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摘要：第一部分不同电流和处置次数的电休克相应程度地调升嗅球切除抑郁模型大鼠海马内Glu的浓度目的：观察不同电量和不同处置次数ECT干预对嗅球切除抑郁模型大鼠海马Glu浓度的影响。策略：建立大鼠嗅球切除抑郁模型，采取随机单位组3×3析因设计：将每只大鼠视为1个单位，予以2个处理因素，即电量（3水平：25mA、50mA、75mA）和处置次数（3水平：3次ECT、6次ECT、9次ECT）的所有组合。72只嗅球切除抑郁模型大鼠随机分为9个实验组（n=8）。全部ECT处置结束24h内留取海马，高效液相色谱法（High Performance LiquidChromatography，Hplc）检测Glu在海马中的含量。结果： ECT引发海马Glu浓度升高，ECT的电量和处置次数均可影响该历程，两者作用叠加。结论： ECT导致海马Glu浓度升高，以而加剧海马Tau蛋白的磷酸化程度。第二部分兴奋性氨基酸受体拮抗剂减轻电休克诱发的WKY大鼠认知障碍和Tau蛋白的过度磷酸化目的：通过观察兴奋性氨基酸受体拮抗剂对ECT后WKY大鼠认知能力和Tau蛋白过度磷酸化的影响探讨兴奋性氨基酸受体拮抗剂对Tau蛋白过度磷酸化的调节及两者对抑郁大鼠认知能力的影响。策略：采取随机单位组析因设计：将每只大鼠视为1个单位，予2个处理因素，即ECT处置与否（2水平：无处置、施行一个疗程ECT）和兴奋性氨基酸受体拮抗剂利用与否（3水平：注射生理盐水、MK-801、DNQX）的所有组合。72只WKY大鼠随机分为6个实验组（n=8）。全部ECT处置结束24h内开始Morris水迷宫（Morris water maze，MWwM）检测认知能力，后留取海马。HPLC法检测Glu在海马中的含量；免疫组织化学（immunohistochemistry， IHC-SP）法和Western-lotting法检测Tau5（总Tau蛋白）、 p-PHF1Ser396/404、p-AT8Ser199/202、p-12E8Ser262在海马中的表达。结果：ECT和GluR拮抗剂均可造成大鼠认知障碍，即延长逃避潜伏期（escape latency，EL）并缩短空间探讨时间（space exploration time，SET）；两者的影响呈相减效果，即ECT和Glu受体拮抗剂合用之后，其造成的大鼠认知障碍程度反而减轻。ECT可显著增加海马中Glu的浓度；GluR拮抗剂对海马中Glu的浓度没有明确影响。ECT和GluR拮抗剂对海马总Tau蛋白表达无明确影响。ECT可增加海马中磷酸化Tau蛋白的表达；GluR拮抗剂可减少海马中磷酸化Tau蛋白的表达；两者的影响呈相减效果，即GluR拮抗剂可使ECT造成的海马中磷酸化Tau蛋白的表达增加的幅度减缓。结论： NMDAR和AMPAR拮抗剂可以阻止“ECT导致海马Glu浓度升高，以而加剧海马Tau蛋白的磷酸化程度”这一历程，且两者效果相似；其具体机制与阻断兴奋性毒性有关。第三部分二异丙酚逆转嗅球切除抑郁模型大鼠电休克后的Tau蛋白过度磷酸化和认知障碍目的：通过观察二异丙酚对ECT后嗅球切除抑郁模型大鼠认知能力和Tau蛋白过度磷酸化的影响探讨兴奋性氨基酸受体拮抗剂对Tau蛋白过度磷酸化的调节及两者对抑郁大鼠认知能力的影响。策略：按随机单位组2×2析因设计设置2个干预因素，即ECT干预（2水平：无处置、施行一个疗程ECT）和二异丙酚干预（2水平：腹腔注射5ml生理盐水或5ml二异丙酚100mg/kg）的所有组合。选24W健康雄性Sprague-Dawley大鼠建立嗅球切除抑郁模型，将32只24W龄模型大鼠随机分为4个实验组（n=8）：I组（腹腔注射5ml二异丙酚100mg/kg）、II组（腹腔注射5ml二异丙酚100mg/kg+施行ECT1个疗程）、III组（腹腔注射5ml生理盐水）、IV组（腹腔注射5ml生理盐水+施行ECT1个疗程）。全部ECT处置结束24h内开始Morris水迷宫检测，之后留取海马组织.高效液相色谱法检测神经递质Glu在海马组织中的含量；免疫组化SP法和Western blotting法检测Tau-5（总Tau蛋白）、p-PHF1Ser396/404、p-AT8Ser199/202、p-12E8Ser262、GSK-3β1H8和PP-2A在海马组织神经元中的表达。结果：ECT和二异丙酚均可造成大鼠认知障碍，即延长EL并缩短SET；两者的影响呈相减效果。ECT可显著增加海马中神经递质Glu的浓度；二异丙酚可降低海马中神经递质Glu的浓度，且两者有相减效果。ECT和二异丙酚对海马总Tau蛋白和PP-2A蛋白的表达无显著影响。ECT可增加海马中磷酸化Tau蛋白和GSK-3β1H8蛋白的表达；二异丙酚可减少海马中磷酸化Tau蛋白和GSK-3β1H8蛋白的表达；两者的影响均呈相减效果。结论：ECT导致海马Glu浓度升高，通过上调GSK-3β1H8增加海马Tau蛋白的磷酸化程度导致认知功能障碍，而二异丙酚则可通过降低海马Glu浓度下调GSK-3β1H8的表达，以而减缓Tau蛋白的磷酸化程度以改善ECT后的认知功能。第四部分二异丙酚与NMDAR拮抗剂逆转嗅球切除抑郁模型大鼠电休克后认知障碍的神经心理学机制之比较目的：通过观察二异丙酚和对ECT后嗅球切除抑郁模型大鼠空间认知能力和Tau蛋白过度磷酸化的影响，探讨两者对Tau蛋白过度磷酸化的调节及两者对抑郁大鼠空间认知能力的影响，并比较其效果和作用途径，以期为改善认知障碍的神经心理学机制探讨和临床干预性治疗提供实验依据。策略：采取随机单位组2×3析因设计：将每只大鼠视为1个单位，予以2个处理因素，即ECT（2水平：无处置、施行1疗程ECT）和药物（3水平：腹腔注射生理盐水、NMDAR拮抗剂MK-801、二异丙酚）的所有组合。48只嗅球切除抑郁模型大鼠随机分为6个实验组（n=8）。全部ECT结束24h内开始MWM检测，留取海马，HPLC法检测Glu在海马中的含量，IHC-SP法和Western-lotting法检测p-AT8Ser202和GSK-3β1H8在海马中的表达。结果：二异丙酚、NMDAR拮抗剂及ECT均可造成大鼠认知障碍，即延长EL并缩短SET；前两者效果相似且和ECT的影响呈相减效果。ECT可显著增加海马中Glu的浓度；二异丙酚可降低海马中Glu的浓度，且两者有相减效果；而NMDAR拮抗剂对海马中Glu的浓度无显著影响。ECT可增加海马中p-AT8Ser202及推动其磷酸化的GSK-3β1H8的表达；二异丙酚和NMDAR拮抗剂可减缓海马中p-AT8Ser202及推动其磷酸化的GSK-3β1H8表达上调；两者效果相似且和ECT的影响呈相减效果。结论：二异丙酚则可通过降低海马Glu浓度减缓Tau蛋白的磷酸化，以而改善大鼠ECT后的认知能力；GSK-3β是该信号通路的关键蛋白；二异丙酚改善电休克后的认知能力的效果优于NMDAR拮抗剂。第五部分二异丙酚、人参皂苷Rg-1和氯化锂逆转电休克后嗅球切除抑郁大鼠认知障碍的神经心理学机制之比较目的：观察二异丙酚与人参皂苷Rg-1和LiCl对ECT后嗅球切除抑郁模型大鼠认知能力、海马内Glu浓度和Tau蛋白磷酸化的影响，比较其药理机制，为临床治疗案例的制定提供新的论述依据和思路。策略：按随机单位组2×4析因设计，即ECT干预（2水平：无处置、施行1疗程ECT）和药物干预（4水平：海马CA1区微量注射二异丙酚、人参皂苷Rg-1、LiCl，20μg1μL-1）的所有组合。64只嗅球切除抑郁模型大鼠随机分为8个实验组（n=8）。全部ECT处置结束后开始MWM测试，取海马通过Hplc法检测Glu的含量。Western-blotting法检测Tau-5和p-AT8Ser202在海马中的表达。结果：二异丙酚和ECT造成认知障碍，而与ECT合用则会缓解ECT后的认知障碍；人参皂苷Rg-1和LiCl可改善ECT后的认知能力；ECT可显著增加海马中Glu浓度、二异丙酚和人参皂苷Rg-1在ECT前后均可减少Glu浓度；二异丙酚与人参皂苷Rg-1和LiCl可使ECT造成的海马中磷酸化Tau蛋白的表达增加的幅度减缓。结论：二异丙酚与人参皂苷Rg-1和LiCl均可缓解ECT后Tau蛋白过度磷酸化程度进而改善ECT后的认知能力；前两者与降低海马中Glu浓度有关。全文结论1ECT导致海马Glu浓度升高，Glu激动NMDAR和AMPAR，以而通过上调GSK-3β1H8增加海马Tau蛋白的磷酸化程度，以而导致认知障碍。2GluR拮抗剂、二异丙酚、人参皂苷Rg-1亦通过降低海马Glu浓度下调GSK-3β1H8的表达，以而减缓Tau蛋白的磷酸化程度以改善ECT后的认知能力；氯化锂缓解ECT后的Tau蛋白过度磷酸化与Glu无关。3人参皂苷Rg-1和氯化锂改善ECT后的认知能力的效果优于二异丙酚；二异丙酚改善ECT后认知能力的效果优于NMDAR拮抗剂；NMDAR拮抗剂与AMPAR拮抗剂改善ECT后的认知能力的效果相似。关键词：二异丙酚论文Tau蛋白论文学习记忆论文谷氨酸论文电抽搐治疗论文
英文缩略词表6-8
摘要8-14
ABSTRACT14-22
前言22-27
第一部分 不同电流和时程的电休克相应程度地加重嗅球切除抑郁模型大鼠 Tau 蛋白过度磷酸化27-34
引言27
1 材料与策略27-33
2 结果33
3 讨论33-34
第二部分 兴奋性氨基酸受体拮抗剂减轻电休克诱发的 WYK大鼠认知障碍和 Tau 蛋白的过度磷酸化34-51
引言34
1 材料与策略34-43
2 结果43-50
3 讨论50-51
第三部分 二异丙酚逆转嗅球切除抑郁模型大鼠电休克后的 Tau 蛋白过度磷酸化和认知障碍51-67
引言51
1 材料与策略51-57
2 结果57-65
3 讨论65-67
第四部分 二异丙酚与 NMDAR 拮抗剂逆转嗅球切除抑郁模型大鼠电休克后认知障碍的神经心理学机制之比较67-76
引言67
1 材料与策略67-72
2 结果72-75
3 讨论75-76
第五部分 二异丙酚、人参皂苷 Rg-1 和氯化锂逆转电休克后嗅球切除抑郁大鼠认知障碍的神经心理学机制之比较76-85
引言76
1 材料与策略76-82
2 结果82-84
3 讨论84-85
全文结论85-86
图解全文结论86-88