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摘要：目的：本实验通过观察芪参健脾方对自发性高血压大鼠(SHR)尾动脉收缩压及血浆一氧化氮、前列环素、内皮源性超极化因子、血管紧张素Ⅱ和内皮素1含量的影响,评价其降压效果及探讨血管舒缩因子释放对血压的影响,考察芪参健脾方对血管内皮功能的修复,探求高血压进程中血管内皮功能障碍的改善机制；同时探讨芪参健脾方对SHR ACE2-Ang(1-7)-Mas-T通路中各信号分子含量及肾激肽释放酶表达的调节,探讨二者协同作用调节内皮舒缩因子释放的分子机制；进一步探讨芪参健脾方对于SHR胸主动脉Ⅰ型、Ⅲ型胶原及转化生长因子β1。表达的影响,探求高血压进程中血管重构的改善机制；为临床辨证治疗施以芪参健脾方提供科学的实验数据与论述基础,部分诠释其降压及血管保护作用的分子机制。材料与策略：采取随机对照策略将60只24周龄SHR分为模型组(给予蒸馏水,SHR组)、培哚普利组[培哚普利.0.4mg/kg/d]、培哚普利联合中药组[培哚普利0.4mg/kg/d+中药中剂量,中加西组]、中药高、中、低剂量组(用药量按照每100g大鼠体质量分别折算为4g,2g,1g),每组10只,以同龄同种系正常血压的京都种大鼠(WKY)10只作为正常组(WKY组),大鼠日一次灌胃。智能无创血压计测量大鼠初次给药前以及给药后4h、2周、4周、6周大鼠尾动脉收缩压变化情况,每次测量时间为给药后4h。连续治疗6周。大鼠禁食、自由饮水24小时后,各组大鼠称重,10%水合氯醛腹腔麻醉(3ml/kg体重)。大鼠麻醉后固定于鼠台上,用0.5%碘伏消毒大鼠腹部皮肤,剪开皮肤及腹膜,显现腹主动脉,注射器缓慢抽血,滴加抗凝剂,4℃静置2h后3000rpm离心10min,抽取上层淡透明血浆,-20℃保存备用ELISA法检测血浆舒缩因子及Ang(1-7)含量。沿腹腔向上打开胸腔,显现胸主动脉,用手术线结扎胸主动脉上下两端lcm长度,保证血管内含有部分血液,沿结扎处将血管剪下浸入4%多聚甲醛中固定,进行血管病理形态学观察及免疫组化策略检测SHR胸主动脉壁Ⅰ、Ⅲ型胶原、转化生长因子β3,的表达；另取血管组织约50mg放入EP管中,于-70℃冰箱保存,western策略检测血管转化生长因子β1的表达。横向剪开腹腔,充分暴露肾脏,取左肾脏组织约50mg放入EP管中并加入1mL Trizol试剂,于-70℃冰箱保存,PCR策略检测肾脏ACE2、Mas、激肽释放酶基因的表达；另取左肾脏组织约50mg放入EP管中,于-70℃冰箱保存,western策略检测T蛋白表达。数据采取SPSS16.0软件进行单因素方差浅析,组间两两比较采取LSD法浅析,结果以均数±标准差(x±s)表示,P0.05被认为有显著性差别。结果：1.芪参健脾方对SHR尾动脉收缩压的影响统计结果显示：用药前,各组大鼠收缩压均高于WKY组(PO.01)；药后4h,各组大鼠收缩压无显著变化；用药2周后,培哚普利组、中加西组大鼠收缩压显著下降,与模型组相比有统计学作用(P0.01),药后4周及药后6周大鼠收缩压持续下降,与模型组相比有统计学作用(P＜0.01)；中药高、中、低剂量组大鼠收缩压用药2周后也有一定程度的下降,药后4周及药后6周大鼠收缩压下降不显著,与模型组比较无统计学作用。2.芪参健脾方对SHR血浆中血管内皮舒缩因子含量的影响统计结果显示：SHR组大鼠血浆一氧化氮(NO)、前列环素(PGI2)、内皮源性超极化因子(EDHF)含量显著低于WKY组(P＜O.01)；培哚普利组、中加西组、中药高中剂量组大鼠血浆NO含量显著高于SHR组(P0.05)；培哚普利组、中加西组、中药高剂量组大鼠血浆PGI2含量显著高于SHR组(P0.05)；培哚普利组、中加西组、中药高中剂量组大鼠血浆EDHF含量显著高于SHR组(P0.05)；中加西组与培哚普利组相比舒张因子的含量无统计学作用。SHR组大鼠血浆血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)和内皮素1(ET-1)含量显著高于WKY组(P0.05)；培哚普利组、中加西组、中药高中低各剂量组大鼠血浆Ang Ⅱ.ET-1含量显著低于SHR组(P0.01);WKY组、中加西组、中药高剂量组血浆AngⅡ含量与培哚普利组相比无统计学作用；WKY组、中加西组、中药高中低各剂量组血浆ET-1含量与培哚普利组相比无统计学作用。3.芪参健脾方对SHR ACE2-Ang(1-7)-Mas-T通路中各信号分子含量的影响SHR组大鼠Ang(1-7)含量显著低于WKY组(P0.01)；培哚普利组、中加西组、中药高中低各剂量组大鼠含量显著高于SHR组(P0.05)；中药高中低各剂量组Ang(1-7)含量低于培哚普利组(P0.05)。与WKY组比较,SHR组大鼠肾脏ACE2、Mas、激肽释放酶mRNA的表达量显著减少(P0.01)；中加西组、培哚普利组ACE2、Mas、激肽释放酶mRNA的表达量显著高于SHR组(P0.01,P0.05)：中药高、中剂量组Mas mRNA(?)的表达量显著高于SHR组(P0.01),中药高剂量组ACE2、激肽释放酶mRNA的表达量与SHR组相比P0.05。与WKY组比较,SHR组大鼠肾脏T蛋白的表达量显著减少(P0.01)；中加西组、中药高剂量组、培哚普利组T蛋白的表达量显著高于SHR组(P0.0l,P0.05),中药中、低剂量组对T蛋白表达与SHR组相比无统计作用。4.芪参健脾方对SHR胸主动脉管壁形态学的影响WKY组胸主动脉血管内膜无内皮细胞脱落,无血细胞粘附,细胞排列致密有序,无细胞增生,血管壁无增厚。SHR组胸主动脉内皮细胞部分脱落,内膜不光滑,有血细胞粘附聚集,中膜弹性纤维变直、减少、断裂,平滑肌细胞肥大增生显著,外膜细胞增生活跃,细胞核密度增加,血管管壁增厚。中加西组大鼠胸主动脉内皮细胞未脱落,无血细胞粘附,平滑肌细胞增生不显著,弹性纤维较SHR组排列有序；中药高剂量组血管病理形态观察与中加西组相似。培哚普利组、中药中低剂量组胸主动脉内皮细胞偶有脱落,较SHR组相比中膜弹性纤维排列基本有序,平滑肌细胞肥大增生减少。5.芪参健脾方对SHR胸主动脉壁Ⅰ、Ⅲ型胶原、转化生长因子β,表达的影响免疫组化观察：SHR组与WKY组相比Ⅰ、Ⅲ型胶原、血管转化生长因子β,表达显著增加,差别有统计学作用(P0.01)；中加西组、培哚普利组、中药高中低剂量组表达较SHR组均减少(P0.01)。中加西组和WKY组Ⅰ、Ⅲ型胶原、血管转化生长因子β1表达量比较差别无统计学作用。与WKY组比较,SHR组大鼠血管转化生长因子β1的蛋白表达量显著增加(P0.01)；中加西组、培哚普利组、中药高中低各剂量组蛋白表达量显著低于SHR组(P0.0l,P0.05)。结论：1.芪参健脾方中剂量联合培哚普利治疗对SHR尾动脉收缩压体现出较好的降压效果,治疗4周达到稳定期；与培哚普利治疗组降压效果相似。2.芪参健脾方通过调节血管内皮舒缩因子NO、PGI2、EDHF、AngⅡ和ET-1的释放平衡,改善高血压进程中血管内皮功能障碍。3.芪参健脾方联合培哚普利及单方高剂量的运用,显著推动了ACE2-Ang(1-7)-Mas-T通路中各信号分子的表达,同时也增强激肽释放酶基因的表达量,以而调节血管内皮舒缩因子的分泌与释放,发挥降压及保护血管内皮功能。4.芪参健脾方联合培哚普利及单方高剂量的运用能有效改善SHR血管病理形态结构,抑制血管Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达,下调TGF-β1,的蛋白表达,以而逆转血管的重构。关键词：健脾益气活血论文自发性高血压大鼠论文血管舒缩因子论文信号通路论文血管重构论文
英文缩略词表4-5
摘要5-9
Abstract9-15
前言15-17
文献综述17-30
1 实验材料30
2 实验策略30-33
3 结果33-67
浅析讨论67-78
结论78-79