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活性粒毛盘菌YM346黑色素结构、氨基酸修饰与生物活性网

收藏本文 2024-02-19 点赞:10583 浏览:37525 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:本论文对粒毛盘菌YM-346黑色素的发酵条件、提取条件、结构、精氨酸修饰、抑菌活性及抗氧化活性行了探讨,主要结果如下:1.粒毛盘菌YM-346胞外黑色素的最佳发酵条件为Ⅴ#培养基(20%马铃薯汁,葡萄糖20g·L~(-1),蛋白胨5.0g·L~(-1))、酪氨酸19.06mg·L~(-1)、MgCl_21.73mmol·L~(-1)、pH7.54。粒毛盘菌YM-346胞外黑色素的产量比优化前提升了38.6%。2.在单因素实验基础上,采取Box-Behnken试验设计得出粒毛盘菌YM-346黑色素的最佳提取条件为NaOH浓度1.00mol·L~(-1)、超声时间58min、超声温度65℃。在此条件下,黑色素的的得率为13.66%,比碱提酸沉法提升了3.19%。3.粒毛盘菌YM-346胞外黑色素(LEM346)的扫描电子显微镜图显示其呈块状、表面不规则状的晶体结构,紫外可见吸收光谱显示其在211nm处有最大吸收峰,红外光谱显示其有着吲哚O-H伸缩振动(3218.802cm~(-1))和醌式C=O伸缩振动(1614.815cm~(-1))等吸收峰,核磁共振氢谱显示其含有吲哚CH信号峰(7.0-7.5ppm)和吲哚NH信号峰(2.5-5.0ppm),热解/GC/MS浅析其降解产物中含有大量的吡咯、苯及其衍生物,结合元素浅析、质谱浅析结果表明LEM346分子含有吲哚醌结构,是吲哚型真黑色素,其分子式为C_(18)H_8O_6N_2,推测分子结构式为4. LEM346对金葡萄球菌与李斯特菌的抑制活性相近,但显著高于对伤寒沙门菌和大肠杆菌的抑制活性。LEM346的抑菌活性基本不受温度、紫外光照的影响。5.采取7种氨基酸对非水溶性LEM346进行修饰,发现精氨酸-黑色素(ALEM346)溶解度最高,在30℃蒸馏水中的溶解度为4.55g/100g。ALEM346的红外光谱在1672.346cm~(-1)和1637.679cm~(-1)处具有黑色素羰基与精氨酸氨基结合的特点吸收峰,且含有精氨酸胍基的特点吸收峰;质谱也显示LEM346与精氨酸结合生成混合物ALEM346。ALEM346浓度为500mg·L~(-1)时,总抗氧化能力相当于46.65mmol·L~(-1)α-生育酚,对·OH、DPPH·、O_2~ˉ·的清除率及对Fe2+的螯合率分别为74.67%、89.05%、93.81%、80.18%,表明ALEM346的抗氧化活性显著高于相同浓度LEM346的抗氧化活性。关键词:粒毛盘菌论文黑色素论文提取论文结构论文修饰论文抗氧化活性论文抑菌活性论文

    摘要5-6

    ABSTRACT6-8

    致谢8-14

    第一章 绪论14-20

    1.1 黑色素综述14-18

    1.1.1 黑色素资源14

    1.1.2 黑色素分类14

    1.1.3 黑色素的理化性质14

    1.1.4 黑色素的活性及功能14-15

    1.1.5 黑色素的合成途径15-16

    1.1.6 黑色素的分离纯化16-17

    1.1.7 黑色素的结构17-18

    1.2 粒毛盘菌及其黑色素探讨概况18-19

    1.3 本探讨目的及内容19-20

    1.3.1 探讨目的19

    1.3.2 探讨内容19-20

    第二章 粒毛盘菌 YM-346 生长及产胞外黑色素条件优化20-29

    2.1 材料20-21

    2.1.1 菌株20

    2.1.2 培养基20

    2.1.3 实验仪器20

    2.1.4 试剂及药品20-21

    2.2 实验策略21-22

    2.2.1 测定指标21

    2.2.2 单因素实验21-22

    2.2.3 Central composite 试验22

    2.3 结果与浅析22-27

    2.3.1 单因素优化22-26

    2.3.2 Central composite 试验26-27

    2.4 结论27-29

    第三章 粒毛盘菌 YM-346 胞内黑色素的提取29-36

    3.1 材料29

    3.1.1 菌株29

    3.1.2 实验仪器29

    3.1.3 试剂及药品29

    3.2 实验策略29-30

    3.2.1 测定指标29

    3.2.2 单因素实验29-30

    3.2.3 Box-Behnken 试验30

    3.3 结果与浅析30-34

    3.3.1 单因素实验结果30-32

    3.3.2 Box-Behnken 试验结果32-34

    3.4 结论34-36

    第四章 粒毛盘菌 YM-346 胞外黑色素的结构及抑菌活性36-46

    4.1 材料36-37

    4.1.1 菌株36

    4.1.2 实验仪器36-37

    4.1.3 试剂与药品37

    4.2 实验策略37-39

    4.2.1 发酵37

    4.2.2 黑色素的提取纯化37-38

    4.2.3 LEM346 的结构浅析38

    4.2.4 LEM346 的抑菌活性38-39

    4.3 结果与浅析39-45

    4.3.1 LEM346 的制备39

    4.3.2 LEM346 的结构39-43

    4.3.3 LEM346 的抑菌活性43-45

    4.4 结论45-46

    第五章 精氨酸-黑色素的抗氧化活性及结构46-57

    5.1 材料46-47

    5.1.1 黑色素46

    5.1.2 实验仪器46

    5.1.3 试剂及药品46-47

    5.2 实验策略47-49

    5.2.1 LEM346 的溶解性47

    5.2.2 LEM346 的氨基酸修饰47-48

    5.2.3 精氨酸-黑色素(ALEM346)水溶解度的测定48

    5.2.4 色价的测定48

    5.2.5 ALEM346 的结构浅析48

    5.2.6 抗氧化活性48-49

    5.3 结果与浅析49-56

    5.3.1 LEM346 的溶解性49

    5.3.2 LEM346 的氨基酸修饰49-50

    5.3.3 ALEM346 的水溶解度及色价50

    5.3.4 ALEM346 的结构浅析50-52

    5.3.5 抗氧化活性52-56

    5.4 结论56-57

    第六章 结论与展望57-59

    6.1 结论57

    6.2 革新点57

    6.3 展望57-59

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