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[摘要] 本文以DNA和免疫学为基础，从免疫磁珠分离法、基因芯片检测法、传统的PCR技术和定量的PCR技术等角度对水产品中微生物的检测方式进行了简单阐述。
[关键词] 水产品；微生物；检测技术
[] B [文章编号] 1673-9701（2013）07-0116-02
Research progress of microbial test method of aquatic product of microorganis in food
WANG Guoqin
Pingdingshan Center for Disease Control and Prevention in Henan Province， Pingdingshan 467000， China
[Abstract] This article in DNA and immunology as the foundation， from immune magnetic bead separation， using gene chip method， the traditional PCR technology and quantitative PCR technology aspects of microorganis in aquatic products detecting way briefly elaborated.
[Key words] Aquatic products； Microbial； Detection technology
在水产品当中存在着大量的微生物，对人类的身体健康带来了很大的威胁，会引起腹泻、呕吐、败血症等一系列病症。微生物对水产品的影响是造成食品安全隐患的首要因素。现在对水产品微生物检测方向主要是对大肠杆菌、菌落总数和致病菌等研究。传统的微生物检测方式以分离培养、血清试验和生化技术等为主，但是，面临的主要问题是资金使用大、人工劳动多、效率有待提高、特异性较弱等问题，没能从根本上解决水产品的质量安全，检测力度没有达到标准要求。随着我国分子生物学技术的不断发展，整体的检测效率有了质的飞跃，主要有检测效率高、针对性强、准确性有保证等特点，在对水产品微生物检测方面有着很大的使用前景，并且具有很大的挖掘空间。本文对水产品中微生物的检测方法做一探讨。
这种方法较普通检测方式而言，有着很明显的优势，可在含有大量细菌的溶液当中具有选择性的将微生物分离出来，并且具有较高的效率。与使用镜检技术和PCR等快速检测方式相互取长补短，免疫磁性分离技术可以将水产品微生物检测效率大大提高。例如：在创建免疫捕获-RT-PCR技术的过程中，即首先使用IgG抗体将甲型肝炎病毒吸收到标本之上，之后把该病毒的RNA通过逆转录形成cDNA[4]。使用PCR技术进行增长扩充，将传统核酸提取方式的步骤进行精简。这种方法体现出的优势在于更加灵敏，可以达到逆转录-PCR技术与打点杂交相结合的效果。把水产品当中的李斯特菌通过免疫磁性分离进行作用，以PCR技术为基础，可以产生具有独特效果的李斯特菌IMS-PCR技术，对水产品进行检测。通过使用该种技术进行检测，我们可以得到如下结论：该方法可以保证食品基质、杂菌和培养及成分不再对PCR检测带来严重性干扰，并且具有高敏感度、高效率和高准确性的特点。
例如：在辽宁近海地区，大量的海水样品以及贝类中具有甲型肝炎病毒，经过分析研究，使用石英粉滤柱法将水样品进行浓缩，同时使用PCR技术在附近海水中检测出RNA，最终结果表明，该部分海水中存在H污染，在此之后，使用抗原捕捉聚合酶链反应技术对辽宁周边沿海城市的水产品进行检测，结果为RNA阳性[6]。麻
[关键词] 水产品；微生物；检测技术
[] B [文章编号] 1673-9701（2013）07-0116-02
Research progress of microbial test method of aquatic product of microorganis in food
WANG Guoqin
Pingdingshan Center for Disease Control and Prevention in Henan Province， Pingdingshan 467000， China
[Abstract] This article in DNA and immunology as the foundation， from immune magnetic bead separation， using gene chip method， the traditional PCR technology and quantitative PCR technology aspects of microorganis in aquatic products detecting way briefly elaborated.
[Key words] Aquatic products； Microbial； Detection technology
在水产品当中存在着大量的微生物，对人类的身体健康带来了很大的威胁，会引起腹泻、呕吐、败血症等一系列病症。微生物对水产品的影响是造成食品安全隐患的首要因素。现在对水产品微生物检测方向主要是对大肠杆菌、菌落总数和致病菌等研究。传统的微生物检测方式以分离培养、血清试验和生化技术等为主，但是，面临的主要问题是资金使用大、人工劳动多、效率有待提高、特异性较弱等问题，没能从根本上解决水产品的质量安全，检测力度没有达到标准要求。随着我国分子生物学技术的不断发展，整体的检测效率有了质的飞跃，主要有检测效率高、针对性强、准确性有保证等特点，在对水产品微生物检测方面有着很大的使用前景，并且具有很大的挖掘空间。本文对水产品中微生物的检测方法做一探讨。
1 水产品中微生物的检验方法
1.1 采用免疫磁珠的分离方式
之所以使用免疫磁珠的分离方式，是因为可以将特异性的抗体与磁性颗粒的表面进行关联，可以让样品中的微生物进行特异性的结合，通过外部磁场的影响，装有病毒的微生物磁性球会在其作用之下向两端靠拢，这样就可以使微生物从样品当中脱离出来[3]。这种方法较普通检测方式而言，有着很明显的优势，可在含有大量细菌的溶液当中具有选择性的将微生物分离出来，并且具有较高的效率。与使用镜检技术和PCR等快速检测方式相互取长补短，免疫磁性分离技术可以将水产品微生物检测效率大大提高。例如：在创建免疫捕获-RT-PCR技术的过程中，即首先使用IgG抗体将甲型肝炎病毒吸收到标本之上，之后把该病毒的RNA通过逆转录形成cDNA[4]。使用PCR技术进行增长扩充，将传统核酸提取方式的步骤进行精简。这种方法体现出的优势在于更加灵敏，可以达到逆转录-PCR技术与打点杂交相结合的效果。把水产品当中的李斯特菌通过免疫磁性分离进行作用，以PCR技术为基础，可以产生具有独特效果的李斯特菌IMS-PCR技术，对水产品进行检测。通过使用该种技术进行检测，我们可以得到如下结论：该方法可以保证食品基质、杂菌和培养及成分不再对PCR检测带来严重性干扰，并且具有高敏感度、高效率和高准确性的特点。
1.2 采用基因芯片检测方式
所谓的基因芯片技术就是把每个基因寡核苷酸放在芯片的表面上，取得微生物样本的DNA，经过PCR扩增之后可以使用荧光标记探针，与芯片表面的寡核苷酸进行点杂交，最后使用精确的扫描仪进行定量并对荧光分布进行分析，最终确定被检测样品当中是否存在某种微生物[5]。基因芯片检测方式可以对微生物进行全面、高效和并行的检测。从数据角度分析，它可以对隐藏的病原体进行检测，使用一张芯片对某一种病原菌的各项指标进行检测，因此具有很好的效果。例如：经过混合之后的基因组可以准确地分辨出各种李斯特菌相关联的分离物，美国科学家经过分析，将单管复合体扩增与基因芯片技术对李斯特菌进行检测和分辨。使用固定、高效的措施对水产品中各种微生物进行获取、处理和分析是我们所期望的。现在，我国虽然在对样品的处理和相关基因芯片技术有了很大程度的提高，但是，使用基因芯片方式还需要对水产品中的微生物进行深入研究，而且要对外部标准化程序、资金、设备和条件等环境进行细致化建设，亟需对这一系列问题给予解决。总而言之，基因芯片技术还有着很大的发展空间。1.3 采用传统的PCR技术
所谓的PCR技术，就是聚合酶链式反应，它是在上个世纪八十年代首先由美国科学家提出的，是一种可以在体外快速增长的特定基因，所以，又称之为基因体外扩增技术。该技术可以在试管中进行，经过数小时的培养，可以使很少的目标基因增长数十万倍，即把不易检测的皮克单位扩增到易于检测的微克单位，省去了克隆流程，缩减了大量的费时程序。现在，PCR技术已经具有对微生物病原的检测、分析、克隆、分离以及序列分析等功能，而且在水产品微生物检测当中也予以高度的重视。例如：在辽宁近海地区，大量的海水样品以及贝类中具有甲型肝炎病毒，经过分析研究，使用石英粉滤柱法将水样品进行浓缩，同时使用PCR技术在附近海水中检测出RNA，最终结果表明，该部分海水中存在H污染，在此之后，使用抗原捕捉聚合酶链反应技术对辽宁周边沿海城市的水产品进行检测，结果为RNA阳性[6]。麻
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痹性贝毒是由甲藻类浮游生物分泌出的，对人体神经具有一定的麻痹作用，也是水产品中毒的主要元凶之一。可以通过建立PCR快速检测Alexandrium属和 A.minutum污染贻贝中的相关毒素类型方式，结果得出，PCR是一种对目标浮游生物进行有效深入的检测措施。源于：毕业设计论文致谢www.udooo.com