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摘要：目的本课题旨在建立一套适于脱落细胞检测的激光显微捕获切割技术(Laser Capture Microdissection, LCM)的策略,并对该策略在脱落细胞类检材特别是降解的脱落细胞样本检验中的运用进行探讨性探讨。策略1以口腔上皮脱落细胞为模型,以染色策略、提取策略、循环参数等方面进行比较探讨,建立LCM策略。2以酸性饮料和口腔上皮细胞混合物为探讨对象,对Chelex-100法、Chelex-100与Microcon100相结合法、DNAIQTM提取法等不同策略分别与LCM策略进行比较探讨。3以尿液中脱落细胞为探讨对象,对目前法庭科学常用检测策略与LCM策略进行比较探讨。结果1利用本实验所建立的LCM策略捕获10个口腔上皮细胞,即可获得完整的DNA分型,重复性较好,为法医实际案件中微量生物检材的DNA检验提供了一种参考策略。2酸性饮料和口腔上皮细胞混合物仅采取Chelex-100法或与Microcon100相结合,难以获得较高质量的DNA,以而难以获得较满意的检测结果；对于柠檬酸类混合物,可直接采取DNA IQTM提取法提取,并可以通过减小洗脱体积,提升DNA浓度,以而提升DNA的检出率；乳酸类富含蛋白质的混合物,可考虑采取LCM法,将靶细胞以复杂环境中分离,更利于获得较好的检测结果。3新鲜尿液组：采取LCM技术提取的DNA在所有基因座上均获得较满意的结果,而采取Chelex-100提取法提取的DNA在各基因座上有着等位基因丢失、非特异性扩增、峰值低等不足；储存尿液组：4℃储存10天以内和室温储存4天以内的尿液采取LCM技术联合DNA IQTM提取法的均可明确判读12个以上基因座；而采取Chelex-100提取法未获得有效分型。结论LCM法为脱落细胞类检材,特别是降解的脱落细胞的DNA检测提供了一种有效的策略,同时也为其他种类的微量生物检材的检验提供了一种参考策略。关键词：激光显微捕获切割技术(LCM)论文低拷贝模板DNA(LCN论文DNA)论文脱落细胞论文DNA分型论文
中文摘要5-6
Abstract6-8
前言8-9
第一部分 法医物证学中LCM技术策略学的建立及其有效性探讨9-27
1 材料与策略9-12
2 结果12-22
3 讨论22-24
4 案例运用24-27
第二部分 激光显微捕获切割技术在微量降解的脱落细胞DNA检验中的运用27-37
1 材料与策略27-28
2 结果28-34
3 讨论34-37
第三部分 激光显微捕获切割技术在尿沉渣DNA检测中的运用37-44
1 材料与策略37-38
2 结果38-43
3 讨论43-44
结论44-45