内皮蒲灵化瘀止痛方对子宫腺肌病模型小鼠异位和在位内膜血管生成相关因子不同影响实验查抄袭率

摘要：目的：探讨蒲灵化瘀止痛方对子宫腺肌病(Adenomyosis,以下简称AM)小鼠异位及在位内膜血管内皮生长因子(VEGF)、内皮抑素(ENS)、微血管密度(MVD)表达的影响,以血管生成相关因子的角度揭示蒲灵化瘀止痛方治疗AM的作用机理。策略：以健康雌性未孕7周龄ICR小鼠为探讨对象,行经腹同种异体小鼠垂体宫腔移植术,手术后3月形成AM小鼠模型。将AM小鼠随机分为蒲灵化瘀止痛方高剂量组、中剂量组、低剂量组、丹莪妇康煎膏组、孕三烯酮组、模型组、空白组,连续给药12周后,采取HE染色,观察不同组子宫内膜腺体与间质侵入子宫肌层的程度,采取免疫组化SP法染色,检测异位和在位子宫内膜的血管内皮生长因子(VEGF)、内皮抑素(ENS)的表达,并通过CD31标记异位子宫内膜血管内皮细胞,测定其微血管密度(MVD)。结果：(1)蒲灵化瘀止痛方高、中剂量组、孕三烯酮组和丹莪妇康煎膏组能降低模型小鼠异位内膜VEGF的表达,其中蒲灵化瘀止痛方高剂量组减少最为显著(P0.01),与蒲灵化瘀止痛方低剂量组比较,差别具有极显著性(P0.01)。蒲灵化瘀止痛方高、中、低剂量组、孕三烯酮组、丹莪妇康煎膏组均能显著降低模型小鼠在位内膜VEGF的表达(P0.01)。(2)蒲灵化瘀止痛方高、中、低剂量组、孕三烯酮组和丹莪妇康煎膏组能显著降低模型小鼠异位内膜ENS的表达(P0.01)。蒲灵化瘀止痛方高、中、低剂量组、孕三烯酮组和丹莪妇康煎膏组能显著降低模型小鼠在位内膜ENS的表达(P0.01)。(3)蒲灵化瘀止痛方高、中、低剂量组、孕三烯酮组、丹莪妇康煎膏组均能降低模型组小鼠异位内膜VEGF/ENS的比值,其中蒲灵化瘀止痛方高剂量组、孕三烯酮组降低最为显著(P0.01)。蒲灵化瘀止痛方高、中、低剂量组、丹莪妇康煎膏组能降低模型小鼠在位内膜VEGF/ENS的比值,但无统计学作用(P0.05)。(4)蒲灵化瘀止痛方高、中、低剂量组、孕三烯酮组、丹莪妇康煎膏组能降低模型小鼠异位内膜MVD的表达。蒲灵化瘀止痛方高、中、低剂量组、孕三烯酮组、丹莪妇康煎膏组能上调模型小鼠在位内膜MVD的表达,其中蒲灵化瘀止痛方高、中、低剂量组上调最为显著(P0.01),与孕三烯酮组、丹莪妇康煎膏组比较,差别具有极显著性(P0.01)。结论：(1)蒲灵化瘀止痛方可降低AM模型小鼠异位和在位内膜中VEGF的表达,虽然同时降低了ENS的表达,但AM模型小鼠异位内膜VEGF/ENS比值显著降低,且MVD表达有下调走势,说明蒲灵化瘀止痛方通过降低VEGF/ENS比值,抑制异位内膜血管生长。(2)蒲灵化瘀止痛方高剂量组显著降低AM模型小鼠异位和在位内膜VEGF的表达,与蒲灵化瘀止痛方低剂量组比,有显著性差别,说明不同药物剂量对VEGF表达有不同的影响,药物剂量和影响程度呈正相关。(3)蒲灵化瘀止痛方高剂量组、孕三烯酮组与蒲灵化瘀止痛方中、低剂量组、丹莪妇康煎膏组相比,可显著降低AM模型小鼠异位VEGF/ENS比值,说明蒲灵化瘀止痛方高剂量组、孕三烯酮组抑制血管生成作用显著优于其它各组。(4)蒲灵化瘀止痛方减少经量,其机制可能是抑制在位内膜血管生成,减少在位内膜血管数量。蒲灵化瘀止痛方缩小病灶、减轻痛经程度,其机制可能是抑制异位内膜血管生成,减少异位内膜血管数量。关键词：蒲灵化瘀止痛方论文子宫腺肌病论文异位和在位内膜论文组织形态学论文血管内皮生长因子论文内皮抑素论文微血管密度论文

中文摘要2-4

ABSTRACT4-8

目录8-11

引言11-13

1. 实验探讨13-26

1.1. 实验材料13-15

1.1.1. 实验动物13

1.1.2. 实验动物环境13

1.1.3. 实验药物13-14

1.1.4. 实验试剂14

1.1.5. 实验仪器和设备14-15

1.2. 实验策略15-17

1.2.1. 动物模型的建立15

1.2.2. 实验分组与给药剂量15-16

1.2.3. 给药方式16

1.2.4. 标本采集与处理策略16-17

1.3. 观测指标与策略17-19

1.3.1. 组织形态学观察17

1.3.1.1.苏木素-伊红(HE)制片及染色策略17

1.3.1.2. 组织形态学观察17

1.3.2. 异位和在位内膜VEGF、ENS、MVD的表达17-19

1.3.2.1. 免疫组化制片及染色策略17-18

1.3.2.2. 异位和内膜VEGF、ENS的检测策略18

1.3.2.3. 异位和在位内膜MVD的检测策略18-19

1.3.2.4. 形态计量学指标的作用19

1.4. 统计学浅析19

1.5. 实验结果19-26

1.5.1. 肉眼观察19

1.5.2. 组织形态学变化19-20

1.5.3. 蒲灵化瘀止痛方对异位和在位内膜血管生成相关因子的影响20-26

1.5.3.1. 对异位和在位内膜VEGF表达的影响20-22

1.5.3.2. 对异位和在位内膜ENS表达的影响22-23

1.5.3.3. 对异位和在位内膜MVD表达的影响23-25

1.5.3.4. 对异位和在位内膜VEGF/ENS比值的影响25-26

2. 讨论26-37

2.1. 中医学对子宫腺肌病的认识26-27

2.2. 现代医学对子宫腺肌病的发病机制的认识27-29

2.3. 蒲灵化瘀止痛方的组方依据和组方浅析29-31

2.4. 子宫腺肌病动物模型的确立31-33

2.5. 蒲灵化瘀止痛方对异位和在位内膜血管生成相关因子的影响和作用33-35

2.6. 血管生成与子宫腺肌病临床症状的相关性35-37

结论37-38

不足及展望38-39

1. 不足38

2. 展望38-39

致谢39-40