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皂素油茶饼中茶皂素与蛋白质提取分离

收藏本文 2024-01-23 点赞:29217 浏览:133568 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:本课题以油茶饼粕为原料,主要探讨了油茶饼中茶皂素的提取、分离、纯化的最佳工艺及测定茶皂素的策略,并对油茶饼中蛋白质的提取及功能特性进行了探讨,为茶皂素的工业生产提供了论述基础,并对提升油茶饼的综合资源利用具有重要作用。1.油茶饼粕中主要营养成分:总糖35.19%、脂肪6.19%、蛋白质8.12%、粗纤维18.67%、茶皂素12.11%。2.通过薄层层析(TLC)对油茶饼提取物进行定性试验,发现提取物中在于茶皂素对照品同样Rf值的位置出现了相同的斑点,Rf值为0.37,说明油茶饼粕中含有茶皂素。3.采取甲醇为提取剂,通过超声波辅助法提取油茶饼粕中的茶皂素。以茶皂素的提取效率为考察指标进行二次通用旋转组合试验。探讨表明:提取时间对茶皂素提取效率影响最大,其次是料液比,提取温度对茶皂素提取效率影响最小,最佳提取工艺为料液比1:9、超声温度50℃、超声提取时间57min为超声波辅助提取茶皂素的最佳工艺条件,此条件下茶皂素提取效率可达到80.89%。4.建立高效毛细管电泳法,检测茶皂素的条件为:BECKMAN高效毛细管电泳仪,PDA检测器。未涂层熔融石英毛细管柱(i.d.50um×60cm,有效长度50cm)。运转缓冲液为30mM硼酸硼砂溶液,pH=8.0,进样时间5s,毛细管柱温为25℃,分离电泳电压为20KV,检测波长为210nm。并与香草醛浓硫酸分光光度法进行比较,结果表明高效毛细管电泳法不易受其他杂质影响,精确度较高。6.分别用大孔树脂和聚酰胺树脂对茶皂素进行分离纯化,并考察这两种策略的洗脱剂浓度,分别用70%和50%乙醇进行洗脱,两种分离纯化策略所得目的物纯度为:83.23%、80.17%。7.采取碱提酸沉法提取油茶饼粕中的蛋白质,以蛋白质的提取率为考察指标进行正交试验。最佳提取工艺为:提取温度为45℃、pH值为11.5、料液比1:45的条件下提取90min。在此条件下得到蛋白提取率为44.19%。8.对油茶蛋白质进行功能特性测定。结果可知:吸油性为4.0ml/g、乳化性36%、乳化稳定性为55%、起泡性60%。关键词:油茶饼论文茶皂素论文蛋白质论文提取论文毛细管电泳论文

    摘要4-5

    Abstract5-10

    1 文献综述10-18

    1.1 茶皂素探讨进展10-18

    1.1.1 油茶及茶粕介绍10

    1.1.2 茶皂素的概况10

    1.1.3 茶皂素的结构和理化性质10-11

    1.1.4 茶皂素的分离提取及检测策略的探讨进展11-15

    1.1.4.1 茶皂素的提取策略探讨进展11-12

    1.1.4.2 茶皂素的纯化策略探讨进展12-14

    1.1.4.3 茶皂素的检测浅析策略14-15

    1.1.5 茶饼粕的运用15-18

    1.1.5.1 茶皂素的运用15-17

    1.1.5.2 油茶饼蛋白的利用17-18

    2 引言18-19

    3 材料与策略19-28

    3.1 原料及预处理19

    3.1.1 原料19

    3.1.2 原料预处理19

    3.2 仪器与药品试剂19-20

    3.2.1 试验仪器19-20

    3.2.2 试验药品试剂20

    3.3 技术路线20-21

    3.3.1 浅析原料中的营养成分变化技术路线20-21

    3.3.2 茶皂素提取纯化技术路线21

    3.3.3 茶饼蛋白的提取技术路线21

    3.4 探讨策略21-28

    3.4.1 原料含水率及主要营养成分含量的测定21

    3.4.2 油茶皂素的定性及定量检测21-23

    3.4.2.1 油茶皂素样液的制备21

    3.4.2.2 油茶皂素的 TLC 定性浅析21-22

    3.4.2.3 分光光度法测油茶皂素含量22

    3.4.2.4 高效毛细管电泳法(HPCE)测定茶皂素含量22-23

    3.4.2.5 高效毛细管电泳法(HPCE)测茶皂素含量与分光光度法的比较23

    3.4.3 油茶饼中茶皂素的提取和纯化策略23-25

    3.4.3.1 溶剂的选择23

    3.4.3.2 单因素实验23

    3.4.3.3 二次通用旋转组合试验优化茶皂素提取工艺23

    3.4.3.4 茶皂素的分离纯化策略及工艺优化23-25

    3.4.4 油茶饼粕中蛋白质的提取及部分功能特性探讨25-28

    3.4.4.1油茶饼粕蛋白质等电点的测定25

    3.4.4.2 单因素实验25-26

    3.4.4.3 蛋白质的提取工艺优化26

    3.4.4.4 油茶饼中蛋白质的部分功能特性探讨26-28

    4 结果与浅析28-47

    4.1 主要营养成分含量测定结果28

    4.2 茶皂素的定性及定量检测28-33

    4.2.1 茶皂素的定性检测28-29

    4.2.2 分光光度法测茶皂素含量29

    4.2.3 HPCE 检测策略的建立29-33

    4.2.3.1 检测波长的确定29

    4.2.3.2 缓冲液 pH 值得选择29-30

    4.2.3.3 缓冲液浓度的选择30

    4.2.3.4 HPCE 策略的建立30-31

    4.2.3.5 策略学考察31-33

    4.3 油茶饼中茶皂素的提取分离结果与浅析33-42

    4.3.1 提取溶剂的选择33

    4.3.2 超声波辅助提取的单因素试验33-34

    4.3.2.1 料液比对茶皂素提取效率的影响33

    4.3.2.2 提取时间对茶皂素提取效率的影响33-34

    4.3.2.3 提取温度对茶皂素提取效率的影响34

    4.3.3 茶皂素提取的二次通用旋转组合试验34-39

    4.3.3.1 单因素浅析36-37

    4.3.3.2 交互作用效应浅析37-38

    4.3.3.3 提取工艺的优化38-39

    4.3.4 大孔树脂分离纯化法39-40

    4.3.4.1 大孔树脂的筛选39

    4.3.4.2 洗脱剂浓度的选择39-40

    4.3.5 聚酰胺树脂分离法40-41

    4.3.5.1 聚酰胺树脂静态吸附及剖析率40

    4.3.5.2 洗脱剂浓度选择40-41

    4.3.6 两种纯化策略的比较41-42

    4.3.7 分光光度检测法与 HPCE 法检测茶皂素的比较42

    4.4 油茶饼粕中蛋白质的提取及部分功能特性探讨42-47

    4.4.1 蛋白质的提取工艺优化42-44

    4.4.1.1 蛋白质等电点的确定42

    4.4.1.2 料液比对油茶饼粕蛋白质提取率的影响42-43

    4.4.1.3 浸提时间对油茶饼粕蛋白质提取率的影响43

    4.4.1.4 浸提温度对油茶饼粕蛋白质提取率的影响43-44

    4.4.1.5 pH 对油茶饼粕蛋白质提取率的影响44

    4.4.2 提取工艺的正交试验结果浅析44-46

    4.4.3 油茶饼蛋白质功能特性探讨46-47

    4.4.3.1 溶解性46

    4.4.3.2 吸油性、起泡性、乳化性46-47

    5 讨论47-48

    6 结论48-49

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