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摘要：目的通过体外培养SD大鼠乳鼠肌源性干细胞(Muscle Derivrd Stem Cells，MDSCs)，尾静脉注射链脲菌素（streptozotocin,STZ）建立糖尿病大鼠模型。探讨MDSCs移植对糖尿病大鼠残存胰岛细胞的保护作用，并探讨此保护作用的可能机制。策略1、采取混合酶一步消化法提取SD大鼠乳鼠肌源性干细胞，差速贴壁法纯化，倒置显微镜下观察细胞形态，结蛋白（Dein）免疫细胞化学策略鉴定肌源性干细胞。2、尾静脉注射链脲菌素（streptozotocin,STZ）建立糖尿病大鼠模型。模型成立后随机分成3组，分别为STZ组（胰腺被膜射PBS）；MDSCsa组（胰腺被膜射肌源性干细胞）；MDSCsb组（胰腺被膜射肌源性干细胞+Ly294002）。移植后每周监测血糖变化，免疫组织化学策略观察胰腺组织磷酸化Akt（phosphorylation Akt，pAkt)蛋白表达情况，TUNEL染色观察凋亡的胰岛细胞，Western blot半定量检测胰岛组织中pAkt、Bcl-2/Bax的表达变化，RT-PCR检测IGF-1mRNA的表达。结果1、差速贴壁后，成功培养出高纯度的肌源性干细胞，Dein免疫细胞化学结果为阳性。2、血糖变化：STZ组大鼠血糖逐渐呈升高走势；移植后第1周MDSCsb组（23.0±2.4mmol/L)大鼠血糖下降并不显著，到第4周（22.5±3.5mmol/L)血糖变化不显著与STZ组（25.3±3.2mmol/L,26.4±2.8mmol/L）比较无统计学作用；移植后第1周MDSCsa组（18.5±3.4mmol/L）大鼠血糖下降，与STZ组和MDSCsb组比较有统计学作用（P0.05，P0.05），血糖继续下降,移植后第2周血糖浓度（13.5±1.3mmol/L），与STZ组和MDSCsb组比较有统计学作用（P0.05，P0.05）。到第4周血糖有所回升，但仍高于正常血糖值。3、免疫组织化学策略观察胰腺组织pAkt，pAkt蛋白阳性反应为或棕颗粒，弥漫性分布，定位于核膜、胞浆。STZ组有少量表达，MDSCsb组蛋白表达相对增加，MDSCsa组蛋白表达显著增加。TUNEL染色:在STZ组和MDSCsb组大鼠胰腺组织中发现较多阳性细胞，即胰岛凋亡细胞增加，而在MDSCsa组胰岛中阳性细胞较少，即凋亡细胞较少。Western blot检测发现，与STZ组和MDSCsb组比较，MDSCsa组Bcl-2和pAkt蛋白的表达相应增强，Bax蛋白的表达降低。RT-PCR检测发现，与STZ组和MDSCsb组比较，MDSCsa组IGF-1的mRNA相对表达量是显著增加的。结论1、通过混合酶一步消化法可获得高纯度、活力好的大鼠MDSCs，结蛋白细胞免疫组织化学可以对其早期鉴定。2、MDSCsa组IGF-1基因相对表达量显著增加，胰岛细胞凋亡显著减少，说明MDSCs的旁分泌对MDSCs移植糖尿病大鼠体内对残存胰岛起到了保护作用。3、MDSCsa组pAkt的表达显著增强，说明了PI3K/Akt信号通路对这一保护作用进行了调控。关键词：肌源性干细胞论文糖尿病论文移植论文丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶论文
中文论著摘要4-6
英文论著摘要6-9
英文缩略语9-10
前言10-11
材料与策略11-16
结果16-24
讨论24-26
结论26-27
本探讨革新性的自我评价27-28