摘要8-9
Abstract9-11
1 引言11-18
1.1 本研究的目的和11
1.2 亚硝酸还原酶的研究现状11-15
1.2.1 亚硝酸还原酶的分布和类型12-13
1.2.2 亚硝酸还原酶的结构13
1.2.3 亚硝酸还原酶基因的表达调控13-14
1.2.4 亚硝酸还原酶活性的调节14-15
1.2.5 植物中已克隆的亚硝酸还原酶基因15
1.3 生物信息学研究现状15-16
1.4 本研究的来源及内容16-18
1.4.2 本研究课题的来源16
1.4.3 本研究的主要内容16-18
2 与方法18-38
2.1 试验18-19
2.1.1 供试品种18
2.1.2 试验所涉及的菌株和质粒18
2.1.3 试验所涉及的酶,试剂盒和生化试剂18-19
2.1.4 主要仪器设备19
2.2 甜菜亚硝酸还原酶cDNA 的克隆19-33
2.2.1 试验甜菜的用前准备19
2.2.2 甜菜叶片总RNA 的提取19-20
2.2.3 反转录合成cDNA 的链20-21
2.2.4 P 的克隆21-23
2.2.5 cDNA5′端的克隆23-28
2.2.6 cDNA3′端的克隆28-32
2.2.7 cDNA 全长的克隆32-33
2.3 甜菜亚硝酸还原酶基因组DNA(gDNA)的克隆33-35
2.3.1 试验甜菜的用前准备34
2.3.2 提取34
2.3.3 gDNA 的完整性分析34
2.3.4 gDNA 全长的克隆34-35
2.4 甜菜亚硝酸还原酶的生物信息学分析35-38
2.4.1 生物信息学软件和网络怎么写作器36
2.4.2 甜菜 NiR 基因编码蛋白的结构分析36-37
2.4.3 甜菜NiR 基因编码蛋白的功能分析37-38
3 结果与分析38-54
3.1 甜菜亚硝酸还原酶cDNA 的克隆38-44
3.1.1 甜菜总RNA 的提取及检测38
3.1.2 P 的克隆38-39
3.1.3 cDNA5′端的克隆39-41
3.1.4 cDNA 3′端的克隆41-43
3.1.5 cDNA 全长的克隆43-44
3.2 甜菜亚硝酸还原酶基因组 DNA(gDNA)的克隆44-45
3.3 甜菜亚硝酸还原酶的生物信息学分析45-54
3.3.1 甜菜NiR 基因编码蛋白的结构分析45-52
3.3.2 甜菜NiR 基因编码蛋白的功能分析52-54
4 讨论54-56
4.1 试验选材54
4.2 RACE 法克隆目的基因54
4.3 甜菜NiR 的生物信息学分析54-56
5 56-57
致谢57-58