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谈述髓鞘MEHP诱导大鼠C6神经胶质瘤细胞向少突胶质细胞分化科研方法和

收藏本文 2024-03-23 点赞:9310 浏览:27906 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:目的: DEHP是运用最广泛的增塑剂,MEHP是其在体内的活性代谢产物。近年来,大量流行病学调查资料显示婴幼儿与儿童的DEHP、MEHP的暴露水平高于成人。有实验探讨表明MEHP可以影响神经元的增殖分化,流行病学调查也显示高水平暴露于DEHP的母亲产下的婴儿神经反射情况欠佳。为了探讨MEHP是否对神经胶质细胞产生毒性作用,本实验采取C6神经胶质瘤细胞模型探讨MEHP对神经胶质细胞分化的影响。策略:培养未分化的大鼠C6细胞;将未分化的C6细胞置于不同浓度的MEHP(100mg/L、50mg/L、10mg/L、1mg/L)低血清培养基中进行培养,培养时间为24小时、48小时,同时设立对照组(0.1%DMSO);采取MTT及流式细胞术检测不同浓度的MEHP对C6细胞活性的影响及是否发生凋亡;采取倒置显微镜观察各组细胞形态变化,统计阳性延展细胞百分数;采取免疫荧光和免疫印迹检测各组MBP、GFAP、PPARγ蛋白表达水平。结果:1. MTT及流式细胞术检测显示,MEHP影响C6细胞活性,抑制细胞生长,但在该剂量及作用时间范围内不引起凋亡。2.倒置显微镜观察各组细胞形态,对照组大部分未分化C6细胞胞体呈长梭形、有的呈多角形,胞体有短而粗的突起,而暴露于MEHP的实验组与对照组相比,细胞胞体较光滑、变得更圆,两端突起变得更细更长;随着MEHP浓度和作用时间的增加,阳性延展细胞数增加。3.免疫荧光和免疫印迹结果显示, PPARγ、GFAP的表达无显著差别,而随着MEHP浓度的增加和作用时间的增加,细胞MBP的表达增加。结论:MEHP诱导大鼠C6神经胶质瘤细胞向少突胶质细胞分化。关键词:邻苯二甲酸-单-2-乙基己酯论文C6细胞论文少突胶质细胞论文分化论文髓鞘碱性蛋白论文

    中英文缩略词表5-6

    中文摘要6-8

    ABSTRACT8-10

    前言10-13

    一、材料和策略13-28

    二、结果28-42

    2.1 MEHP影响C6 细胞活性,抑制细胞生长,并不引起凋亡28-29

    2.2 MEHP对C6 细胞形态的影响29-33

    2.3 MEHP暴露推动分化中的 C6 细胞MBP表达增加, PPARγ、GFAP的表达无显著差别33-42

    三、讨论42-44

    四、小结44-45

    五、参考文献45-49

    附件49-50

    综述50-67

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