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摘要：本探讨的目的是拟以四川宝兴地区虎耳草中提取分离活性成分,并以DU145雄激素非依赖性人前列腺癌细胞为对象进行了初步抗癌活性探讨。试验策略及结果如下：1虎耳草有效成分的提取分离：策略：对新鲜虎耳草干品水煎醇沉,后经乙酸乙酯萃取得萃取物；运用硅胶吸附柱层析对乙酸乙酯萃取物进行分离纯化。筛选最佳的柱层析条件,上柱分离,收集各段馏分,并对各段馏分作中药化学成分的定性鉴定。结果：经薄层层析选定最佳流动相条件为乙酸乙酯：正己烷：甲醇(5.5：3.5：1)；经柱层析分离得到八个段,分别标记为F1、F2、F3、F4、F5、F6、F7、F8；各段主要成分集中在黄酮类及酚类物质。2MTT实验：策略：采取MTT比色法测定虎耳草硅胶柱层析所得各段馏分对DU145细胞的增殖抑制作用。1、采取MTT法测定二亚砜对DU145细胞的最高无毒浓度；2、各段馏分均以320mg/L、160mg/L,80mg/L,40mg/L,20mg/L的浓度给药,并且作用时间分别设定为24h、36h、48h三个时间段。结果：1、DMSO对细胞的最高无毒浓度为0.5%；2、除F1、F8作用效果不显著外,其余各段馏分均有不同程度抑制细胞增殖的作用,其中F3、F6、F7三段的量效联系以及时效联系最为显著,其IC50分别为55.63mg/L、50.02mg/L、102.2mg/L。3细胞凋亡检测：策略：选择F7段作为探讨对象,分别测定其在160mg/L,80mg/L,40mg/L三个浓度下,作用24h、36h、48h后,对于DU145凋亡的影响。结果：F7段具有推动癌细胞凋亡的作用,并且呈现正相关的量效联系和时效联系。由以上结果可知,虎耳草经硅胶柱层析分离各段活性部位具有体外抑制DU145细胞增殖,推动其凋亡的作用,可作为抗前列腺癌的活性物质库。关键词：虎耳草论文提取分离论文增殖抑制论文凋亡论文
中文摘要4-5
Abstract5-7
论文缩略词表7-10
第一章 文献综述及探讨的目的作用10-25
1 前列腺癌的探讨概况10-20
1.1 前列腺的解剖生理特点、功能及其细胞增加特点10-12
1.2 前列腺癌概述及分类12-14
1.3 前列腺癌的病因探讨进展14-18
1.4 前列腺癌的药物治疗进展18-20
2 虎耳草探讨概况20-24
2.1 虎耳草介绍20
2.2 虎耳草的化学成分20-21
2.3 虎耳草的药理学探讨21-23
2.4 虎耳草的临床运用23-24
3 选题背景及目的作用24-25
第二章 虎耳草化学成分的提取分离25-30
1 材料与策略25-27
1.1 实验材料25
1.2 实验策略25-27
2 实验结果27-28
3 讨论28-30
第三章 虎耳草提取物对DU 145细胞体外生长抑制作用的实验探讨30-44
1 材料与策略30-34
1.1 实验材料30-31
1.2 实验策略31-34
1.3 数据统计34
2 实验结果34-42
2.1 细胞形态34-36
2.2 DMSO含量对DU145的细胞毒性36-37
2.3 虎耳草不同有效部位对DU145细胞的增殖抑制作用37-42
3 讨论42-44
第四章 虎耳草活性部位诱导DU 145细胞凋亡的实验探讨44-49
1 实验材料与策略44-45
1.1 试验材料44
1.2 实验策略44
1.3 数据统计44-45
2 实验结果45-47
3 讨论47-49