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阿霉素纳米药物运输与其生物效应

收藏本文 2024-01-19 点赞:3567 浏览:8310 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:目前癌症治疗策略中化疗是最有效也是运用最广泛的办法之一。现在临床上所用的抗癌药物多为小分子量的化合物,在血液中半衰期短,清除速度快,给药后仅有很少一部分药物会被运输到肿瘤组织与肿瘤细胞发生作用,由此疗效差,并且毒副作用很强。由于纳米具有低毒、生物兼容性等优点,已广泛用作蛋白、DNA和药物运输的载体。本工作通过多种策略优化合成纳米-阿霉素(ND-DOX)复合物的条件,制备出载药量最多的符合药物,并以肝癌(HepG2)细胞为模型,运用MTT比色法、激光扫描共聚焦显微镜及细胞流式仪技术获得其能跨膜进入细胞,且仍保持较好的药物活性,能有效杀死细胞,且与单独阿霉素相比该载药系统具有缓释作用。基于较好的体外探讨数据,我们对ND-DOX能否作为潜在的抗肿瘤药物在复杂的体内运用进行了动物实验,发现一个有趣的现象,ND-DOX可以将荷瘤小鼠的存活概率延长75%左右,ND可以将小鼠存活期延长41%,而DOX仅可延长19%。组织病理学浅析表明,纳米金刚石的处理对小鼠的肾,肝,脾组织上没有显著的副作用,而阿霉素对肾脏和肝脏的毒性作用很显著。实验结果表明,ND是生物相容的,且ND-DOX优先在肿瘤中累积,可有效地抑制肿瘤的生长。由此,腹壁注入ND可以作为延长荷瘤小鼠的存活寿命的一个潜在的材料,ND-DOX可以作为一种很有前途的,增强疗效和安全性的纳米药物。同时本论文也以化疗药物阿霉素为模型,转铁蛋白(Tf)通过物理吸附阿霉素后,用游离阿霉素做比较,运用MTT比色法、激光扫描共聚焦显微镜及细胞流式仪技术获得其能通过网格蛋白介导进入细胞,具有能量依赖性,而游离阿霉素是被动扩散进入细胞的。并且Tf-DOX复合物相对单独阿霉素对肿瘤细胞具有较强的杀伤力,可以靶向作用肿瘤细胞。关键词:纳米论文阿霉素论文缓释能力论文延长寿命论文转铁蛋白论文肿瘤靶向治疗论文

    中文摘要5-6

    ABSTRACT6-11

    第一章 综述11-26

    1.1 肿瘤治疗近况11-14

    1.1.1 关于肿瘤11-13

    1.1.2 肿瘤治疗13-14

    1.2 纳米载体与纳米14-20

    1.2.1 纳米材料14-15

    1.2.2 纳米的合成15-17

    1.2.3 纳米的光学性质17

    1.2.4 荧光纳米的制备17-18

    1.2.5 纳米的表面功能化18-19

    1.2.6 纳米在生物医药上的运用19-20

    1.3 转铁蛋白-转铁蛋白受体转运途径对药物的靶向性运输20-24

    1.3.1 被动运输与主动运输20-22

    1.3.2 转铁蛋白22

    1.3.3 转铁蛋白受体介导的铁的吸收转运机制22-23

    1.3.4 转铁蛋白受体介导的内吞途径对药物的靶向性运输23-24

    1.4 本论文的探讨工作及其革新之处24-26

    第二章 纳米-阿霉素复合物(ND-DOX)与 HepG2 细胞相互作用的探讨26-52

    2.1 材料与仪器27-28

    2.2 实验策略28-32

    2.2.1 溶液的配制28-29

    2.2.2 DOX 紫外可见吸收光谱和荧光光谱的测定29

    2.2.3 粒径与表面电位测定29

    2.2.4 时间、盐效应和 pH 效应对 ND 吸附 DOX 的影响29-30

    2.2.5 DOX 及 ND-DOX 的体外释药实验30-31

    2.2.6 细胞培养31

    2.2.7 不同浓度 DOX 及 ND-DOX 与 HepG2 细胞作用不同时间细胞毒性测定31

    2.2.8 DOX 及 FND-DOX 进入 HepG2 细胞转运机理的探讨31-32

    2.2.9 FND-DOX 的细胞摄取及进入 HepG2 细胞的动力学探讨32

    2.2.10 小鼠的培养32

    2.2.11 ND-DOX 抑制肿瘤的生长并延长小鼠的寿命32

    2.2.12 FND 及 FND-DOX 在小鼠各组织的定位32

    2.3 结果与讨论32-50

    2.3.1 DOX 的紫外可见吸收光谱和荧光光谱32-33

    2.3.2 时间、盐效应和 pH 效应对 ND 吸附 DOX 的影响33-36

    2.3.3 体外释药实验36-37

    2.3.4 DOX 及 ND-DOX 对 HepG2 细胞的细胞毒性37

    2.3.5 DOX 及 FND-DOX 进入 HepG2 细胞转运机理的探讨37-40

    2.3.6 ND-DOX 的细胞摄取及 ND-DOX 进入细胞的动力学探讨40-42

    2.3.7 ND-DOX 抑制肿瘤的生长并延长小鼠的寿命42-44

    2.3.8 FND 及 FND-DOX 在小鼠各组织的定位44-50

    2.4 本章小结50-52

    第三章 转铁蛋白-阿霉素复合物(Tf-DOX)与细胞相互作用的探讨52-62

    3.1 材料与仪器52-53

    3.2 实验策略53-55

    3.2.1 溶液的配制53

    3.2.2 细胞培养53

    3.2.3 Tf 紫外可见吸收光谱和荧光光谱的测定荧光光谱测定53-54

    3.2.4 DOX 对 Tf 的荧光猝灭及荧光机理的探讨54

    3.2.5 Tf-DOX 的细胞活性测定54

    3.2.6 Tf-DOX 与 DOX 在细胞内分布及差别探讨54

    3.2.7 Tf-DOX 的细胞转运机理探讨54-55

    3.2.8 Tf-DOX 作用于 HepG2 细胞靶向性探讨55

    3.3 结果与讨论55-61

    3.3.1 DOX 及 Tf 的紫外可见吸收光谱和荧光光谱55

    3.3.2 DOX 对 Tf 的荧光猝灭机理55-57

    3.3.3 细胞活性检测57-58

    3.3.4 Tf-DOX 与 DOX 在细胞内的分布及差别58-60

    3.3.5 Tf-DOX 进入细胞具靶向性60-61

    3.4 本章小结61-62

    第四章 总结与展望62-64

    4.1 总结62

    4.2 展望62-64

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