转运大肠杆菌膜蛋白UraA和AdiC结构和转运机制科技

摘要4-5

Abstract5-10

第1章 引言10-53

1.1 协同运输转运蛋白的分类与结构探讨10-26

1.1.1 协同运输转运蛋白的分类10-11

1.1.2 协同运输转运蛋白的结构探讨11-26

1.2 NCS2 家族及 UraA26-39

1.2.1 NAT 家族26-35

1.2.2 UraA 蛋白的探讨35-39

1.3 AdiC 及 APC 超家族39-50

1.3.1 APC 超家族39-41

1.3.2 大肠杆菌抗酸系统41-45

1.3.3 AdiC 的基因调控及功能探讨45-48

1.3.4 AdiC 的结构生物学探讨48-50

1.4 本论文的探讨目的与内容50-53

1.4.1 UraA 结构和功能探讨的目的与内容50-52

1.4.2 AdiC 结构和功能探讨的目的与内容52-53

第2章 UraA 结构与功能的探讨53-90

2.1 引言53-54

2.2 材料与策略54-66

2.2.1 材料54

2.2.2 表达载体的构建54-55

2.2.3 UraA 的表达与纯化55-58

2.2.4 膜蛋白结晶条件的筛选与优化58-60

2.2.5 重原子晶体的筛选和优化60-61

2.2.6 SPA 实验61-63

2.2.7 细胞实验63-66

2.2.8 ATR - FTIR66

2.3 结果与讨论66-90

2.3.1 UraA 晶体的生长和结构剖析66-70

2.3.2 UraA 结构浅析70-80

2.3.3 UraA 的功能探讨80-87

2.3.4 结构构象浅析及转运模型的提出87-90

第3章 AdiC 结构与功能的探讨90-116

3.1 引言90

3.2 材料与策略90-95

3.2.1 材料90-91

3.2.2 表达载体的构建91

3.2.3 AdiC 的表达与纯化91

3.2.4 硒代甲硫氨酸蛋白的制备91-92

3.2.5 AdiC 结晶条件的筛选与优化92-93

3.2.6 数据的收集和结构的剖析93

3.2.7 ITC 实验测定 AdiC 与底物的结合能力93

3.2.8 脂质体实验93-95

3.3 结果与讨论95-116

3.3.1 AdiC 蛋白的纯化结果95-96

3.3.2 AdiC 结构的剖析96-98

3.3.3 AdiC 结构浅析98-108

3.3.4 AdiC 功能的探讨108-111

3.3.5 AdiC 与底物胍基丁胺复合体的结构剖析111-113

3.3.6 结构构象浅析及转运模型的提出113-116

第4章 论文总结116-119

4.1 论文总结116-117

4.1.1 UraA 部分论文的总结116-117

4.1.2 AdiC 部分论文的总结117

4.2 工作中待解决的不足117-118

4.2.1 UraA 蛋白待解决的不足117

4.2.2 AdiC 蛋白待解决的不足117-118

4.3 前景与展望118-119