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摘要：阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是发生于老年和老年前期、以进行性认知功能障碍和行为损害为特点的中枢神经系统退行性病变，是老年期痴呆的最常见类型，主要体现为进行性全面认知功能损害。轻度认知功能障碍（Mild cognitive impairment，MCI）被认为是AD的临床前期，指记忆力受损但尚未达到痴呆的程度。我国60岁以上老年人口有1.2亿，痴呆患病率为3~8%，其中60%以上为阿尔茨海默病，以此比例，在我国估计有400~500万AD患者。帕金森病（Parkinson disease，PD），又名震颤麻痹（shaking palsy，paralysis agitans）是一种常见于中老年的神经系统变性疾病，于1817年由英国医生James Parkinson首先系统的进行描述故而得名。PD的发病年龄在40~70岁之间，其中，50~60岁为发病高峰。我国55岁~65岁人群患病率为约1%，随着年龄增高而升高，男性稍高于女性。随着人口老龄化进程，阿尔茨海默病和帕金森病的发病率均逐年上升。尤其AD已成为继肿瘤、心血管疾病、脑血管疾病之后导致死亡的第四位疾病，二者均严重影响患者的生活质量，给家庭、政府和社会带来沉重的生活和经济负担。国内外在AD领域多为动物实验或尸检后探讨神经元的受损情况，主要探讨AD的发病与细胞凋亡、细胞周期失调等机制的内在联系。然而，早期诊断AD，发现MCI患者是制定治疗对策、制约疾病进程的基础。近期探讨表明，在AD中细胞凋亡、细胞周期调控的失调不仅局限于神经元，而且体现在外周血淋巴细胞和成纤维细胞，淋巴细胞为探讨细胞周期相关事件在AD发病机制中的作用和寻找可干预的靶点提供了方便有用的模型。外周血采集方便，外周血淋巴细胞（peripheral blood lymphocytes，PBLs）是血液循环中的淋巴细胞。主要由T细胞（约占70%~80%）和B细胞（约占20%~30%）组成。由此，深入探讨可能为早期诊断AD提供方便有效的外周标记物和药物干预的靶点。如果能以外周血中获得简便、有效的标志物将对AD早期诊断及治疗产生重要作用，但至今尚无这样的标志物为临床所运用。双链RNA-依赖的蛋白激酶（the double stranded RNA-dependentprotein kinase，PKR），是一种丝/苏氨酸蛋白激酶，它是真核生物起始因子2α（eIF-2α）的特异蛋白激酶，双链RNA可赋予或抑制其活性。活化的PKR可形成同源二聚体，在多个丝/苏氨酸残基上实现自身磷酸化，然后催化其底物eIF-2α磷酸化，以而减少或抑制蛋白质的合成和翻译，在信号转导、应激、细胞生长、分化和凋亡调控中起重要作用。PKR还可激活与炎症、凋亡密切相关的NF-κB、P53等以而诱发炎症反应与肿瘤。几乎所有细胞型中都有PKR基础水平的表达，用干扰素诱导可以使其表达增高5~10倍。目前，PKR被认为是阿尔茨海默病调节的关键靶点，由此，探讨其是否可作为与认知功能减退相关的外周血生物学标记具有可行性和必定性。本课题以临床患者为探讨对象，对AD患者的外周血淋巴细胞中PKR的蛋白水平进行探讨，有助于临床早期诊断和治疗。目的：1探讨淋巴细胞中相关激酶PKR、P-PKR的表达情况，为筛查AD的可干预靶点提供细胞模型。2在外周血淋巴细胞中探讨细胞凋亡和细胞周期调控的相关激酶PKR、P-PKR的表达，寻找早期诊断AD的特异性外周标记物。3同时，对年龄相当的正常人、轻度认知功能障碍的患者以及同为神经变性病的帕金森病患者外周血淋巴细胞中PKR、P-PKR水平进行检测，以而明确这一指标的敏感性和特异性。策略：1根据诊断标准和排除标准筛选病人，收集2010年9月至2011年10月河北医科大学第二医院神经内科门诊的AD患者20例、MCI患者20例、PD患者20例、正常对照组20例，征得患者同意，利用简易精神状态量表（MMSE）、临床痴呆量表（CDR）等综合评价认知障碍的程度并记录患者的。2抽取患者新鲜静脉血置于抗凝管中上下颠倒几次，用人淋巴细胞分离液处理后经离心洗涤提取外周血淋巴细胞。3以外周血淋巴细胞中提取总蛋白，采取Western Blotting技术，分别检测其中PKR、P-PKR的蛋白表达水平。4统计学处理。采取SPSS17.0统计软件包进行处理。结果：1AD患者外周血淋巴细胞中PKR、P-PKR水平较MCI组、PD组升高，较正常对照组显著升高。2MCI组、PD组外周血淋巴细胞中PKR、P-PKR水平相当，较正常对照组升高，但升高幅度不显著。3外周血淋巴细胞中PKR、P-PKR水平与各组的MMSE评分、CDR评分呈负相关，与患者年龄和病程未见显著相关。结论：阿尔茨海默病早期往往无征兆，诊断困难。PKR、P-PKR在阿尔茨海默病患者、轻度认知功能障碍患者、帕金森患者、正常对照组外周血淋巴细胞中均有表达，只是表达量有所不同，可以与其他标志物一起联合作为AD诊断的外周血标志物。关键词：阿尔茨海默病论文轻度认知功能障碍论文帕金森病论文外周血淋巴细胞论文PKR论文P-PKR论文凋亡论文细胞周期论文
摘要4-7
ABSTRACT7-11
前言11-12
材料与策略12-19
结果19-21
附图21-23
附表23-24
讨论24-29
结论29-30