摘要：纺织和印染工业的染料废水具有色度高、含有毒物质、较难被生物降解等特点。这些废水严重地破坏了水生态系统，对环境安全构成了巨大的威胁。现有的物理化学策略如吸附法、沉降法、化学氧化法和光降解法等具有处理时间长、经济成本高以及处理效率低等特点，而生物酶法（尤其是真菌漆酶）催化染料脱色具有条件温和、可脱色染料类型广泛、脱色效率较高、经济性好等优势，酶法染料脱色因而受到越来越多探讨者关注。论文以筛选产漆酶的真菌菌株出发，探讨了一株新型毛栓菌发酵产漆酶的培养条件、漆酶的性质以及漆酶在染料脱色方面的运用，主要探讨结果如下：（1）以自然界筛选得到了一株产漆酶的真菌，经形态学和分子生物学手段鉴定其为毛栓菌（Trametes trogii），命名为Trametes trogii SYBC-LZ。（2）考察了固态发酵、液态静置发酵和液态摇瓶发酵三种培养方式对菌株T. trogiiSYBC-LZ发酵产漆酶的影响，结果表明固态发酵的培养方式更有利于菌株产漆酶。通过单因素实验确立了固态发酵产漆酶的优化培养基为2.8g木屑，4.2g豆饼粉和13mL营养液，其中营养液组分为（g/L）：蔗糖20、硝酸钾25、磷酸二氢钾5、七水合硫酸镁3、五水合硫酸铜0.25和无水氯化钙0.3。在优化后的培养条件下，菌株发酵漆酶活力在第6d即可达到268U/g干基，相比初始培养条件下菌株发酵的漆酶活力（169U/g干基）提升了58.6%，发酵时间较之前（8d）缩短了2d。（3）经硫酸铵沉淀、离子交换层析和分子筛层析三个步骤，以T. trogii SYBC-LZ的发酵粗酶液中分离得到电泳纯的漆酶，命名为LAC Z。对LAC Z的酶学性质进行了探讨，发现LAC Z为典型的蓝色真菌漆酶，分子量约为65KDa，等电点为3.2，LAC Z的N-末端氨基酸序列表明其为一种新型的毛栓菌漆酶。（4）将T. trogii SYBC-LZ的发酵粗漆酶运用于染料脱色，发现其对RBBR、RB4、AB129、AR1和RB5这五种染料溶液的脱色效果显著，添加1U活力的漆酶粗酶液反应30min后脱色率可分别达到85.2%、69.6%、45.6%、90.2%和65.4%。考察了漆酶粗酶液脱色法、纯化漆酶脱色法和全细胞培养脱色法对染料溶液的脱色，结果表明在脱色反应的实用性及经济性方面，漆酶粗酶液脱色法更具优势。此外，实验中发现在没有添加外源的小分子介体时，混合染料溶液中的蒽醌类染料能够扮演小分子介体的作用，协助漆酶催化非底物类型的偶氮染料的脱色，显著提升偶氮染料的脱色率。关键词：漆酶论文固态发酵论文纯化论文染料脱色论文毛栓菌论文
摘要3-4
Abstract4-7
第一章 绪论7-17
1.1 染料7-11
1.1.1 染料的介绍7-8
1.1.2 染料废水的特点8-9
1.1.3 染料废水的处理策略9-11
1.2 白腐真菌及漆酶11-15
1.2.1 漆酶介绍12-13
1.2.2 漆酶-介系统统13-14
1.2.3 漆酶对合成染料的脱色14-15
1.3 论文的立题依据15
1.4 论文的探讨内容15-17
第二章 材料与策略17-25
2.1 菌种来源17
2.2 主要仪器17
2.3 化学试剂与原材料17
2.4 培养基17-18
2.5 培养策略18
2.6 菌株的鉴定18-19
2.7 浅析策略19
2.8 漆酶的分离纯化19-20
2.9 电泳20
2.10 漆酶的酶学性质20-21
2.11 漆酶对合成染料的脱色探讨21-23
2.12 染料及其降解产物对小麦种子发芽的影响23
2.13 数据浅析23-25
第三章 结果与讨论25-55
3.1 菌株的筛选及鉴定25-29
3.1.1 初步分离和筛选25-26
3.1.2 菌株 SYBC-LZ 的形态学特点26-27
3.1.3 菌株 SYBC-LZ 的 rRNA 基因 ITS 区的序列测定及浅析27-28
3.1.4 讨论28-29
3.2 毛栓菌发酵产漆酶29-37
3.2.1 在三种培养系统中毛栓菌发酵产漆酶情况29-31
3.2.2 毛栓菌固态发酵产漆酶的条件优化31-37
3.3 毛栓菌漆酶的分离和纯化及其酶学性质探讨37-45
3.3.1 毛栓菌漆酶的分离和纯化38-40
3.3.2 LAC Z 的酶学性质40-45
3.4 LAC Z 在合成染料脱色中的运用45-55
3.4.1 漆酶粗酶液对单一合成染料溶液的脱色45-47
3.4.2 反应系统各参数对脱色的影响47-50
3.4.3 粗酶液对染料脱色的优势50-51
3.4.4 LAC Z 对混合染料溶液的脱色51-52
3.4.5 讨论52-55
第四章 结论与展望55-57
4.1 主要结论55
4.2 展望55-57
致谢57-59
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