中文摘要5-6
Abstract6-8
目录8-10
缩略语10-11
第一章 绪论11-25
1 细胞白介素-111-14
1.1 IL-1与类风湿性关节炎12-13
1.2 IL-1ra13-14
1.3 Anakinra14
2 蛋白类药物14-20
2.1 长效重组蛋白类药物15-16
2.2 蛋白类药物的药代动力学探讨16-18
2.3 蛋白类药物靶向技术18-20
3 类风湿性关节炎动物模型20-23
3.1 胶原诱导的类风湿性关节炎模型(CIA,Collagen-Induced Arthritis)20
3.2 蛋白聚糖诱导关节炎(PGIA,proteoglycan-induced arthritis)20-21
3.3 链球菌细胞壁关节炎(SCW)21
3.4 佐剂型关节炎(AIA,Adjuvant-Induced Arthritis)21
3.5 油诱导的关节炎(OIA,oil-induced arthritis)21-22
3.6 朴日斯烷诱导的关节炎(Pristane-induced arthritis)22
3.7 转基因自发性模型22-23
4 立题背景23-24
5 实验案例设计24-25
第二章 IL-1RA和HSA-IL-1RA的表达、纯化及体外活性浅析25-38
1 实验材料与仪器25-27
1.1 主要仪器25
1.2 主要试剂25-26
1.3 表达菌株26
1.4 细胞株26
1.5 溶液配制26-27
2 实验策略27-30
2.1 融合蛋白的表达27
2.2 融合蛋白的分离纯化27-28
2.3 Western Blot鉴定28-29
2.4 融合蛋白体外活性浅析29-30
3 结果30-37
3.1 融合蛋白的表达及Western Blot鉴定30-31
3.2 分步梯度洗脱31-32
3.3 HSA-IL-1ra的纯化32-33
3.4 MTT法测HSA-IL1Ra融合蛋白的活性33-35
3.5 HSA-IL-1Ra结合A375-S2细胞表面受体功能35-37
4、讨论37-38
第三章 IL-1RA和HSA-IL-1RA在CIA小鼠中的药代动力学及药效学探讨38-56
1 实验材料38
1.1 实验动物38
1.2 实验试剂38
2 试验策略38-43
2.1 胶原诱导的类风湿性关节炎模型的建立38-39
2.2 初步药代动力学探讨39-40
2.3 融合蛋白对CIA小鼠的影响40-43
3 结果43-54
3.1 CIA模型的建立43-44
3.2 小鼠体重的变化44-45
3.3 小鼠炎症评分45-46
3.4 关节病理切片结果46-47
3.5 ~(125)I-HSA-IL-1ra和~(125)1-IL-1ra的血药浓度-时间曲线47-48
3.6 ~(125)I- HSA-IL-1ra和~(125)I-IL-1ra在小鼠体内组织器官的分布情况48-51
3.7 HSA-IL-1ra和IL-1ra对小鼠炎症评分的影响51
3.8 病理学检测结果51-53
3.9 荧光定量PCR检测各治疗组组炎症因子表达水平53-54
4 讨论54-56
第四章 结论56-57