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丹参,航天搭载,植物学特征,根系分泌物,分子标记,综合质量,药效学,

收藏本文 2024-02-10 点赞:8758 浏览:26068 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:本论文以经过“神舟七号”太空飞船搭载选育出的太空丹参(SP1-1)为探讨材料,未搭载的丹参为对照(CK),以植物学特性、抗病性、DNA分子标记、生理生化、光合效应与产量、内在质量以及药效学等方面进行较为系统的比较探讨,探讨空间环境对丹参的诱变效应,为筛选与培育产量高、质量优以及抗病性强的优质丹参种质资源奠定基础。实验结果如下:1.太空丹参SP1-1的植物学特性探讨对航天搭载丹参中培育出的太空丹参(SP1-1)的根、茎、叶、花等植物学特性进行探讨表明,与CK比较,SP1-1的主要特性为植株较矮,茎节间距短,叶片肥厚、表面皱缩,深绿色,叶形较大,根表面红棕色,二者在植物学特性上差别较为显著;根部常见病害调查表明,SP1-1感染根腐病与根结线虫病的发病率低于CK;由此,太空丹参SP1-1为植物学性状优良、抗病性较优的丹参新种质资源。2.太空丹参SP1-1的根系分泌物与抗病性探讨采取极性不同的溶剂乙酸乙酯与正己烷为浸提剂,提取CK与SP1-1的土壤根系分泌物,并采取GC-MS对根系分泌物的成分进行浅析,结果CK根系分泌物中的化学成分的种类较多且含量显著高于SP1-1,CK与SP1-1根系分泌物中检测到的多种成分,在连作障碍中对作物的生长发育起到不同程度的抑制作用,降低作物的抗病能力,而CK与SP1-1根系分泌物的种类与数量上的差别,必定会对丹参的生长与抗病性产生一定的影响,但根系分泌物中的哪几类成分对丹参的生长发育与抗病性起关键作用还有待作进一步的探讨。3.太空丹参SP1-1的细胞学效应与分子标记探讨根尖细胞染色体探讨表明,CK与SP1-1的染色体数目相同,均为2n=16,且类型基本相似,但在染色体的形态及臂比方面有着差别,说明航天搭载对SP1-1的染色体核型影响较小;采取RAPD分子标记技术,筛选出A1、A13、A15引物并扩增出稳定的、重复性好的A1-450、A1-900、A13-700、A15-1100四个差别片段,对差别片段进行回收、克隆与测序,测序后在GeneBank中采取BLAST工具进行比对,结果SP1-1中扩增出的A1-450与A1-900序列中的部分序列与丹参中的基因序列具有一定的同源性,可能为丹参中调控丹参酮类与丹酚酸类生物合成途径的关键酶基因;而A13-700与A15-1100则分别与牛耳草和拟南芥基因组的部分序列同源性较高。4.太空丹参SP1-1可溶性蛋白及同工酶谱浅析电泳浅析表明,CK与SP1-1的可溶性蛋白谱带的数目、迁移率及表达量方面有着较大的差别,SP1-1的蛋白质谱带条数为14条,表达量较多,CK为7条;CAT同工酶共有2条酶带,但SP1-1中的2号条带的表达量较强;POD同工酶条带的数量和强度有显著的差别,SP1-1中的POD酶谱中缺少Rf为0.325条带,CK缺少Rf为0.075、0.542条带,且SP1-1中的POD同工酶的5、6、7号三个条带的同工酶谱的强度较强;SOD同工酶中,SP1-1中缺少Rf为0.533条带,CK缺少Rf为0.233条带;SP1-1的同工酶表达量强度较强,以6号条带的谱带强度较强。5.太空丹参SP1-1的光合特性与产量的相关性探讨光合色素含量测定表明,SP1-1中的叶绿素、类胡萝卜素的总量在丹参的不同生长阶段均高于CK,叶绿素a在花期、花后期显著地高于CK,不同生长期SP1-1叶片中的Chla.Chlb的比值较CK有不同程度的降低。光合特性探讨表明,SP1-1与CK在净光合速率(P。)上的日变化走势一致,均呈现出曲线形的日变化特点,因而都具有“午休”现象,而在净光合速率(P。)的量值上,SP1-1的Pn值均高于CK。二者叶片的胞间CO2浓度(Ci)呈现“U型”的日变化特点;光响应曲线探讨表明,SP1-1的光补偿点(LSP)较高为65.72μmol·m-2·s-1、光饱和点(LSP)较高为754.13μmol·m-2·s-1,均高于CK(LSP为51.36μmol·m-2·s-1,LSP为643.58μmol·m-2·s-1)。丹参产量调查表明,SP1-1的产量较CK提升了近14%,其增产幅度没有显著性差别,但SP1-1在增产方面具有一定的优势与潜力。6.太空丹参SP1-1的综合质量评价探讨为了比较CK与SP1-1之间的药材质量之间的差别,对CK、SP1-1药材中的主要活性成分丹酚酸B、二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ A的含量以及石油醚提取物、丹参多糖、微量元素等指标进行检测,结果表明,与CK比较,SP1-1中的丹酚酸B、丹参酮ⅡA的含量分别提升13%与50%;多糖含量提升了近16%;CK与SP1-1中的低极性部分的成分种类相似,但相对含量有着较大的差别。以多项检测指标浅析表明,SP1-1的药材内在质量优于CK。为了与不同产地的丹参药材进行综合浅析,采取高效液相色谱法构建了13批丹参样品的指纹图谱,通过统计浅析软件对丹参指纹图谱数据进行聚类浅析,结果表明,CK在分类上与安徽丹参的亲缘联系较近,而SP1-1在聚类浅析图上与四川丹参距离最近,说明,SP1-1在化学特点上与CK产生了显著的差别7.太空丹参SP1-1对血瘀证大鼠的药效学试验探讨采取肾上腺素法复制大鼠急性血瘀模型,结果急性血瘀模型组大鼠血液流变性体现出“浓、粘、凝、聚”的状态。CK与SP1-1在改善全浆粘度、全血粘度(50/s、100/s、200/s)中高切变率、全血(低切、高切)还原粘度以及红细胞刚性指数方面,与模型组比较具有显著性的差别(P0.05);二者也可不同程度地降低全血粘度低切变率(1/s、5/s)、全血(高切、低切)相对指数、红细胞聚集指数、红细胞变形指数等指标,但与模型组比较没有显著性差别。与CK组比较,SP1-1对全浆粘度、全血粘度中切(50/S)、低切(5/S)、全血高切、低切相对指数、红细胞聚集、红细胞刚性指数等方面的作用较强。关键词:丹参论文航天搭载论文植物学特点论文根系分泌物论文分子标记论文综合质量论文药效学论文
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    中文摘要8-11

    Abstract11-15

    前言15-17

    第一章 太空丹参SP_1-1的植物学特点探讨17-32

    1.1 材料与策略17

    1.2 试验策略17-19

    1.2.1 试验材料来源17-18

    1.2.2 育苗18

    1.2.3 栽培管理技术18

    1.2.4 植物学特点调查策略18-19

    1.2.5 显微特点观察19

    1.3 实验结果19-30

    1.3.1 CK、SP_1-1植物学特点比较19-26

    1.3.2 CK、SP_1-1叶、茎、根的显微特点26-30

    1.4 讨论30-32

    第二章 太空丹参SP_1-1的根系分泌物与抗病性探讨32-43

    引言32-33

    2.1 试验材料33

    2.2 仪器与试剂33

    2.3 实验策略33-34

    2.3.1 土壤样品采集及处理33

    2.3.2 根际土壤样品溶液的制备33

    2.3.3 GC-MS检测条件33-34

    2.4 根际分泌物测定结果34-41

    2.4.1 乙酸乙酯根际土壤浸提物的浅析34-37

    2.4.2 正己烷根际土壤浸提物的浅析37-41

    2.5 讨论41-43

    第三章 太空丹参SP_1-1的细胞学效应与分子标记探讨43-66

    引言43

    第一节 根尖细胞(RTC)染色体核型浅析43-47

    1.1 试验材料43

    1.2 仪器与试剂43-44

    1.3 实验策略44

    1.4 实验结果44-46

    1.4.1 染色体核型与数目44-45

    1.4.2 染色体核型参数45-46

    1.5 讨论46-47

    第二节 太空丹参SP_1-1的RAPD分子标记探讨47-66

    2.1 材料与仪器47-48

    2.1.1 试验材料47

    2.1.2 试剂与仪器47-48

    2.2 实验策略48-52

    2.2.1 基因组总DNA的提取48-49

    2.2.2 DNA的质量与纯度检测49-50

    2.2.3 RAPD浅析50

    2.2.4 差别DN段的回收、克隆与测序50-52

    2.3 实验结果52-64

    2.3.1 DNA的提取结果52

    2.3.2 总DNA的电泳结果52-53

    2.3.3 RAPD反应系统和扩增程序的优化53-56

    2.3.4 DNA随机引物扩增片段多态性56-59

    2.3.5 差别片段测序及序列功能信息浅析59-64

    2.4 讨论64-66

    第四章 太空丹参SP_1-1的可溶性蛋白、CAT、POD和SOD同工酶浅析66-76

    引言66

    4.1 试验材料66

    4.2 仪器与试剂66-67

    4.3 试验策略67-69

    4.3.1 样品溶液的制备67-68

    4.3.2 凝胶溶液的配制68

    4.3.3 电泳68

    4.3.4 染色策略68-69

    4.4 实验结果69-73

    4.4.1 可溶性蛋白的电泳浅析69-70

    4.4.2 CAT同工酶酶谱浅析70

    4.4.3 POD同工酶酶谱浅析70-71

    4.4.4 SOD同工酶酶谱浅析71

    4.4.5 酶带迁移率浅析71-73

    4.5 讨论73-76

    4.5.1 提取策略的优化73-74

    4.5.2 染色策略的优化74

    4.5.3 可溶性蛋白电泳浅析74

    4.5.4 同工酶图谱浅析74-76

    第五章 太空丹参SP_1-1的光合特性与产量的相关性探讨76-89

    引言76

    5.1 试验材料76

    5.2 仪器与试剂76

    5.3 试验策略76-78

    5.3.1 光合色素的含量测定76-77

    5.3.2 光合作用日动态参数测定77

    5.3.3 光响应测定77-78

    5.3.4 丹参药材的产量测定78

    5.4 结果与浅析78-87

    5.4.1 光合色素的含量测定78-82

    5.4.2 日光合曲线浅析82-85

    5.4.3 光响应曲线浅析85-86

    5.4.4 丹参药材的产量浅析86-87

    5.5 结论与讨论87-89

    第六章 基于化学成分浅析的太空丹参SP_1-1质量评价探讨89-120

    引言89

    第一节 丹参药材中活性成分的含量测定89-100

    1.1 仪器与试剂89-90

    1.2 试验材料90-91

    1.3 试验策略91-96

    1.3.1 色谱条件91

    1.3.2 对照品溶液的制备91

    1.3.3 供试样品溶液的制备91

    1.3.4 标准曲线的绘制91-93

    1.3.5 策略学考察93-95

    1.3.6 样品含量测定95-96

    1.4 讨论96-100

    1.4.1 色谱条件的优化96-98

    1.4.2 提取溶剂的考察98-99

    1.4.3 测定结果的浅析99

    1.4.4 丹参不同部位的含量浅析99

    1.4.5 散点分布图浅析99-100

    第二节 基于化学指纹图谱的聚类浅析探讨100-110

    2.1 仪器与试药100

    2.2 实验材料100-101

    2.3 丹参Hplc指纹图谱的构建101-110

    2.3.1 供试品溶液的制备101

    2.3.2 参照物样品溶液的制备101

    2.3.3 指纹图谱色谱条件101

    2.3.4 策略学考察101-103

    2.3.5 实验结果103-110

    第三节 太空丹参SP_1-1石油醚提取物的GC-MS浅析110-114

    3.1 试验材料110

    3.2 仪器与试剂110

    3.3 试验策略110-111

    3.3.1 石油醚提取物样品的制备110-111

    3.3.2 GC-MS测定条件111

    3.4 结果与讨论111-114

    3.4.1 结果浅析111-113

    3.4.2 讨论113-114

    第四节 太空丹参SP_1-1中微量元素的XRF浅析114-117

    4.1 试验材料与样品制备115

    4.2 实验仪器115

    4.3 结果浅析115-117

    第五节 小结117-120

    第七章 太空丹参SP_1-1的药效学试验探讨120-127

    引言120-121

    7.1 试验材料121

    7.1.1 实验动物来源121

    7.1.2 试药与仪器121

    7.2 实验策略121-122

    7.2.1 药液的制备121

    7.2.2 给药剂量计算121

    7.2.3 实验分组121

    7.2.4 实验步骤121-122

    7.2.5 实验结果统计浅析122

    7.3 实验结果122-124

    7.3.1 对急性血瘀大鼠全血粘度的影响122-123

    7.3.2 对急性血瘀大鼠全血相对指数、还原粘度的影响123-124

    7.3.3 对急性血瘀大鼠红细胞、卡松粘度的影响124

    7.4 讨论124-127

    7.4.1 寒凝血瘀证动物模型的选择124-125

    7.4.2 对血液流变学的影响探讨125

    7.4.3 CK与SP_1-1对大鼠急性血瘀证血液流变学的影响125-127

    第八章 结语与展望127-132

    8.1 主要探讨结果与结论127-130

    8.2 革新点130-131

    8.3 有着不足与展望131-132

    致谢132-133

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