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摘要：本实验室前期探讨表明，源自花椒的天然活性物质GX‐50对于NF‐κB途径有抑制作用，根据文献报道，NF‐κB途径的抑制可以逆转皮肤衰老的发生,由此我们对GX‐50是否具有抗皮肤衰老的作用进行了探究。本实验室前期探讨采取20月龄高龄小鼠建立自然衰老模型，在小鼠背部涂药，以小鼠脊柱为对称轴，左侧涂抹GX‐50，右侧涂抹等量的PBS作为对照，运用苏木精‐伊红(HE)染色和免疫组化的策略对GX‐50的作用进行组织学观测，并采取Image J软件对皮肤组织免疫组化切片中胶原蛋白含量变化进行浅析，实验结果提示GX‐50在组织水平可能具有有效保护小鼠皮肤、一定程度地逆转高龄小鼠皮肤衰老的发生、增加高龄小鼠皮肤胶原蛋白的表达的作用。在组织水平，本探讨采取Western blot对上面陈述的涂药小鼠实验组和对照组皮肤组织胶原蛋白含量的变化进行检测。在细胞水平，以体外原代培养的肤成纤维细胞为探讨对象，用过氧化氢处理细胞建立人工衰老模型。采取β‐半乳糖苷酶染色法，细胞分泌物丙二醛（MDA）变化的检测和细胞胞内活性氧（ROS）含量变化的测定探讨GX‐50抗皮肤细胞衰老的作用。采取Draize兔眼刺激性实验对GX‐50的刺激性进行评价。Western blot实验结果显示，GX‐50在组织水平可以在一定程度上有效地增加胶原蛋白的表达。在细胞水平，β‐半乳糖苷酶染色实验结果显示：GX‐50预处理后过氧化氢处理组肤成纤维细胞β‐半乳糖苷酶染色阳性率显著低于过氧化氢单独处理组； MDA检测结果显示：GX‐50处理组比空白组MDA分泌量下降30.45%，GX‐50预处理后过氧化氢处理组比过氧化氢单独处理组MDA分泌量下降61.46%；肤成纤维细胞胞内ROS荧光检测显示：GX‐50处理组比对照组荧光值下降8.03%，GX‐50预处理后过氧化氢处理组比过氧化氢单独处理组荧光值下降8.36%。根据Draize兔眼刺激性实验评价标准：GX‐50各项刺激性均为零，表明对兔眼无刺激。综上所述，GX‐50可以一定程度保护皮肤并逆转皮肤衰老的发生，且根据经典的Draize评价标准对兔眼无可见刺激性，故可能具有作为护肤品有效添加剂的运用前景。关键词：GX‐50论文皮肤衰老论文胶原蛋白论文丙二醛论文活性氧论文
摘要5-6
ABSTRACT6-9
符号与缩写9-10
第一章 绪论10-34
1.1 皮肤衰老的基本体现10-11
1.2 皮肤衰老的生物学机制11-15
1.3 皮肤衰老与细胞衰老15-20
1.4 皮肤衰老模型20-22
1.5 皮肤衰老检测指标22-24
1.6 NF - κB 与皮肤衰老24-27
1.7 抗皮肤衰老的探讨进展27-29
1.8 GX - 50 与皮肤衰老29-34
1.9 不足的提出34
第二章 G X - 50 延缓皮肤衰老的探讨34-57
2.1 材料和试剂34-38
2.2 策略38-49
2.3 结果49-55
2.4 讨论55-57
第三章 全文总结57-58