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摘要：加兰他敏是一种四环生物碱,在药理上是一种具有可逆作用的胆碱酯酶抑制剂,可广泛用于老年性痴呆的记忆障碍、重症肌无力、肠麻痹和骨髓灰质炎后遗症等的治疗。,野生资源日渐枯竭,化学合成成本依然较高,导致加兰他敏市场处于供不应求的,因此利用内生菌可产生与宿主相同或物质这一特性及微生物发酵这一途径来解决加兰他敏资源的可持续利用问题具有的学术价值和广阔的市场前景。本论文在前期工作的基础上,对从忽地笑鳞茎中筛选出来的产加兰他敏菌株L-9紫外诱变,高产菌株U3′,其加兰他敏的摇瓶发酵产量达336μg.L-I,较出发菌株L-9产量提高了41.2%。遗传稳定性试验该菌株具有良好的传代稳定性。运用响应面分析法对诱变菌株U3′了发酵条件的优化,结果确定U3′菌株液体发酵产加兰他敏的最适发酵培养基配方为：麦芽糖51.93 g·L-1、蛋白胨22.10 g.L-1、磷酸氢二钾1.61 g.L-1、七水硫酸镁0.5 g.L-1、硫酸亚铁0.0125g.L-1、氯化钙0.125 g.L"1、硫胺素0.00125 g.L-1。U3′菌株液体发酵产加兰他敏的最适培养条件为：转速180 rpm,接种龄为42 h,初始pH值5,接种量3%,装液量为50/250 mL三角瓶,发酵温度为26℃,发酵周期为8 d。经发酵条件优化后,U3′菌株加兰他敏的产量高达678.3μg.L-1,较出发菌株L-9产量提高了191.1%。以上研究结果为加兰他敏新资源的开发以及放大实验和工业化条件筛选奠定了基础。关键词：加兰他敏论文内生菌论文诱变育种论文发酵优化论文
摘要5-6
ABSTRACT6-8
引言8-11
1.加兰他敏产生菌的菌种选育11-19
1.1 和方法11-14
1.1.1 11-12
1.1.2 方法12-14
1.2 实验结果14-18
1.2.1 产孢培养基的选择14-15
1.2.2 照射时间与死亡关系曲线的绘制15-17
1.2.3 紫外线诱变结果17
1.2.4 传代稳定性实验17-18
1.3 小结与讨论18-19
2 高产菌株液体发酵条件的优化19-42
2.1 与方法19-24
2.1.1 19
2.1.2 方法19-24
2.2 结果与分析24-40
2.2.1 生长曲线及pH值、加兰他敏产量变化的测定24-26
2.2.2 单因素试验,确定最佳氮源碳源26-29
2.2.3 Plackett-Burman试验结果29-32
2.2.4 最陡爬坡试验32
2.2.5 响应面分析法优化培养基32-36
2.2.6 发酵条件的优化结果36-40
2.3 小结与讨论40-42
3.与展望42-44
致谢44-45