试议北极北极礁膜（Monostromaarcticum）多糖提取分离、结构与抗凝血活性资料网-turnitin论文查重

摘要：北极礁膜（Monostroma arcticum）隶属于绿藻门，绿藻纲，礁膜科，礁膜属。其作为食用和药用藻类有着悠久的历史，多糖是其最重要的生物活性物质。本论文以北极礁膜为原料，提取分离其中的多糖成分，并对其理化性质、结构特点以及抗凝血活性进行探讨。探讨结果如下：藻体粉末依次经冷水、热水、稀碱液和浓碱液提取，得到四种粗多糖CN、HN、AN1和AN2，得率分别为8.65%、25.85%、0.55%和4.25%。采取化学、薄层层析、气相色谱以及高效液相色谱法，对四种多糖的理化性质和单糖组成进行浅析测定。结果表明，CN、HN、AN1和AN2的总糖含量分别为63.30%、64.30%、57.30%和55.17%；硫酸基含量为21.70%、28.60%、32.80%和30.40%；蛋白质含量为7.35%、6.30%、13.50%和2.85%；CN主要由鼠李糖、木糖和葡萄糖组成，三者比例相似；HN主要由鼠李糖组成，含有微量木糖和葡萄糖；AN1主要由葡萄糖组成，含有微量鼠李糖；AN2主要由鼠李糖组成，含有少量葡萄糖和半乳糖，以及微量木糖；四种粗多糖均含有微量葡萄糖醛酸。采取强阴离子交换色谱和凝胶排阻色谱对多糖HN进一步进行分离纯化，得到三个多糖组分HF0、HF3和HAF0。高效凝胶渗透色谱法浅析表明，HF0、HAF0和HF3纯度较高，重均分子量分别是940.85kDa、9.36kDa和73.96kDa，HF0分子量远大于HF3，HF0部分酸水解后主链部分HAF0分子量较小；PMP柱前衍生高效液相色谱法浅析表明，HF0、HF3和HAF0的单糖组成均以鼠李糖为主，含有少量的葡萄糖和木糖，糖醛酸的类型为葡萄糖醛酸；HAF0和HF3的红外光谱图显示，1256cm-1处有强的硫酸基特点吸收峰。采取脱硫酸基反应、化反应、红外光谱和核磁共振波谱等策略对HAF0结构进行进一步探讨。结果表明，HAF0的糖链主要含有→3)--L-Rhap(1→和→2)--L-Rhap(1→两种连接方式，硫酸基主要位于→3)--L-Rhap(1→的C-2位和→2)--L-Rhap(1→的C-3位。另外，少量硫酸基团位于→3)--L-Rhap(1→的C-4位。通过测定活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)，对多糖HAF0的抗凝血活性进行评价，以肝素作为阳性对照。结果表明HAF0能够有效延长APTT和TT值，而对PT值无影响，说明HAF0抗凝血作用主要是通过抑制内源性凝血途径或共同凝血途径来产生，不能够抑制外源性凝血途经。本论文的探讨成果对“海洋糖库”的建设提供了结构新颖的海洋多糖，对北极礁膜的探讨和开发利用具有重要参考价值。关键词：北极礁膜论文多糖论文分离论文结构论文抗凝血活性论文

摘要5-7

Abstract7-13

前言13-26

1 绿藻多糖的生物活性探讨13-18

1.1 抗凝血活性14-15

1.2 抗病毒活性15-16

1.3 抗氧化活性16

1.4 抗肿瘤活性16-17

1.5 免疫调节作用17

1.6 降血脂作用17-18

2 绿藻多糖的结构探讨18-20

2.1 木糖-阿拉伯糖-半乳糖聚合物19

2.2 葡萄糖醛酸-木糖-鼠李糖聚合物19-20

3 多糖的结构探讨20-23

3.1 多糖一级结构的探讨20-23

3.1.1 化学浅析法20-21

3.1.2 物理学策略21-23

3.1.3 生物学策略23

3.2 多糖高级结构的测定23

4 硫酸化多糖构效联系的探讨23-25

4.1 分子量与生物活性的联系24

4.2 硫酸基与生物活性的联系24

4.3 空间构象与生物活性的联系24-25

5 本探讨立题背景及探讨作用25-26

第一章北极礁膜多糖的提取及理化性质探讨26-44

1 实验材料与仪器26-27

1.1 实验原料26

1.2 实验试剂和色谱材料26-27

1.3 主要实验仪器27

2 实验策略27-32

2.1 北极礁膜多糖的提取27-29

2.2 多糖理化性质浅析29-31

2.2.1 总糖含量的测定29

2.2.2 蛋白质含量的测定29-30

2.2.3 硫酸基含量的测定30

2.2.4 糖醛酸含量的测定30-31

2.3 多糖单糖组成浅析31-32

2.3.1 薄层层析法31

2.3.2 气相色谱法31-32

2.3.3 高效液相色谱法32

3 实验结果与讨论32-42

3.1 北极礁膜多糖的提取32-33

3.2 多糖的理化性质浅析33-36

3.2.1 总糖含量的测定33-34

3.2.2 蛋白质含量的测定34-35

3.2.3 硫酸基含量的测定35-36

3.2.4 糖醛酸含量的测定36

3.3 单糖组成浅析36-42

3.3.1 TLC 浅析法37

3.3.2 气相色谱法37-40

3.3.3 高效液相色谱法40-42

4 本章小结42-44

第二章北极礁膜多糖 HN 的分离纯化及化学特点探讨44-57

1 材料与仪器44-45

1.1 实验材料44

1.2 实验试剂和色谱材料44

1.3 实验仪器44-45

2 实验策略45-47

2.1 北极礁膜多糖 HN 的分离纯化45-46

2.1.1 离子交换色谱分离45-46

2.1.2 凝胶渗透色谱分离46

2.2 理化性质浅析46

2.3 单糖组成浅析-Hplc 浅析法46

2.4 纯度浅析和分子量测定46-47

2.5 红外光谱浅析47

3 实验结果与讨论47-56

3.1 北极礁膜多糖的分离纯化47-49

3.1.1 离子交换色谱分离47-48

3.1.2 凝胶排阻色谱分离48-49

3.2 理化性质浅析49-50

3.3 单糖组成浅析-HPLC 法50-53

3.4 纯度浅析和分子量测定53-54

3.5 红外光谱浅析54-56

4 本章小结56-57

第三章北极礁膜多糖 HAF0 的结构探讨57-74

1 材料与仪器57-58

1.1 实验材料57

1.2 实验试剂及材料57

1.3 主要实验仪器57-58

2 实验策略58-60

2.1 脱硫酸基反应58

2.1.1 实验试剂处理58

2.1.2 多糖吡啶盐的制备58

2.1.3 脱硫酸基反应58

2.2 化反应58-59

2.2.1 试剂处理58-59

2.2.2 多糖的化反应59

2.2.3 GC-MS 浅析59

2.3 核磁共振波谱浅析59-60

3 实验结果与讨论60-73

3.1 脱硫酸基反应60-61

3.2 化浅析61-68

3.2.1 化程度的确定61-62

3.2.2 GC-MS 浅析62-68

3.3 核磁共振波谱浅析68-73

4 本章小结73-74

第四章北极礁膜多糖 HAF0 抗凝血活性的探讨74-78

1 材料与仪器74

1.1 实验材料74

1.2 实验试剂74

2 实验策略74-75

2.1 血浆的分离74

2.2 活化部分凝血活酶时间（APTT）检测策略74-75

2.3 凝血酶原时间（PT）检测策略75

2.4 凝血酶时间（TT）检测策略75

3 实验结果与讨论75-77

4 本章小结77-78

结语78-80

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