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摘要：阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)又称老年痴呆,是以不可逆进行性记忆减退和认知功能障碍为主要临床体现的一种神经系统变性疾病。其病理特点主要有神经元和神经突触的丢失以及由过度磷酸化tau蛋白组成的神经纤维结节以及由毒性Aβ沉积形成的淀粉样斑块。引起老年痴呆症的具体机制尚不完全清楚,但是,根据文献报道,神经生长因子前体蛋白proNGF以及Aβ(p-amyloid)参与了神经元凋亡历程。神经生长因子(nerve growth factor,NGF)以前体形式合成,被蛋白酶切后释放碳末端的成熟肽(NGF-β)。成熟的神经生长因子(NGF-β)与Trk受体及p75NTR受体结合发挥推动细胞存活和分化的功能。探讨显示,在受损神经元或退行性疾病的神经元中,proNGF不能被蛋白酶切割而与p75NTR受体和sortipn受体结合推动细胞的凋亡在proNGF-p75NTR-sortipn作用的历程中,proNGF的pro-domain和NGF-β分别与sortipn和p75NTR结合。并且sortipn在proNGF发挥促细胞凋亡的历程中是必不可少的,即sortipn受体作为一个分子开关制约着proNGF诱导的通过受体p75NTR和sortipn介导的促细胞凋亡作用。本论文第一部分探讨工作主要探讨proNGF或者proBDNF的pro-domain与sortipn蛋白的相互作用,期望筛选到能够拮抗proNTs与sortipn作用的蛋白,以减少细胞死亡。但是,GST-pull down与酵母双杂交结果显示proNGF或者proBDNF的pro-domain与sortipn蛋白没有相互作用。在AD患者脑内,膜内淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)的异常水解产生的Aβ沉积产生淀粉样斑块。根据文献报道,p75NTR与Aβ相互作用介导神经元的凋亡。在本论文第二部分的探讨工作中,我们探讨了Ap(25-35)对未分化PCI2细胞的细胞毒性；并通过原核表达系统得到带有p75NTR胞外区及人lgG Fc片段的融合蛋白,探讨结果显示该融合蛋白与p75NTR竞争结合Aβ(25-35)以拮抗Aβ(25-35)对PCI2的细胞毒作用,以及与p75NTR竞争结合NGF抑制神经轴突的生长。关键词：NGF论文pro-domain论文sortipn论文Aβ论文融合蛋白p75~(NTR)/论文
中文摘要4-5
Abstract5-6
缩略语对照表6-8
前言8-12
第一部分 神经营养素前体截断体与sortipn相互作用探讨12-40
实验材料12-21
实验策略21-28
实验结果28-38
讨论38-40
第二部分 融合蛋白p75~(NTR)/Fc的表达、纯化及基于PC12细胞的生物学活性探讨40-59
实验材料40-43
实验策略43-48
实验结果48-56
讨论56-59
本实验有着不足之处及今后实验设想59-60
总结60-62