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【摘要】目的 探讨中国苏南地区汉族人群单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）基因启动子区A-2518G 单核苷酸多态性与 ACS 发病的相关性。方法 采用病例-对照研究方法，选择临床确诊的ACS 484 例（ACS组），其中急性心肌梗死（AMI）290 例，不稳定性心绞痛（UAP）194 例。经冠脉造影排除冠心病者 346 例为对照组，包括冠脉硬化症（CAS 组）166 例和冠脉无狭窄（冠脉正常组）180 例。利用聚合酶链式反应-限制性酶切片段长度多态性技术（PCR-RFLP）检测MCP-1基因 A-2518G 多态性。结果 MCP-1 基因 A-2518G 单核苷酸多态性在 ACS 组和对照组中均存在 AA、AG 和 GG 三种基因型。二组基因型分布符合 Hardy- Weinberg 平衡（P＞0.05），具有群体代表性。与对照组相比，ACS 组中 AA（15.32% vs. 16.12%）、AG（53.47% vs. 51.86%）和 GG（31.21% vs. 32.02%）基因型和 G（57.95% vs. 57.95%）等位基因频率差异均无统计学意义（P值分别为0.083、0.673、0.821 和 1.000）。对性别、年龄、吸烟、糖尿病、TC 和 LDL 等 6 个相关因素行 Logistic 回归分析显示，MCP-1 基因 A-2518G 单核苷酸多态性与ACS 的发病无相关性（P>0.05）。对男性ACS、女性 ACS、AMI、UAP 和早发 ACS 等 5 个亚组进行 MCP-1 基因 A-2518G 多态性分析，结果显示，男性和女性 ACS 分别与对照组相比、AMI 和 UAP 分别与冠脉正常组相比以及早发 ACS 与年龄相匹配的对照组相比，AA、AG 和 GG 基因型和 G 等位基因频率差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论 在中国苏南地区汉族人群中，MCP-1 基因存在 A-2518G 单核苷酸多态性，该多态性与 ACS 发病无显著相关性。
【关键词】单核细胞趋化蛋白-1；单核苷酸多态性；急性冠脉综合征
Correlation between polymorphi of monocyte chemoatt-ractant protein-1 gene A-2518G single nucleotide and acute coronary syndrome SHI Gan-wei，HE Guo-ping，CAI Gao-jun，QI Chuan-ping，GAO Lei，QI Meng，SHENG Dan-dan，QIAN Zhi-hong，XU Lian-hong. Department of Cardiology, Affiliated Wujin Hospital of Jiangsu University, Changzhou 213002,China
Corresponding author：HE Guo-ping，Email: guopinghe6@sina.com
【Abstract】Objective To investigate the possible correlation between the monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) gene A-2518G single nucleotide polymorphi (SNPs) in the promoter region a
2.3.2 基因型和等位基因频率分布的亚组分析男性和女性 ACS 组分别与对照组相应性别相比，AA、AG 和 GG 基因型和 G 等位基因频率分布差异均无统计学意义（表4）。
AMI 组和 UAP 组分别与冠脉正常组相比，AA、AG 和 GG 基因型和 G 等位基因频率分布差异无统计学意义（表5）。
与年龄相匹配的对照组相比，早发 ACS （男性≤55岁、女性≤65岁）的 AA、AG 和 GG 基因型和 G等位基因频率分布差异无统计学意义，见表6。
3 讨论
动脉粥样硬化（AS）是一种与炎症相关性疾病，炎症参与从脂质条纹到斑块破裂的全部过程［2］。MCP-1隶属于CC趋化家族，由76个氨基酸组成的碱性蛋白质，相对分子质量为9000～15 000，基因定位于17q11.2-12，包括3个外显子和2个内含子，主要功能是在发生炎症时趋化吸引血液中的单核
在敲除 CCR2 基因的小鼠 AS 模型中，动脉斑块体积明显缩小［11］。相反，在 ApoE 缺陷小鼠白细胞 MCP-1 过度表达，则加重粥样病变［12］。目前，人类 MCP-1 基因与血管相关性疾病研究大多来源于基因多态性研究，结论并不完全一致。Framingham 研究中心发现在 -2518 位点 GG 基因型血清 MCP-l 水平较高（P=0.002），且与 MI 的发病风险相关［13］。Szalai等［14］研究也认为 GG 基因型是冠心病发病的遗传危险因素。然而，在亚洲日本人群［15］ 和土耳其人群［16］中未见 MCP-1 基因型多态位点与血清 MCP-1 和 冠心病存在相关性。国内有学者对该基因位点与脑卒中的关系进行了研究，结果也存在不一致。陈施艳等［17］对湖南地区发生脑卒中的汉族人群进行该位点多态性检测，结果认为 MCP-1 基因 -2518G 基因型与脑梗死成正相关；然而，另外一个研究以北方汉族人群为研究对象，发现该基因位点与血清 MCP-1 水平存在相关性，但与脑梗死无关联［18］。
本研究共入选中国苏南地区汉族人群830例设为研究对象，其中ACS组484例（AMI 290例，UAP 194例），对照组346例。MCP-1基因A-2518G单核苷酸多态性在ACS组和对照组中均存在AA、AG和GG 3种基因型。与对照组相比，ACS组中AA（15.32% vs.16.12%）、AG（53.47% vs.51.86%）和GG（31.21% vs.32.02%）基因型和G等位基因频率（57.95% vs.57.95%）差异均无统计学意义（P值分别为0.083、0.673、0.821和1.000）。由于两组临床资料如性别、年龄、吸烟、糖尿病、TC和LDL等不相匹配，因此，对相关因素进行Logistic回归分析，结果显示，MCP-1基因A-2518G单核苷酸多态性与ACS的发病无相关性（表3）。
［7］ de Lemos JA, Morrow DA, Sabatine MS, et al. Association between plaa levels of monocyte chemoat-tractant protein-1 and long-term clinical outcomes in patients with acute coronary syndromes［J］. Circulation，2003, 107(5): 690-695.
［8］ 哈华兰, 张钲, 王恒大. 急性冠脉综合征患者外周血 MCP-1 水平变化的临床意义［J］. 中国心血管病研究杂志，2005, 3(6):427- 429.
［9］ Kitamoto S, Nakano K, Hirouchi Y, et al. Cholesterol-bwering independent regression and stabilization of atherosclerotic lesions by prastatin and by antimonocyte chemoattractant protein-1 therapy in nonhuman primates［J］. Arteriosclera Thromb Vasc Biol，2004, 24(8): 1522-1528.
［10］Kanno K, Tazuma S, Nishioka T, et al. Angiotensin Ⅱ participates in hepatic inflammation and fibrosis through MCP-1 expression［J］. Dig Dis Sci，2005, 50(5): 942- 948.
［11］ Gosling J, Slaymaker S, Gu L, et al. MCP-1 deficiency reduces susceptibility to atherosclerosis in mice that overexpress human apolipoprotein B［J］. J Clin Invest，1999, 103(6):773-778.
［12］ Aiello RJ, Bourassa PA, Lindsey S, et a1. Monocyte chemoatt-ractant protein-1 accelerates atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice［J］. Arterioscler Thromb Vasc Biol，1999, 19(6):1518-1525.
［13］ McDermott DH, Yang Q, Kathiresan S, et al. CCL2 poly-morphis are associated with serum monocyte chemoattractant protein-1 levels and myocardial infarction in the Framingham heart study［J］. Circulation，2005, 112(8):1113-1120.
［14］ Szalai C, Duba J, Prohaszka Z, et al. Involvement of poly-morphis in the chemo- kine system in the susceptibility for coronary artery disease (CAD). Coincidence of elevated Lp(a)and MCP-1 -2518G/G genotype in CAD patients［J］. Atherosclerosis，2001, 158(1):233-239.
［15］ Iwai N, Kajimoto K, Kokubo
［16］ Cermakova Z, Petrkova J, Arakelyan A ,et al. The MCP-1-2518 (A to G) single nucleotide polymorphi is not associated with myocardial infarction in the Czech population［J］. Int J Immunogenet，2005, 32(5):315-318.
［17］ 陈施艳, 杨期东, 杨晓苏, 等. MCP-1 基因 -2518G/A 多态性与脑梗死的相关性研究［J］. 中国神经疾病杂志，2006, 32(1)：77-78.
［18］ 代亚美, 关国英, 韩辉, 等. 脑梗死患者 MCP-1 基因启动子区 A-2518G 基因多态性的研究［J］. 中风与神经疾病杂志，2006, 23(2)：152-154.
［19］ Rovin BH, Lu L, Saxena R. A novel polymorphi in the MCP-1 gene regulatory region that influences MCP-1 expression［J］. Biochem Biophys Res Commun,1999, 25 (2):344-348.
（收稿日期：2012-04-02）
（本文编辑：郑辛甜）
【关键词】单核细胞趋化蛋白-1；单核苷酸多态性；急性冠脉综合征
Correlation between polymorphi of monocyte chemoatt-ractant protein-1 gene A-2518G single nucleotide and acute coronary syndrome SHI Gan-wei，HE Guo-ping，CAI Gao-jun，QI Chuan-ping，GAO Lei，QI Meng，SHENG Dan-dan，QIAN Zhi-hong，XU Lian-hong. Department of Cardiology, Affiliated Wujin Hospital of Jiangsu University, Changzhou 213002,China
Corresponding author：HE Guo-ping，Email: guopinghe6@sina.com
【Abstract】Objective To investigate the possible correlation between the monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) gene A-2518G single nucleotide polymorphi (SNPs) in the promoter region a
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nd acute coronary syndrome (ACS) in Chinese Han ethnic population of Sunan region.MethodsThis study was conducted with a case-control design in 484 ACS patients including 290 acute myocardial infarction (AMI) patients and 194 patients with unstable angina pectoris (UAP) and 346 control subjects ruled out coronary disease by coronary angiography (control group)，including 166 patients with coronary atherosclerosis and 180 subjects without coronary stenosis. Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphi (PCR-RFLP) was used for the detection of the A-2518G polymorphi in MCP-1 gene，and then the frequency of genetype was statistically analyzed. Results There were AA, AG and GG genotypes of MCP-1 gene A-2518G polymorphi in the ACS group and control group. The two groups could be considered as a genetic equilibrium representative by Hardy-Weinberg equilibrium (P>0.05). Compared with the control group, the frequencies of AA genotype (15.32% vs. 16.12%), AG genotype (53.47% vs. 51.86%), GG genotype (31.21% vs. 32.02%) and G allele genotype (57.95% vs. 57.95%) in ACS group were not significantly different (P was 0.083, 0.673, 0.821 and 1.00, respectively). Multivariate logistic regression analysis indicated that there was no significant correlation between MCP-1 gene A-2518G polymorphi and ACS regardless of differences in gender, age, oking, diabetes, TG and LDL-C (P>0.05). There was no significant difference in gender and age of ACS onset between two groups (P>0.05). There were no significant differences in the frequencies of AA, AG and GG genotypes and G allele genotype among AMI group, UAP group and normal coronary group (P>0.05). Conclusions The data shows that MCP-1 gene A-2518G polymorphi is not associated with the risk of ACS in the Chinese Han ethnic population living in Sunan region.摘自：论文查重站www.udooo.com
2.1.3 DNA 序列测定 抽取部分 PCR 产物经测序验证其基因型，其结果与酶切结果相符，见图3。2.2 一般资料分析
与对照组相比，ACS组年龄较大，男性、吸烟者和合并糖尿病者较多，血清TC和LDL水平明显增高，见表1。2.3 MCP-1 基因A-2518G多态性分析
2.3.1 ACS 组与对照组的基因型和等位基因频率分布 MCP-1 基因 A-2518G 单核苷酸多态性在 ACS组和对照组中均存在AA、AG 和 GG 基因型。ACS 组和对照组基因型分布经 χ2 检验均符合Hardy-Weinberg 平衡（P＞0.05），表明入选样本具有群体代表性（表2）。与对照组相比，ACS 组 AA、AG 和 GG 基因型和 G 等位基因频率差异均无统计学意义。由于 ACS 组和对照组的临床资料（性别、年龄、吸烟、糖尿病、TC 和 LDL血清水平）差异具有统计学意义，所以对两组 AA、AG 和 GG 基因型 G 等位基因频率进行多因素回归分析，但结果显示，MCP-1 基因 A-2518G 单核苷酸多态性与 ACS的发病无相关性（表3）。2.3.2 基因型和等位基因频率分布的亚组分析男性和女性 ACS 组分别与对照组相应性别相比，AA、AG 和 GG 基因型和 G 等位基因频率分布差异均无统计学意义（表4）。
AMI 组和 UAP 组分别与冠脉正常组相比，AA、AG 和 GG 基因型和 G 等位基因频率分布差异无统计学意义（表5）。
与年龄相匹配的对照组相比，早发 ACS （男性≤55岁、女性≤65岁）的 AA、AG 和 GG 基因型和 G等位基因频率分布差异无统计学意义，见表6。
3 讨论
动脉粥样硬化（AS）是一种与炎症相关性疾病，炎症参与从脂质条纹到斑块破裂的全部过程［2］。MCP-1隶属于CC趋化家族，由76个氨基酸组成的碱性蛋白质，相对分子质量为9000～15 000，基因定位于17q11.2-12，包括3个外显子和2个内含子，主要功能是在发生炎症时趋化吸引血液中的单核
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细胞与单核细胞表面的CCR2受体特异结合，使单核细胞经损伤内皮细胞间隙迁移入内皮下，演变为巨噬细胞。巨噬细胞通过清道夫受体不断吞噬氧化低密度脂蛋白（oxLDL），从而启动了炎症反应过程，最终形成脂纹和粥样斑块［3］。在体外试验发现MCP-1可诱导促炎因子IL-6和IL-1的表达［4］。MCP-1还参与了动脉粥样斑块的破裂过程。Yamamoto等［5］研究发现血清MCP-1水平和斑块内基质金属蛋白酶浓度成正相关，后者均可破坏斑块的纤维帽结构，引起斑块的不稳定，导致临床事件的发生，提示血清MCP-1水平与ACS的发生密切相关。Nelken等［6］检测颈内动脉斑块不同区域MCP-1 mRNA浓度，结果发现，在动脉血栓中浓度高达33%，脂核和纤维帽交界为24%且该区巨噬细胞含量最丰富，纤维帽内浓度仅为8%。该研究揭示了MCP-1浓度与巨噬细胞的代谢活动密切相关，是引起斑块不稳定的重要炎症因子。de Lemos等［7］对血清MCP-1水平与发生ACS的患者预后进行相关研究，结果发现血清MCP-1水平较高者，发生死亡、MI、脑卒中、心力衰竭和再发ACS风险明显增加。国内有研究认为血清MCP-1水平与ACS的发病相关，但与冠脉的病变程度无关［8］。近来有研究认为他汀类降胆固醇药物［9］ 和血管紧张素Ⅱ受体结抗剂［10］有益的作用，可能是通过阻断血清MCP-1和单核细胞CCR2结合，减轻血管炎症反应相关。在敲除 CCR2 基因的小鼠 AS 模型中，动脉斑块体积明显缩小［11］。相反，在 ApoE 缺陷小鼠白细胞 MCP-1 过度表达，则加重粥样病变［12］。目前，人类 MCP-1 基因与血管相关性疾病研究大多来源于基因多态性研究，结论并不完全一致。Framingham 研究中心发现在 -2518 位点 GG 基因型血清 MCP-l 水平较高（P=0.002），且与 MI 的发病风险相关［13］。Szalai等［14］研究也认为 GG 基因型是冠心病发病的遗传危险因素。然而，在亚洲日本人群［15］ 和土耳其人群［16］中未见 MCP-1 基因型多态位点与血清 MCP-1 和 冠心病存在相关性。国内有学者对该基因位点与脑卒中的关系进行了研究，结果也存在不一致。陈施艳等［17］对湖南地区发生脑卒中的汉族人群进行该位点多态性检测，结果认为 MCP-1 基因 -2518G 基因型与脑梗死成正相关；然而，另外一个研究以北方汉族人群为研究对象，发现该基因位点与血清 MCP-1 水平存在相关性，但与脑梗死无关联［18］。
本研究共入选中国苏南地区汉族人群830例设为研究对象，其中ACS组484例（AMI 290例，UAP 194例），对照组346例。MCP-1基因A-2518G单核苷酸多态性在ACS组和对照组中均存在AA、AG和GG 3种基因型。与对照组相比，ACS组中AA（15.32% vs.16.12%）、AG（53.47% vs.51.86%）和GG（31.21% vs.32.02%）基因型和G等位基因频率（57.95% vs.57.95%）差异均无统计学意义（P值分别为0.083、0.673、0.821和1.000）。由于两组临床资料如性别、年龄、吸烟、糖尿病、TC和LDL等不相匹配，因此，对相关因素进行Logistic回归分析，结果显示，MCP-1基因A-2518G单核苷酸多态性与ACS的发病无相关性（表3）。
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［6］ Nelken NA, Coughlin SR, Gordon D, et al. Monocyte chemoatt-ractant protein-1 in human atheromatous plaques［J］. J Clin Invest，1991, 88(4):1121-1127.［7］ de Lemos JA, Morrow DA, Sabatine MS, et al. Association between plaa levels of monocyte chemoat-tractant protein-1 and long-term clinical outcomes in patients with acute coronary syndromes［J］. Circulation，2003, 107(5): 690-695.
［8］ 哈华兰, 张钲, 王恒大. 急性冠脉综合征患者外周血 MCP-1 水平变化的临床意义［J］. 中国心血管病研究杂志，2005, 3(6):427- 429.
［9］ Kitamoto S, Nakano K, Hirouchi Y, et al. Cholesterol-bwering independent regression and stabilization of atherosclerotic lesions by prastatin and by antimonocyte chemoattractant protein-1 therapy in nonhuman primates［J］. Arteriosclera Thromb Vasc Biol，2004, 24(8): 1522-1528.
［10］Kanno K, Tazuma S, Nishioka T, et al. Angiotensin Ⅱ participates in hepatic inflammation and fibrosis through MCP-1 expression［J］. Dig Dis Sci，2005, 50(5): 942- 948.
［11］ Gosling J, Slaymaker S, Gu L, et al. MCP-1 deficiency reduces susceptibility to atherosclerosis in mice that overexpress human apolipoprotein B［J］. J Clin Invest，1999, 103(6):773-778.
［12］ Aiello RJ, Bourassa PA, Lindsey S, et a1. Monocyte chemoatt-ractant protein-1 accelerates atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice［J］. Arterioscler Thromb Vasc Biol，1999, 19(6):1518-1525.
［13］ McDermott DH, Yang Q, Kathiresan S, et al. CCL2 poly-morphis are associated with serum monocyte chemoattractant protein-1 levels and myocardial infarction in the Framingham heart study［J］. Circulation，2005, 112(8):1113-1120.
［14］ Szalai C, Duba J, Prohaszka Z, et al. Involvement of poly-morphis in the chemo- kine system in the susceptibility for coronary artery disease (CAD). Coincidence of elevated Lp(a)and MCP-1 -2518G/G genotype in CAD patients［J］. Atherosclerosis，2001, 158(1):233-239.
［15］ Iwai N, Kajimoto K, Kokubo
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Y, et a1. Assesent of genetic effects of polymorphis in the MCP-1 gene on serum MCP-1 levels and myocardial infarction in Japanese［J］. Circ J，2006, 70(7):805-809.［16］ Cermakova Z, Petrkova J, Arakelyan A ,et al. The MCP-1-2518 (A to G) single nucleotide polymorphi is not associated with myocardial infarction in the Czech population［J］. Int J Immunogenet，2005, 32(5):315-318.
［17］ 陈施艳, 杨期东, 杨晓苏, 等. MCP-1 基因 -2518G/A 多态性与脑梗死的相关性研究［J］. 中国神经疾病杂志，2006, 32(1)：77-78.
［18］ 代亚美, 关国英, 韩辉, 等. 脑梗死患者 MCP-1 基因启动子区 A-2518G 基因多态性的研究［J］. 中风与神经疾病杂志，2006, 23(2)：152-154.
［19］ Rovin BH, Lu L, Saxena R. A novel polymorphi in the MCP-1 gene regulatory region that influences MCP-1 expression［J］. Biochem Biophys Res Commun,1999, 25 (2):344-348.
（收稿日期：2012-04-02）
（本文编辑：郑辛甜）