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摘要：目的：近些年来资料显示中国痛风的发病率呈逐年上升走势且其发病年龄呈年轻化走势。临床治疗痛风的各类新型药物正不断涌现。非布司他是一种新型的非嘌呤类的黄嘌呤氧化酶抑制剂,其通过占据进入酶活性部位的通道而阻止底物进入嘌呤氧化酶的蝶呤部位,抑制次黄嘌呤生成黄嘌呤,以而抑制尿酸形成。该药主要通过肝脏代谢,而不依赖肾脏排出。欧盟已于2008年4月批准其上市,美国FDA也在2009年2月批准其上市用于治疗高尿酸血症,但国内尚未上市。目前已有文献未有关于非布司他在中国人群中的药代动力学和药效学探讨的报道。本论文旨在探讨非布司他在中国人群中的药动学特点,同时与国外报道的文献比较看是否有着差别。为此,本实验进行了单次和多次给药药代动力学探讨、进食对药物药代动力学影响的探讨及国内外人群药代动力学差别和性别差别的探讨。策略：1.非布司他在人体的药代动力学探讨。建立LC-MS/MS法测定非布司他在人血浆中的浓度。本试验招募12名健康受试者,包括开展两部分探讨内容：①单次和多次给药药代动力学探讨：采取1制剂3剂量水平(分别服用非布司他片40mg、80mg和120mg)3周期随机交叉自身对照试验设计策略,三个剂量水平组中40mg和80mg在单次采血完成后做多次给药和采血,120mg组仅做单次给药。②进食对药物药代动力学影响的探讨：采取1制剂1剂量水平(80mg)2周期随机交叉自身对照试验设计策略,受试者按随机分组情况,分别在试验当日清晨空腹口服非布司他片或统一进高脂早餐后口服非布司他片。血浆中非布司他浓度采取液相色谱串联质谱法检测。采取DAS2.1.1软件计算药代动力学参数。2.非布司他在人体的药效学探讨。血清中尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤的浓度采取Hplc法检测。结果：血浆中非布司他浓度测定的线性范围是13.4～21440ng·mL-1,日间与日内精密度均10%。计算求得单次口服40、80、120mg非布司他片后的主要药代动力学参数如下：AUC0-t分别为(9266.28±3720.80) ng·L-1·h、(21925.22±11303.59) ng·mL-1·h和(33845.27±15744.68) ng·mL-1·h, AUC0-∞分别为(9426.72±3715.53) ng·mL-1·h、(22118.06±1374.98)ng·mL-1·h和(34102.50±15895.04) ng·mL-1·h, MRT0-t分别为(4.16±1.00)h、(4.52±0.66)h和(4.58±0.76)h,MRT0-∞分别为(4.70±1.29)h、(4.84±0.82)h和(4.88±0.98)h,t1/2Z分别为(5.10±2.63)h、(5.48±2.02)h和(5.73±4.09)h,Tmax分别为(1.90±1.05)h、(2.13±0.83)h和(1.96±0.84)h,CLz/F分别为(4.88±1.86)L·h-1、(4.46±1.92)L·h-1和(4.16±1.56)L·h-1,Vz/F分别为(34.12±19.69)L、(31.72±11.17)L和(31.99±16.83)L,Cmax分别为(2857.89±1072.38) ng·mL-1、(6750.10±3516.50) ng·mL-1和(9534.84±4369.62)ng·mL-1。计算求得多次口服40、80mg非布司他片后的主要药代动力学参数如下：AUCss分别为(7877.01±3728.81) ng·mL-1·h和(16822.71±7244.85) ng·L-1·h, AUC0-t分别为(8039.59±4054.88) ng·mL-1·h和(17053.28±7738.57) ng·mL-1·h, AUC0-∞分别为(8215.28±4142.48)ng·mL-1·h和(17255.52±7846.97)ng·mL-1·h,MRTo-t分别为(4.55±1.48)h和(4.50±0.88)h,MRT0-∞分别为(5.18±1.83)h和(4.83±1.03)h,tl/2Z分别为(5.74±4.52)h和(5.07±2.41)h,Tmax分别为(2.21±1.57)h和(1.79±0.89)h,CLz/F分别为(5.86±2.33)L·h-1和(5.43±2.07)L·h-1,Vz/F分别为(38.73±15.60)L和(34.85±9.01)L,Csax分别为(2480.43±1399.36)ng·mL-1和(4717.31±2054.50)ng·mL-1,Csin分别为(24.27±29.18)ng·mL-1和(45.54±46.94)ng·mL-1,C分别为(328.21±155.37)ng·mL-1和(700.95±301.87)ng·mL-1,DF分别为(7.25±2.52)ng·mL-’和(6.95±2.23)ng·mL-1。计算求得进食和空腹状态下口服非布司他片80mg后的主要药代动力学参数如下：AUCo-t分别为(17240.06±5067.33ng·mL-1·h和(19346.89±7644.93)ng·mL-1·h,AUC0-∞分别为(17365.82±5100.10)ng·mL-1·h和(19602.30±7635.54)ng·mL-1·h,MRT0-t分别为(5.95±1.47)h和(4.69±0.68)h,MRT0-∞分别为(6.17±1.52)h和(5.24±0.99)h,t1/2Z分别为(4.59±1.48)h和(6.40±3.22)h,Tmax分别为(2.71±1.91)h和(1.88±1.05)h,CLz/F分别为(5.01±1.56)L·h-1和(2.34±0.97)L·h-1,Vz/F分别为(2.76±16.65)L和(20.41±11.01)L,Cmax分别为(3469.43±1420.15)ng·mL-1和(5280.54±2036.03)ng·mL-1。血清中尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤的线性范围分别是1.667～166.667μg·mL-1(γ=0.9995),0.033～3.338μg·mL-1(γ=0.9994)和0.033～3.338μg·mL-1(γ=0.9996),日间与日内精密度均15%。结论：非布司他片单次给药Cmax、AUC0-t和AUC0-∞与给药剂量呈良好的线性联系；非布司他片多次给药试验中,加大剂量和多剂量给药并没有引起分布容积的相似变化,由此可知,给药策略的转变并未影响非布司他的组织分布,非布司他没有蓄积；进食状态下口服80mg非布司他片与空腹状态下口服后相比,即使食物引起的非布司他的吸收速度和程度的减少,这种减少在非布司他临床的药效变化是不相关的,由此,服用非布司他片可以不管给药前是否有食物摄入；非布司他片80mg多次给药达稳态后,男性的Cmax低于女性,男性的Tmax大于女性,有显著性差别；非布司他在中国人群暴露水平以AUC计,较国外显著升高,提示该药具有人种差别,在临床剂量设置中是否需要减量利用,有待于进一步进行代谢探讨及大规模临床试验证明。试验历程中未观察到显著不良反应,该药耐受性较好。人体血清中的尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤的浓度测定采取Hplc-UV法,该法灵敏度高,精密度和准确度佳,能满足非布司他体内药效学探讨的需要。比较浅析10名健康人体血清样本中尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤的浓度与相应的非布司他血药浓度,可知随着非布司他给药剂量的增加,尿酸的含量呈显著下降走势,黄嘌呤和次黄嘌呤的含量呈相应上升走势,表明非布司他能够有效治疗痛风,且药效与给药剂量成线性联系。关键词：非布司他论文HPLC-MS/MS论文人血浆论文药代动力学论文HPLC-UV论文人血清论文尿酸论文黄嘌呤论文次黄嘌呤论文药效学论文
致谢4-5
中文摘要5-9
Abstract9-13
插图和附表清单13-17
缩略语17-19
目次19-21
引言21-23
第一章 非布司他在人体内的药动学浅析23-74
1 材料与仪器23-25
1.1 药品与试剂23
1.2 实验仪器23-25
2 实验案例25-29
2.1 实验案例设计25-26
2.2 血样采集26
2.3 受试者选择26-29
3 实验策略29-31
3.1 色谱条件29
3.2 质谱条件29
3.3 标准溶液配制29
3.4 血浆样品处理29-30
3.5 统计学浅析30-31
4 结果31-70
4.1质谱扫描图31
4.2 测定策略学验证31-44
4.3 实测数据44
4.4 血药浓度-时间曲线44-58
4.5 药代动力学参数58-65
4.6 药代动力学数据浅析65-69
4.7 结论69-70
5 讨论70-71
附表71-74
第二章 人血清样品中尿酸(UA)、黄嘌呤(X)和次黄嘌呤(HX)定量浅析策略建立与确证74-87
1 材料和仪器74-76
1.1 药品和试剂74-75
1.2 实验仪器75-76
2 实验案例76-79
2.1 空白血清处理76
2.2 色谱条件76
2.3 策略学考察76-79
3 实验结果79-85
3.1 策略专属性79-80
3.2 标准曲线与定量限80
3.3 回收率和精密度实验80-81
3.4 稳定性实验81-85
4 实测数据85-86
5 讨论86-87
第三章 非布司他在人体内的药动-药效学探讨87-93
1 非布司他的药效学指标87-88
2 非布司他的药动-药效学数据88-89
3 非布司他的药动-药效的走势浅析89
4 讨论89-90
附图90-93