本站原创摘要6-8
ABSTRACT8-13
篇 文献综述13-30
章 奶山羊产羔性状分子育种的研究进展13-17
1.1 西农萨能奶山羊品种简介13-14
1.2 现代生物技术的应用14-17
1.2.1 性别控制技术14
1.2.2 分子标记的应用14-15
1.2.3 转基因动物技术的应用15-17
章 启动子的研究进展17-24
2.1 启动子17-18
2.2 常用启动子18-20
2.3 卵巢特异性启动子20-22
2.4 双启动子研究进展22-24
章 实时定量PCR 技术及其在动物研究中的应用24-29
3.1 实时定量PCR 技术的背景24
3.2 实时定量PCR 技术原理24-25
3.3 实时定量PCR 技术的标记方法25-29
3.3.1 Taqman 探针25-26
3.3.2 内嵌染料26-27
3.3.3 分子信标27-29
章 本研究的目的及29-30
篇 试验研究30-56
第五章 不同启动子表达载体的构建与鉴定30-43
5.1 与方法30-38
5.1.1 试验30-32
5.1.1.1 试验样品30
5.1.1.2 主要仪器设备30-31
5.1.1.3 试验主要试剂和载体等31-32
5.1.2 试验方法32-38
5.1.2.1 载体构建图32
5.1.2.2 目的基因片段的克隆32-35
5.1.2.3 pCMV-EGFP 载体构建35-36
5.1.2.4 pOSP1-EGFP 载体的构建36-37
5.1.2.5 pCMV-OSP1-EGFP 载体的构建37-38
5.1.2.6 质粒的大量提取38
5.2 结果与分析38-41
5.2.1 目的基因片段的克隆38-39
5.2.2 pCMV-EGFP 载体的构建39
5.2.3 pOSP1-EGFP 载体的构建39-40
5.2.4 pCMV-OSP1-EGFP 载体的构建40-41
5.3 讨论41-42
5.3.1 关于引物设计41
5.3.2 关于PCR 扩增41-42
5.3.3 关于OSP-1 启动子42
5.4 小结42-43
第六章 奶山羊卵泡颗粒细胞的分离培养43-48
6.1 与方法43-45
6.1.1 试验43-44
6.1.1.1 试验样品43
6.1.1.2 主要仪器设备43-44
6.1.1.3 主要试验试剂44
6.1.2 试验方法44-45
6.1.2.1 奶山羊卵泡颗粒细胞的采集和原代培养44
6.1.2.2 奶山羊卵泡颗粒细胞的传代培养44-45
6.1.2.3 奶山羊卵泡颗粒细胞的冻存45
6.2 结果与分析45-46
6.2.1 奶山羊卵泡颗粒细胞原代培养观察45-46
6.2.2 奶山羊卵泡颗粒细胞传代培养观察46
6.3 讨论46-47
6.4 小结47-48
第七章 不同启动子表达载体的转染与鉴定48-56
7.1 与方法48-52
7.1.1 试验48-49
7.1.1.1 试验样品48
7.1.1.2 主要仪器设备48
7.1.1.3 主要试剂和载体48-49
7.1.2 试验方法49-52
7.1.2.1 各组织细胞的复苏与传代49-50
7.1.2.2 转染各组织细胞50
7.1.2.3 实时定量PCR 鉴定50-52
7.2 结果与分析52-54
7.2.1 荧光检测pOSP1- EGFP 在各组织细胞中的表达52-53
7.2.2 实时定量PCR 鉴定53-54
7.3 讨论54-55
7.3.1 关于实时定量PCR54
7.3.2 关于OSP-1 启动子的特异性表达54-55
7.3.3 关于双启动子的转录活性55
7.4 小结55-56
主要56-57
本研究的创新点57-58
研究的问题58-59
附录59-61