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摘要： 本文通过介绍电位法快速检测的工作原理和方法，对电位法快速检测叶菜类食物农残的实施步骤及效果进行实例剖析，并与检测农残的常规紫外分光光度法进行对比，提出了一种新型的现场快速检测方法。
关键词：电位法 快速检测 叶菜类 有机磷农药 农药残留
一、前言
叶菜类蔬菜，其生长周期短，是人体每天必需营养的重要来源之一。人类对叶菜类蔬菜食用叶片或全株，对其食用量大，且难以通过去皮等方式清除残留农药；蔬菜农药残留超标，会直接危及人体的肝、肾等重要器官和神经系统；农药在人体内蓄积超过一定量度后会导致一些慢性疾病，如肌肉麻木、咳嗽等，甚至会诱发糖尿病、血管疾病和癌症等，所以人们对叶菜类蔬菜的农药残留尤为关注。
对农残最高限量的监控，相应的检验方法有三条思路：一是制定单一组分的配套检验方法，二是研究适于现场分析的快速检验方法，三是研究多组分系统分析方法。
目前我国有机磷农药残留的分析方法有气相色谱法、薄层色谱法以及快速测定方法——酶抑制法。
本研究依据酶抑制原理，以乙酰胆碱酯酶为检测用酶，建立快速测定有机磷农药残留的电位法， 与国家规定的最大残留限量（MRL） 比较，检验该法对农药的最低检测限（LDC）是否可以达到MRL限值要求，对该方法检测农残的灵敏度作评价，同时与常规的分光光度法的灵敏度相比较，以研究电位法是否可以作为新型的快速现场检测方法。
非叶菜类：生姜、大蒜
3、 仪器与设备
第一，采用电位法快速测定有机磷农药残留， 与国家规定的最大残留限量（MRL）比较，检测和评价该方法对于农残检测的最低检测限（LDC）及灵敏度。
第
试验证明，室温对试验的结果有影响但不显著，检测设成立。
同样方法，分别计算出氧化乐果、乐果、敌敌畏的抑制率，见表3；使用SPSS 13.0 for windows软件进行曲线拟合及回归分析，以抑制率对农药浓度的负对数做工作曲线，得出线性方程、灵敏度和相关系数，如表4所示：
注：y为抑制率；x为农药浓度的负对数
对于同一种乙酰胆碱酯酶，当农药溶液浓度达到抑制酶活的程度时，其抑制率将≥50%。由表4可知，所测农药浓度与对酶抑制率的相关系数都在0.91以上，相关性较好，电位法满足对有机磷农药残留快速检测的要求。
由表4可知，电位法可检测的氧化乐果、乐果、敌敌畏最低检测限（LDC）分别为：5.56×e– 6 mg/kg、8.04×e– 4mg/kg、3.997×e– 4 mg/kg。而国家规定的最大残留限量（MRL）为：氧化乐果≤0.20mg/kg、乐果≤1.00mg/kg、敌敌畏≤0.20mg/kg[9]。电位法所能检测的农药的最低检测限（LDC）达到国家规定的最大残留限量（MRL），用电位法快速测定农药残留的方法可行。
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中含有有机磷农药存在。实际试验中，加入同剂量同浓度的农药溶液，在叶菜类中三种农药都可检出，证明电位法作为快速测定叶菜类中农药残留的方法可行。
分光光度法检测出的抑制率≥50%，证明有农药残留存在并可检出。当氧乐果、乐果、敌敌畏浓度为0.5μg/ml时，使用常用的分光光度法测定其农残，抑制率均≥50%；在电位法的快速测定中，测得的三种农药残留抑制率均≥50%。两组实验对比说明，在同一个水平上，电位法和分光光度法快速检测同样可行。
受条件限制，本实验测试农药种类不够广泛，就检测的三种农药而言，在同一农药残留浓度上两种方法灵敏度不相上下，至于其它种类的农药，则需要进一步的相关研究。
六、结论
本次研究表明，电位法在最佳反应条件下测定农药残留的方法可行性和灵敏度都较好，在这三种农药中，其LDC都远低于国家规定的最大残留限量（MRL），完全可以满足实际检测的需要。
本研究进一步发现，电位法可检测含农残的叶菜类蔬菜包括：生菜、小白菜、麦菜、油菜、包菜、芥菜等，而对非叶菜类蔬菜中的农残检出力低。该现象的原因可能是非叶菜类蔬菜中含有破坏乙酰胆碱酯酶活性的物质，如大蒜中的含硫化合物，白萝卜中的硫氰酸盐，胡萝卜中的β-胡萝卜素等。
本实验作为方法学的探讨，证实了利用乙酰胆碱酯酶抑制法快速检测农药残留技术在时间、成本、速度等方面都比传统仪器分析方法有明显优势的电位法作为叶菜类蔬菜中农残的快速检测方法的可行性，将促使其在农药残留快速检测领域中得到进一步的应用和推广。
参考文献：
中国标准出版社.农药残留国家标准汇编[M].北京：中国标准出版社，2000.62.
纪淑娟，赵丽丽，冯辉.一种快速检测农产品有机磷农药残留的方法[J].农药，2000，39（10）：17～18.
[3] 王亮，潘瑷，徐婉莉，等.食品农药残留快速检测技术研究进展[J].食品科技.2005（10）：74～76.
[4] 汪世新.蔬菜农药残留速测方法中若干问题的操作[J].农业环境与发展，2002.19（2）：43.
关键词：电位法 快速检测 叶菜类 有机磷农药 农药残留
一、前言
叶菜类蔬菜，其生长周期短，是人体每天必需营养的重要来源之一。人类对叶菜类蔬菜食用叶片或全株，对其食用量大，且难以通过去皮等方式清除残留农药；蔬菜农药残留超标，会直接危及人体的肝、肾等重要器官和神经系统；农药在人体内蓄积超过一定量度后会导致一些慢性疾病，如肌肉麻木、咳嗽等，甚至会诱发糖尿病、血管疾病和癌症等，所以人们对叶菜类蔬菜的农药残留尤为关注。
二、我国农药残留标准体系及检验分析方法
由于农药残留对人类及其他生物危害极大，我国对有机磷农药实行严格管理，规定了食品中各种农药的MRL值（即食品中农药最高残留限量标准），来衡量食品中农药是否超过标准。现在，国家标准已对124种中的106种农源于：毕业设计论文模板www.udooo.com
药施行相关管理标准，由此形成了我国农药残留管理标准体系。对农残最高限量的监控，相应的检验方法有三条思路：一是制定单一组分的配套检验方法，二是研究适于现场分析的快速检验方法，三是研究多组分系统分析方法。
目前我国有机磷农药残留的分析方法有气相色谱法、薄层色谱法以及快速测定方法——酶抑制法。
本研究依据酶抑制原理，以乙酰胆碱酯酶为检测用酶，建立快速测定有机磷农药残留的电位法， 与国家规定的最大残留限量（MRL） 比较，检验该法对农药的最低检测限（LDC）是否可以达到MRL限值要求，对该方法检测农残的灵敏度作评价，同时与常规的分光光度法的灵敏度相比较，以研究电位法是否可以作为新型的快速现场检测方法。
三、实验操作与数据
1、 实验原理
本研究以蝇头中活性较高的乙酰胆碱酯酶为检测用酶，乙酰胆碱为底物；有机磷农药会抑制乙酰胆碱酯酶活性[3-4]，依据酶抑制原理，当乙酰胆碱酯酶活性受到抑制时，与底物乙酰胆碱作用生成的乙酸量相应减少，酶被抑制程度与反应体系的产酸减少量呈线性相关；使用雷磁PHS-3C精密pH计，检测反应前后pH值变化，应用正交函数原理及SPSS软件处理数据，测定蔬菜中有机磷农药最低残留限量并获取其线性方程及灵敏度，以电位法来建立快速检测有机磷农药残留的方法。2 、 实验样品
叶菜类：生菜、小白菜非叶菜类：生姜、大蒜
3、 仪器与设备
5 、 试验方法 （电位法）
本实验共分为两个部分：第一，采用电位法快速测定有机磷农药残留， 与国家规定的最大残留限量（MRL）比较，检测和评价该方法对于农残检测的最低检测限（LDC）及灵敏度。
第
二、检测蔬菜样液对酶的抑制率，与常规的分光光度法比较灵敏度。
5.1 确定最佳试验条件
检测设室温对最佳因素条件影响不显著，按梯度进行单因素实验，并使用正交实验确定本方法最佳的测定条件为酶量为0.10ml，室温反应时间为10min，农药用量6ml，55℃水浴反应35min、灭活时间为3min。试验证明，室温对试验的结果有影响但不显著，检测设成立。
5.2 确定不同农药的酶抑制灵敏度
使用SPSS 13.0 for windows软件进行数据处理，做曲线拟合及回归分析，以抑制率对农药浓度的负对数作工作曲线，如图1：同样方法，分别计算出氧化乐果、乐果、敌敌畏的抑制率，见表3；使用SPSS 13.0 for windows软件进行曲线拟合及回归分析，以抑制率对农药浓度的负对数做工作曲线，得出线性方程、灵敏度和相关系数，如表4所示：
注：y为抑制率；x为农药浓度的负对数
对于同一种乙酰胆碱酯酶，当农药溶液浓度达到抑制酶活的程度时，其抑制率将≥50%。由表4可知，所测农药浓度与对酶抑制率的相关系数都在0.91以上，相关性较好，电位法满足对有机磷农药残留快速检测的要求。
由表4可知，电位法可检测的氧化乐果、乐果、敌敌畏最低检测限（LDC）分别为：5.56×e– 6 mg/kg、8.04×e– 4mg/kg、3.997×e– 4 mg/kg。而国家规定的最大残留限量（MRL）为：氧化乐果≤0.20mg/kg、乐果≤1.00mg/kg、敌敌畏≤0.20mg/kg[9]。电位法所能检测的农药的最低检测限（LDC）达到国家规定的最大残留限量（MRL），用电位法快速测定农药残留的方法可行。
5.3 确定本方法适用的蔬菜种类
将两种叶菜类和两种非叶菜类蔬菜，剪成1cm左右见方的碎块，在最佳试验条件下，加入0.5μg/ml的农药溶液分别处理，结果如表5所示：当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中含有有机磷农药存在。实际试验中，加入同剂量同浓度的农药溶液，在叶菜类中三种农药都可检出，证明电位法作为快速测定叶菜类中农药残留的方法可行。
5.4 分光光度法对比
有机磷农药对412nm波长的紫外可见光的吸光度随时间的变化值可反映待测样品对乙酰胆碱酯酶活性抑制的程度，按照紫外分光光度计原理，可计算出抑制率，通过该抑制率可以判断出样品中是否含有有机磷农药，两种测定方法每组实验均为两次平行操作，结果取平均值。分光光度法检测出的抑制率≥50%，证明有农药残留存在并可检出。当氧乐果、乐果、敌敌畏浓度为0.5μg/ml时，使用常用的分光光度法测定其农残，抑制率均≥50%；在电位法的快速测定中，测得的三种农药残留抑制率均≥50%。两组实验对比说明，在同一个水平上，电位法和分光光度法快速检测同样可行。
受条件限制，本实验测试农药种类不够广泛，就检测的三种农药而言，在同一农药残留浓度上两种方法灵敏度不相上下，至于其它种类的农药，则需要进一步的相关研究。
六、结论
本次研究表明，电位法在最佳反应条件下测定农药残留的方法可行性和灵敏度都较好，在这三种农药中，其LDC都远低于国家规定的最大残留限量（MRL），完全可以满足实际检测的需要。
本研究进一步发现，电位法可检测含农残的叶菜类蔬菜包括：生菜、小白菜、麦菜、油菜、包菜、芥菜等，而对非叶菜类蔬菜中的农残检出力低。该现象的原因可能是非叶菜类蔬菜中含有破坏乙酰胆碱酯酶活性的物质，如大蒜中的含硫化合物，白萝卜中的硫氰酸盐，胡萝卜中的β-胡萝卜素等。
本实验作为方法学的探讨，证实了利用乙酰胆碱酯酶抑制法快速检测农药残留技术在时间、成本、速度等方面都比传统仪器分析方法有明显优势的电位法作为叶菜类蔬菜中农残的快速检测方法的可行性，将促使其在农药残留快速检测领域中得到进一步的应用和推广。
参考文献：
中国标准出版社.农药残留国家标准汇编[M].北京：中国标准出版社，2000.62.
纪淑娟，赵丽丽，冯辉.一种快速检测农产品有机磷农药残留的方法[J].农药，2000，39（10）：17～18.
[3] 王亮，潘瑷，徐婉莉，等.食品农药残留快速检测技术研究进展[J].食品科技.2005（10）：74～76.
[4] 汪世新.蔬菜农药残留速测方法中若干问题的操作[J].农业环境与发展，2002.19（2）：43.