本站原创摘要2-3
Abstract3-7
引言7-8
第一章 文献综述8-27
1.1 生物改造技术8-14
1.1.1 改造策略8-14
1.1.2 改造产物的纯化及鉴定14
1.2 蛋白质的结构及反应活性14-16
1.3 RAFT聚合策略合成聚合物修饰蛋白质16-22
1.3.1 RAFT聚合策略介绍16-18
1.3.2 “Postpolymerization”聚合策略18-21
1.3.3 “In Situ”聚合策略21-22
1.4 葡萄糖氧化酶介绍22-27
1.4.1 葡萄糖氧化酶的抗氧化作用机理22
1.4.2 葡萄糖氧化酶的生产22-23
1.4.3 葡萄糖氧化酶的运用23-24
1.4.4 改造黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)的探讨进展24-25
1.4.5 改造葡萄糖氧化酶表面的探讨进展25-27
第二章 用RAFT聚合策略合成聚乙二醇甲醚丙烯酸酯聚合物对葡萄糖氧化酶的改性27-44
2.1 实验试剂及仪器28-30
2.1.1 实验试剂28-29
2.1.2 实验仪器29-30
2.2 实验策略和步骤30-34
2.2.1 合成RAFT试剂31-32
2.2.2 带有巯基噻唑啉末端基的RAFT试剂的合成32
2.2.3 用RAFT法聚合聚乙二醇甲醚丙烯酸酯单体32
2.2.4 将聚乙二醇甲醚丙烯酸酯聚合物连接到葡萄糖氧化酶表面32-33
2.2.5 葡萄糖氧化酶活性的测定33
2.2.6 改性后的葡萄糖氧化酶热稳定性的测定33-34
2.2.7 改性后的葡萄糖氧化酶储存性的测定34
2.3 样品的测试及表征34-35
2.3.1 GPC---凝胶渗透色谱34
2.3.2 NMR---超导核磁共振波谱仪34
2.3.3 UV---紫外分光光度计34
2.3.4 Native PAGE---非变性蛋白质电泳34-35
2.4 结果与讨论35-43
2.4.1 带有巯基噻唑啉末端基的RAFT试剂以及聚乙二醇甲醚丙烯酸酯聚合物的表征35-37
2.4.2 将聚乙二醇甲醚丙烯酸酯聚合物连接到葡萄糖氧化酶表面的表征37-39
2.4.3 酶活性的测定39-41
2.4.4 葡萄糖氧化酶改造前后热稳定性的测试41-42
2.4.5 葡萄糖氧化酶改造前后储存性的测试42-43
2.5 本章小结43-44
第三章 用“In-situ”RAFT聚合策略在葡萄糖氧化酶表面聚合温度敏感型的聚合物异丙基丙烯酰胺Poly(NIPAAm)44-58
3.1 实验试剂及仪器45-46
3.1.1 实验试剂45
3.1.2 实验仪器45-46
3.2 实验策略和步骤46-48
3.2.1 把带有巯基噻唑啉末端基的RAFT试剂连接在葡萄糖氧化酶的表面47
3.2.2 用In-situ聚合策略在葡萄糖氧化酶表面聚合异丙基丙烯酰(NIPAAm)47-48
3.2.3 酶活性的测定48
3.2.4 酶的热稳定性浅析48
3.3 样品的测试及表征48-49
3.3.1 UV---紫外分光光度计48-49
3.3.2 Native PAGE---非变性蛋白质电泳49
3.3.3 DLS---激光粒度浅析仪49
3.4 结果与讨论49-57
3.4.1 把带有巯基噻唑啉末端基的RAFT试剂连接在葡萄糖氧化酶的表面49-52
3.4.2 用In-situ聚合策略在葡萄糖氧化酶表面聚合异丙基丙烯酰(NIPAAm)52-55
3.4.3 酶活性的测定55-56
3.4.4 酶的热稳定性浅析56-57
3.5 本章小结57-58
结论58-59