摘要3-4
ABSTRACT4-10
第一章 文献综述10-24
1.1 乳腺癌发生进展探讨进展概述10-15
1.1.1 乳腺癌前病变的探讨进展10-12
1.1.2 乳腺癌发生进展方式的认识与进展12-14
1.1.3 乳腺癌亚型分型的探讨14-15
1.2 中心体及其与肿瘤相关性探讨进展15-17
1.2.1 中心体的结构与功能15-16
1.2.2 中心体异常与肿瘤的联系16-17
1.3 中心体调控因子与乳腺癌探讨进展17-19
1.3.1 中心体相关激酶17-18
1.3.2 泛素—蛋白酶体途径相关物质18
1.3.3 相关癌基因/抑癌基因及其表达产物18-19
1.4 Nek2 及其与中心体和肿瘤的探讨进展19-20
1.4.1 Nek2 的发现和其蛋白结构19
1.4.2 Nek2 对中心体的调节作用19
1.4.3 Nek2 与肿瘤的相关性19-20
1.4.4 Nek2 的剪接异构体20
1.5 染色体拷贝数异常与乳腺癌20-22
1.5.1 比较基因组杂交技术与肿瘤20-21
1.5.2 乳腺不同病变中染色体拷贝数的异常21
1.5.3 乳腺DCIS染色体拷贝数异常的特点21-22
1.6 本论文的选题思路、主要内容和探讨作用22-24
第二章 中心体γ -tubupn 和 Nek2 免疫组织化学检测24-42
2.1 引言24-26
2.2 材料与策略26-30
2.2.1 实验样本26-28
2.2.2 实验试剂28
2.2.3 实验仪器设备28
2.2.4 实验策略28-29
2.2.5 评判标准和统计学浅析29-30
2.3 结果与讨论30-39
2.3.1 γ -tubupn 蛋白表达免疫组化检测30-33
2.3.2 Nek2 蛋白表达免疫组化检测33-36
2.3.3 γ-tubupn 和 Nek2 蛋白表达免疫组化检测结果的比较36
2.3.4 DCIS 和 IDC 中γ -tubupn 和 Nek2 蛋白表达与分子亚型36-38
2.3.5 γ -tubupn 蛋白免疫组化染色显示中心体的异常38-39
2.4 小结39-42
第三章 中心体γ -tubupn 和 Nek2 流式免疫荧光定量表达和 DNA 倍性流式细胞术浅析42-61
3.1 引言42-43
3.2 材料与策略43-46
3.2.1 实验样本43
3.2.2 实验试剂43-44
3.2.3 实验仪器设备44
3.2.4 实验策略44-45
3.2.5 评判标准和统计学浅析45-46
3.3 结果与讨论46-59
3.3.1 流式细胞术 DNA 倍体测定的结果46-48
3.3.2 各组样本 DNA 含量及异倍体出现率48-50
3.3.3 γ -tubupn 流式细胞术免疫荧光检测结果50-53
3.3.4 Nek2 流式细胞术免疫荧光检测结果53-56
3.3.5 γ -tubupn 和 Nek2 免疫荧光定量检测组间变化和组内差别56-57
3.3.6 免疫荧光定量和免疫组化半定量检测结果的比较57-59
3.4 小结59-61
第四章 中心体γ -tubupn 和 Nek2mRNA 表达原位杂交检测61-76
4.1 引言61-62
4.2 材料与策略62-66
4.2.1 实验样本62
4.2.2 实验试剂62
4.2.3 实验仪器设备62-63
4.2.4 实验策略63-66
4.2.5 评判标准和统计学浅析66
4.3 结果与讨论66-74
4.3.1 γ -tubupn mRNA 表达原位杂交检测结果66-69
4.3.2 Nek2mRNA 表达原位杂交检测结果69-72
4.3.3 γ -tubupn 和 Nek2 两指标 mRNA 表达阳性率比较72-73
4.3.4 γ -tubupn 和 Nek2 两指标免疫组化和原位杂交结果比较73-74
4.4 小结74-76
第五章 中心体γ -tubupn 和 Nek2mRNA 实时定量 RT-PCR 检测76-93
5.1 引言76-78
5.2 材料与策略78-82
5.2.1 实验样本78
5.2.2 实验试剂78
5.2.3 实验仪器设备78-79
5.2.4 实验策略79-82
5.2.5 数据处理和统计学浅析82
5.3 结果与讨论82-91
5.3.1 提取总 RNA 质量的测定82-83
5.3.2 荧光实时定量 PCR 扩增反应结果83-84
5.3.3 各种样本组间γ -tubupn mRNA 表达量的比较84-86
5.3.4 六组样本 Nek2 mRNA 表达量的比较86-87
5.3.5 六组样本γ -tubupn 和 Nek2 mRNA 两指标定量表达的比较87-88
5.3.6 六组样本两个指标各自 mRNA 半定量和定量表达走势的比较88-89
5.3.7 六组样本两个指标各自蛋白和 mRNA 定量表达的比较89-91
5.4 小结91-93
第六章 乳腺癌及癌前病变染色体 DNA 拷贝数变化及与γ -tubupn 表达的相关性93-137
6.1 引言93-94
6.2 材料与策略94-104
6.2.1 实验样本94
6.2.2 实验试剂94-96
6.2.3 实验仪器设备96-97
6.2.4 实验策略97-103
6.2.5 评判标准和统计学浅析103-104
6.3 结果与讨论104-134
6.3.1 CGH 浅析结果观察104-107
6.3.2 每例染色体的增益、缺失和总的变化数107-110
6.3.3 低级别癌中比较染色体的异常转变110-114
6.3.4 高级别癌中比较染色体的异常转变114-122
6.3.5 ADH 和 LG-DCIS、LG-IDC 染色体的异常的比较122-127
6.3.6 γ -tubupn 不同程度表达组中染色体的异常转变127-134
6.4 小结134-137
第七章 探讨工作总结革新点展望137-141
7.1 探讨工作总结137-138
7.2 主要革新点138-139
7.3 不足与展望139-141