本站原创摘要5-7
Abstract7-13
英文缩略词表13-14
第一章 绪论14-34
1.1 新生儿细菌性脑膜炎的探讨进展14-16
1.1.1 病理生理学特点14-15
1.1.2 细菌性脑膜炎病理机制的探讨进展15-16
1.2 多核白细胞跨内皮迁移的探讨进展16-23
1.2.1 细胞跨内皮迁移探讨的概述16-17
1.2.2 细胞跨内皮迁移与一些疾病的发生及进展的联系17-18
1.2.3 细胞跨内皮迁移的方式18-19
1.2.4 细胞跨内皮迁移的机制19-20
1.2.5 白细胞跨内皮迁移的探讨进展20-23
1.3 中间纤维波形蛋白的结构和功能23-27
1.3.1 中间纤维蛋白概述23-26
1.3.2 波形蛋白和神经胶质酸性蛋白26-27
1.3.3 波形蛋白的功能和作用27
1.4 脂阀及其在脑膜炎性大肠杆菌引起的白细胞迁移中的作用27-31
1.4.1 脂阀概述27-29
1.4.2 脂筏与细菌相互作用29-30
1.4.3 脂筏与细菌毒素30-31
1.4.4 脂筏参与病毒入胞历程31
1.5 立题依据和主要探讨内容31-34
1.5.1 立题依据31-33
1.5.2 主要探讨内容33-34
第二章 IbeA 在脑膜炎性细菌引起的 PMN 迁移中的作用34-54
2.1 材料与策略35-43
2.1.1 菌种和细胞及主要试剂35
2.1.2 实验器材和实验耗材35-36
2.1.3 细菌培养36
2.1.4 细胞培养36-39
2.1.5 多核白细胞跨内皮迁移的体外实验39-40
2.1.6 感受态细胞制备和电转化40
2.1.7 His-IbeA 蛋白的表达与纯化40-41
2.1.8 ibeA 基因在脑膜炎性大肠杆菌引起的白细胞跨越血脑屏障的体内动物实验41-42
2.1.9 IbeA 包被的 beads 及大肠杆菌之间的相互作用42-43
2.2 结果与浅析43-51
2.2.1 大肠杆菌 K1 菌株引起的 PMN 与 BMEC 的相互作用43-44
2.2.2 纯化的 IbeA 蛋白引起的 PMN 与 BMEC 的相互作用44-47
2.2.3 IbeA 蛋白足以诱导体外的 PMN 跨脑部微血管内皮细胞迁移47-48
2.2.4 IbeA 蛋白诱导体内的 PMN 跨脑内皮迁移现象48-50
2.2.5 条件培养基对 PMN 跨内皮迁移的效应50-51
2.3 本章小结51-54
第三章 波形蛋白在脑膜炎性大肠杆菌 K1 菌株引起多核白细胞跨内皮迁移中的作用54-68
3.1 材料与策略55-60
3.1.1 菌种、细胞及主要试剂55
3.1.2 实验仪器与耗材55-56
3.1.3 大肠杆菌菌株56
3.1.4 Western Blotting 杂交56-57
3.1.5 PMN 迁移体外实验57-58
3.1.6 Lentivirus 慢病毒转染人 BMECs58-59
3.1.7 人 BMEC 中慢病毒介导的波形蛋白过表达59
3.1.8 免疫荧光与共聚焦显微浅析59-60
3.2 结果与浅析60-66
3.2.1 波形蛋白断裂抑制了 IbeA 诱导的 PMN 跨内皮迁移60-62
3.2.2 BMEC 波形蛋白过量表达对 PMN 穿脑内皮迁移的效应62-64
3.2.3 PMN 通过 BMEC 的跨细胞迁移是由波形蛋白介导的64-66
3.3 本章小结66-68
第四章 脑膜炎性大肠杆菌诱导多核白细胞跨 BMEC 迁移的路径探讨68-86
4.1 材料与策略69-73
4.1.1 菌种、细胞及主要试剂69-70
4.1.2 实验仪器与耗材70
4.1.3 大肠杆菌菌株70
4.1.4 Western Blotting 杂交70-71
4.1.5 内皮细胞粘附分子表达的免疫印迹浅析71-72
4.1.6 人 BMEC 中慢病毒介导的波形蛋白过表达与头部区域缺失表达72-73
4.1.7 PMN 体外迁移实验73
4.1.8 免疫荧光观察与数据统计73
4.2 结果与浅析73-83
4.2.1 脑膜炎性大肠杆菌诱导内皮细胞粘附分子表达73-74
4.2.2 IbeA 蛋白诱导内皮细胞粘附分子表达74-77
4.2.3 BMEC 波形蛋白对内皮细胞上粘附分子表达的效应77-80
4.2.4 脂阀在 ibeA+的大肠杆菌诱导的 PMN 跨 BMEC 迁移中的作用80-83
4.3 本章小结83-86
第五章 IbeA 蛋白引起白细胞迁移的功能性片段初步鉴定86-100
5.1 材料与策略86-95
5.1.1 菌种与细胞86-87
5.1.2 质粒与载体87
5.1.3 工具酶及主要试剂87
5.1.4 实验仪器与耗材87-88
5.1.5 原核表达载体的构建88-92
5.1.6 融合蛋白的诱导表达与纯化92-95
5.2 结果与浅析95-99
5.2.1 IbeA 蛋白的生物信息学浅析95-97
5.2.2 PCR 目的片段扩增97
5.2.3 融合蛋白的诱导表达与纯化97-98
5.2.4 IbeA 片段蛋白的功能鉴定98-99
5.3 本章小结99-100
结论与展望100-102
结论100
论新之处100-101
展望101-102