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论羟脯氨酸益母草抗皮肤光老化实验

收藏本文 2024-03-04 点赞:16196 浏览:70235 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:目的:本项探讨依据中医药基础论述,运用生化浅析及免疫组化等策略,观察紫外线照射引起的小鼠皮肤光老化模型血清及皮肤组织中SOD、GSH-Px和CAT的活性;H2O2、MDA以及HYP含量的变化;Bax、Bcl-2、TGF-β1蛋白表达水平的变化;皮肤组织结构的变化,以及中药益母草的干预作用及其可能的作用机制。材料与策略:165只清洁级昆明种45日龄小鼠,体重18±2.2g,均为雌性,随机分成11组:正常对照组(A)、模型对照组(B)、模型对照组(C)、‘阳性药物预防组(D)、外用益母草低剂量预防组(E)、外用益母草中剂量预防组(F)、外用益母草高剂量预防组(G)、灌胃益母草低剂量预防组(H)、灌胃益母草中剂量预防组(I)、灌胃益母草高剂量预防组(J)、治疗组(K)。A组小鼠正常饲养,不做任何处理。以实验开始至实验结束(第1周至第13周末),B组小鼠每日背部涂抹生理盐水0.4ml;C组小鼠每日经口灌胃0.4ml生理盐水;D组小鼠每日背部涂抹VitE一粒;E、F、G组为外用药预防组,给予益母草赋形剂进行背部皮肤外涂预防(浓度分别为4%、8%、16%);H、I、J组为经口灌胃预防组,每日经口灌胃0.4ml相应浓度的益母草进行预防(用药量分别为0.78、1.56、3.12g生药/kg,相当于益母草煎液浓度0.039、0.078、0.156g/ml),以上各组于第3周起,在给药30min之后,进行紫外线照射;K组小鼠实验前2周不作任何处理,第3周起先给予紫外线照射,照射结束30min之后,外涂中剂量益母草进行治疗。第14周起终止紫外线照射,继续进行益母草外涂治疗2周。HE染色,光镜下观察皮肤组织结构的转变,并用生化浅析策略测定SOD、CAT和GSH-Px的活性,MDA、H2O以及HYP的含量,免疫组化法检测Bax、Bcl-2、TGF-β1蛋白表达水平的变化情况。结果:1.动物造模实验中,光老化小鼠皮肤组织中SOD、CAT和GSH-Px活性显著降低(P0.01),MDA、H2O含量显著增加(P0.01);HYP含量显著减少(P0.01);皮肤组织病理切片呈现光老化状态。2.外用益母草各剂量预防组与模型对照组B比较,灌胃益母草各剂量预防组与模型对照组C比较,外用及灌胃各剂量组小鼠皮肤组织中HYP含量均有显著升高,差别有统计学作用(P0.05,P0.01);组间比较显示:外用低剂量组与灌胃低剂量组HYP含量比较,差别有统计学作用(P0.05);外用中剂量组与灌胃中剂量组HYP含量比较,无统计学作用(P0.05);外用高剂量组与灌胃高剂量组HYP含量比较,差别有统计学作用(P0.05)。3.外用益母草各剂量预防组与模型对照组B比较,灌胃益母草各剂量预防组与模型对照组C比较,外用及灌胃各剂量组小鼠皮肤组织中MDA含量下降,SOD活力增高,具有显著性差别(P0.01)。组间比较显示:外用低剂量组与灌胃低剂量组MDA含量比较,差别有统计学作用(P0.01);外用中剂量组与灌胃中剂量组MDA含量比较,无统计学作用(P0.05):外用高剂量组与灌胃高剂量组MDA含量比较,差别有统计学作用(P0.05)。外用低、中、高剂量组分别与灌胃低、中、高剂量组SOD活力比较,无统计学作用(P0.05)。4.外用益母草各剂量预防组与模型对照组B比较,灌胃益母草各剂量预防组与模型对照组C比较,外用及灌胃益母草各剂量组小鼠皮肤组织中CAT活力提升、GSH-Px活力提升、H2O2含量降低,差别有统计学作用(P0.05,P0.01)。组间比较显示:外用低、中、高剂量组分别与灌胃低、中、高剂量组CAT活力比较,无统计学作用(P0.05)。外用中、高剂量组与灌胃中、高剂量组GSH-Px活力比较,差别有统计学作用(P0.05)。外用中、高剂量组与灌胃中、高剂量组H2O2含量比较,无统计学作用(P0.05)。5.外用益母草各剂量预防组与模型对照组B比较,灌胃益母草各剂量预防组与模型对照组C比较,外用及灌胃益母草各剂量组小鼠皮肤组织中Bax蛋白表达下调、Bcl-2蛋白表达上调、TGF-β1蛋白表达上调,差别有统计学作用(P0.01)。组间比较显示:外用低、中、高剂量组分别与灌胃低、中、高剂量组Bax比较,无统计学作用(P0.05)。外用高剂量组与灌胃高剂量组Bcl-2蛋白表达水平比较,差别有统计学作用(P0.01)。外用高剂量组与灌胃高剂量组TGF-β1蛋白表达水平比较,差别有统计学作用(P0.01)。6.与模型对照组B比较,治疗组(K组)小鼠皮肤组织中SOD、CAT、GSH-Px活性增强,差别有统计学作用(P0.01);H2O2、MDA含量降低,差别有统计学作用(P0.01);HYP含量提升,差别有统计学作用(P0.01);Bcl-2蛋白表达上调,Bax蛋白表达下调,TGF-β1蛋白表达上调,差别有统计学作用(P0.01)。结论:1.利用紫外线的长期照射可成功复制皮肤光老化动物模型。紫外线照射所致小鼠皮肤光老化,其皮肤组织有显著的氧化损伤,皮肤组织中细胞凋亡加速。2.外用益母草低中高剂量预防组疗效有差别;灌胃益母草低中高剂量预防组疗效无差别。益母草外用疗效优于灌胃。3.益母草可通过清除自由基;提升机体抗氧化能力、提升酶活力;减轻小鼠皮肤组织的氧化损伤,推动胶原蛋白合成,减缓细胞凋亡,以而预防皮肤光老化。益母草对皮肤光老化的修复作用可能与促使TGF-β1上调,以而推动胶原蛋白合成有关。4.益母草亦能够修复小鼠光老化皮肤的组织损伤。关键词:益母草论文皮肤光老化论文自由基论文羟脯氨酸论文抗氧化酶论文

    中文摘要6-9

    Abstract9-12

    文献综述12-36

    综述一 益母草的探讨概况12-22

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