL2 基因探讨背景8-10

第二章 实验材料和策略10-23

2.1 实验材料10-16

2.1.1 菌株10

2.1.2 质粒10-11

2.1.3 引物11-12

2.1.4 培养基12-13

2.1.5 试剂13-14

2.1.6 常用溶液与缓冲液14-15

2.1.7 主要仪器15-16

2.2 试验策略16-23

2.2.1 大肠杆菌和白色念珠菌菌株的培养与保存16

2.2.2 CaCl_2法制备感受态细胞16

2.2.3 碱裂解法小量快速制备质粒DNA16-17

2.2.4 玻璃珠法提取白色念珠菌基因组DNA17

2.2.5 PCR扩增DN段17-18

2.2.6 质粒DNA的酶切与连接18-19

2.2.7 乙醇沉淀法纯化DN段19

2.2.8 大肠杆菌感受态细胞的转化19-20

2.2.9 乙酸锂法转化白念珠菌细胞20

2.2.10 DN段的切胶回收20

2.2.11 大肠杆菌菌落PCR20-21

2.2.12 白念珠菌基因的敲除策略21

2.2.13 生物信息学策略21-23

第三章 实验结果及讨论23-49

3.1 引言23

3.2 白念珠菌CaFOL1 基因的敲除23-33

3.2.1 CaFOL1 基因敲除盒的构建对策23-24

3.2.2 CaFOL1 基因的敲除对策24-25

3.2.3 CaFOL1 基因的敲除盒的构建25-30

3.2.4 CaFOL1 基因的敲除30-33

3.2.4.1 CaFOL1 单等位基因的敲除30-32

3.2.4.2 CaFOL1 双等位基因的敲除32-33

3.3 白念珠菌CaFOL2 基因的敲除33-45

3.3.1 CaFOL2 基因敲除盒的构建对策33-34

3.3.2 CaFOL2 基因的敲除对策34-35

3.3.3 CaFOL2 基因的敲除盒的构建35-40

3.3.4 CaFOL2 基因的敲除40-45

3.3.4.1 CaFOL2 单等位基因的敲除40-42

3.3.4.2 CaFOL2 双等位基因的敲除42-45

3.4 白念珠菌CaFOL2 基因的克隆45-47

3.5 白念珠菌CaFOL2 基因的功能鉴定47-48

3.6 总结与讨论48-49