摘要:目的:测定了小鼠超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、总一氧化氮合酶(T-NOS)活性及丙二醛(MDA)含量,探讨柠檬酸对小鼠睾丸组织细胞抗氧化酶活性的影响,评估睾丸细胞膜的脂质过氧化程度和细胞生物膜的通透性,探讨柠檬酸的抗氧化应激作用机制。策略:将40只健康昆明系小白鼠随机分为对照组(生理盐水)、柠檬酸低(180mg/kg)、中(270mg/kg)、高(360mg/kg)剂量组,各组小鼠每周腹腔注射0.2mL相应剂量试剂,连续注射3周,第3次注射后的第7d时颈椎脱臼处死小鼠,取其睾丸组织制作匀浆液,利用相应的试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、总一氧化氮合酶(T-NOS)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:(1)SOD活性:随着柠檬酸浓度的升高,小鼠睾丸组织SOD活性呈下降走势。与对照组相比,柠檬酸中、高剂量组小鼠睾丸组织的SOD活性显著降低(P﹤0.05);且柠檬酸低与高剂量组间呈现显著差别(P﹤0.05)。(2)GSH-Px活性:柠檬酸低、中、高剂量组小鼠睾丸组织的GSH-PX活性均显著低于对照组(P﹤0.05),柠檬酸各处理组间GSH-PX活性无统计学上的差别(P﹥0.05)。(3)T-NOS活性:与对照组相比,不同浓度柠檬酸处理后,小鼠睾丸组织T-NOS活性均无显著变化(P>0.05),但随着柠檬酸浓度的升高,T-NOS活性呈现上升走势,与对照组相比分别增加2.1%、5.5%和18.3%。(4)MDA含量:与对照组相比,柠檬酸各处理组小鼠睾丸组织MDA含量均显著降低(P﹤0.05);随着柠檬酸浓度的升高,MDA含量呈下降走势,柠檬酸高剂量组MDA含量显著低于柠檬酸低、中剂量组(P﹤0.05)。(5)LDH活性:与对照组相比,不同浓度柠檬酸处理后,小鼠睾丸组织LDH活性均无显著变化(P>0.05),但随着柠檬酸浓度的升高,LDH活性呈现下降走势,分别比对照组降低8%、8.6%和10.4%。结论:一定剂量的柠檬酸可以降低小鼠睾丸组织SOD、GSH-Px活性,但可能是在氧自由基的清除的历程中消耗了了大量SOD、GSH-Px,以而导致睾丸组织SOD、GSH-Px活性出现显著降低产生的抗氧化作用机制,或者是经NO途径减少睾丸细胞膜脂质过氧化,进而提升了细胞膜脂类物质的稳定性。但探讨同时显示,随柠檬酸浓度的升高,小鼠睾丸组织LDH活性呈现下降走势,睾丸细胞膜的通透性可能会增加,使细胞膜的稳定性受到一定影响。关键词:柠檬酸论文小鼠论文睾丸论文超氧化物歧化酶论文谷胱甘肽过氧化物酶论文总一氧化氮合酶论文
摘要2-4
ABSTRACT4-8
第1章 文献综述8-17
1.1 柠檬酸的生物学作用8-10
1.1.1 柠檬酸与三羧酸循环8-9
1.1.2 柠檬酸在畜牧业生产中的运用9-10
1.2 机体组织细胞的氧化损伤与抗氧化机制10-14
1.2.1 自由基与机体组织细胞的氧化损伤10-11
1.2.2 抗氧化酶与组织细胞自由基的清除11-13
1.2.3 组织细胞氧化损伤的检测13-14
1.3 柠檬酸对机体酶活性及组织损伤的影响14-16
1.4 本实验的目的作用16-17
第2章 材料与策略17-26
2.1 试验材料17
2.1.1 试验动物17
2.1.2 试验主要试剂及仪器17
2.2 试验策略17-25
2.2.1 小鼠的饲养、分组及处理17-18
2.2.2 小鼠睾丸组织的采集和匀浆组织的制备18
2.2.3 组织蛋白含量的测定18-19
2.2.4 SOD 测试盒试剂的组成、配制与保存19
2.2.5 SOD 活力测定19-20
2.2.6 GSH-PX测试盒试剂的组成、配制与保存20
2.2.7 GSH-PX活力测定20-21
2.2.8 T-NOS 测试盒试剂的组成、配制与保存21-22
2.2.9 T-NOS 活力测定22-23
2.2.10 MDA 测试盒试剂的组成、配制与保存23
2.2.11 MDA 含量测定23-24
2.2.12 LDH 测试盒试剂的组成、配制与保存24
2.2.13 LDH 活力测定24-25
2.3 数据处理25-26
第3章 试验结果26-29
3.1 超氧化物歧化酶(SOD)活力测定结果26
3.2 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力测定结果26-27
3.3 柠檬酸对小鼠睾丸组织 T-NOS 活性的影响27
3.4 柠檬酸对小鼠睾丸组织 MDA 含量的影响27
3.5 柠檬酸对小鼠睾丸组织 LDH 活性的影响27-29
第4章 浅析与讨论29-33
4.1 柠檬酸对小鼠睾丸组织 SOD、GSH-Px 活性的影响29-30
4.2 柠檬酸对小鼠睾丸组织 MDA 含量的影响30-31
4.3 柠檬酸对小鼠睾丸组织 NOS 活性的影响31-32
4.4 柠檬酸对小鼠睾丸组织 LDH 活性的影响32-33
第5章 结论33-34