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简析转录顺式天然反义转录本(cisNATs)组学筛查与功能信

收藏本文 2024-02-04 点赞:10677 浏览:37955 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:目的:顺式天然反义转录本(cis-NAT)是指自然状态下源于基因相同区域的反义RNA,可与正义转录本形成正义反义转录本对(SA pair)。这种转录方式在真核生物的转录及转录后调控历程中发挥重要作用,可影响多种生理或病理历程(如肿瘤)。近来测序数据的累积和高通量芯片技术的出现使利用组学策略系统探讨cis-NATs成为可能。然而,目前这类探讨仅限于少数方式生物的编码基因,而基于非编码序列的次代转录组测序数据浅析案例尚缺乏。策略:本探讨首先设计了基于Ensembl基因诠释信息的非编码cis-NATs的筛查流程,在灵长目和啮齿目18个物种中进行搜索。考虑到次代测序能够提供更为丰富的组织转录信息,本探讨同时研发了一套基于次代测序的新cis-NATs发现流程(Gene2DGE),并利用该流程在human143B细胞的ssRNA-seq(strand-specific RNA-seq)数据集中进行搜索。最后基于候选的cis-NATs进行验证和功能学实验。结果:以人类为例,本探讨在基因组中发现18,510个SA基因对,并鉴定出11,493个为非编码cis-NATs,占所有cis-NATs的62.1%,提示非编码基因是cis-NATs的重要来源。而在其他物种中,所发现的非编码相关的数据均显著低于人类。同时我们的筛查还发现一定数目的非编码Cis-NATs具备物种间的保守性,提示非人物种中的非编cis-NATs尚待深入探讨。鉴定出73个新的与cis-NATs相关的转录活性区域;其中43个位于线粒体染色体上,而基于大鼠的组织mRNA-seq以及相应的细胞学实验提示:新的线粒体cis-NATs具有保守性,可能在线粒体中发挥重要功能。结论:1.基于Ensembl基因诠释系统和本实验室研发程序筛查出高覆盖度的cis-NATs,并筛查同源性和保守型高SA基因。2.新的高通量核酸测序技术在已有诠释信息的基础上提供了新的cis-NATs,RNA-seq的结果极大提升对于非编码cis-NATs的发现。3.验证实验和功能实验提示线粒体中的新cis-NATs确实有着并可能具有重要的生物功能。关键词:顺式天然反义转录本论文正义反义转录本对论文次代测序论文Ensembl基因诠释论文

    摘要4-5

    ABSTRACT5-9

    第1章 绪论9-13

    1.1 顺式天然反义转录本组学探讨进展9-13

    1.1.1 引言9-10

    1.1.2 Cis-NATs 结构的电子发现10-11

    1.1.3 Cis-NATs 的功能基因组学探讨11-13

    第2章 基于 Ensembl 基因诠释系统筛查 cis-NATs13-22

    2.1 引言13

    2.2 材料和策略13-15

    2.2.1 Cis-NATs 的鉴定13-14

    2.2.2 SA 对的分类14-15

    2.2.3 同源浅析15

    2.3 结果15-20

    2.3.1 候选 Cis-NATs 数据集15-17

    2.3.2 不同重叠方式 SA 对17-19

    2.3.3 SA 基因的功能分类19-20

    2.4 讨论20-22

    2.4.1 数据覆盖度和数据类型20

    2.4.2 传统的 cDNA 数据的局限性20-21

    2.4.3 多物种的比较浅析21-22

    第3章 新 Cis-NATs 的 SsRNA-seq 筛查及功能诠释探讨22-40

    3.1 引言22

    3.2 材料和策略22-30

    3.2.1 新 cis-NATs 的发现22

    3.2.1.1 序列读段(reads)在基因组上的注释22

    3.2.1.2 转录谱浅析22

    3.2.2 新 cis-NATs 相关区域的蛋白质预测22-23

    3.2.3 功能性 cis-NATs 的验证及功能浅析23-30

    3.3 结果30-38

    3.3.1 候选 cis-NATs 数据集32-34

    3.3.2 新 cis-NATs 的鉴定34-35

    3.3.3 新 cis-NATs 的功能探讨35-38

    3.4 讨论38-40

    3.4.1 次代测序在已有诠释信息的基础上提供了新的 cis-NATs38

    3.4.2 线粒体中的新 cis-NATs 具有重要的功能38-39

    3.4.3 线粒体中的新 cis-NATs 可能编码新的蛋白39-40

    第4章 结论40-41

    4.1 结论40-41

    致谢41-42

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