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摘要：第一部分：筛选与DAC联合效果最佳的药物和联合方式目的：筛选与DAC联合效果最佳的药物和联合方式策略：将IDA、DNR、ACLA、THAL以及HHT分别与DAC进行同时或序贯联合作用于U937细胞株,通过四唑盐比色试验(MTT)检测U937细胞的生长抑制情况,并采取Calcusyn软件计算其联合指数浅析其联合效应。进一步用基因芯片技术浅析与两药协同效应相关信号通路。结果：HHT、THAL、ACLA及DNR与DAC联合无协同抗AML作用,CI指数都大于0.8；而DAC与IDA序贯联合能协同抑制AML细胞的生长,CI联合指数小于0.8。结论：DAC与IDA进行序贯联合作用U937细胞株时协同效果最佳。第二部份：探讨DAC与IDA协同抗白血病作用的机制目的：探讨DAC与IDA协同抗白血病作用的机制策略：用DAC与IDA序贯联合作用HEL和SKM-1细胞株,再采取MTT法检测细胞生长抑制情况,同时用Calcusyn软件计算其联合指数浅析其联合效应；用流式细胞术测定DAC与IDA序贯联合作用U937、HEL、SKM-1细胞株前后细胞的凋亡情况；用化特异性PCR测定U937、HEL、SKM-1细胞株的Wnt信号通路相关抑制基因如DKK3、HDPR1、RP1化情况；用RT-PCR测定药物作用前后白血病细胞中Wnt信号通路抑制基因如DKK3、HDPR1、RP1和Wnt经典通路相关基因如β-catenin、C-MYC、CycpnD1的]mRNA表达变化情况；用Western Blot法测定药物作用前后细胞中Wnt信号通路抑制基因如DKK3.HDPR1.RP1和WNT经典通路相关基因如β-catenin、C-MYC、CycpnD1蛋白表达变化情况。结果：(1)DAC和IDA均能抑制急性髓系白血病细胞株SKM-1和HEL细胞的生长,序贯联合时抑制作用优于单药,体现出协同效应；(2)DAC和IDA序贯联合抑制U937、HEL和SKM-1细胞株生长是通过诱导细胞凋亡实现的,而序贯联合作用时凋亡率要优于单药；(3)U937、SKM-1和HEL细胞中Wnt抑制基因(DKK3, HDPR1, RP1)都有着不同程度的化；(4)DAC和IDA序贯联合可以使U937、SKM-1和HEL细胞中Wnt抑制基因(DKK3, HDPR1, RP1)的表达上调,并且序贯联合时作用优于单药；(5)DAC和IDA序贯联合可以使U937、SKM-1和HEL细胞中WNT信号通路相关蛋白(β-catenin, C-MYC, CycpnD1)的表达下调,并且序贯联合时作用优于单药。结论：DAC和IDA序贯联合能协同抑制急性髓系白血病细胞株U937、SKM-1和HEL的生长,其可能机制是通过协同抑制WNT信号通路而发挥抗白血病作用。关键词：地西他滨论文联合案例论文急性髓系白血病论文Wnt论文地西他滨论文去甲氧柔红霉素论文序贯联合论文WNT信号通路论文急性髓系白血病论文
致谢4-5
中文摘要5-7
ABSTRACT7-10
缩略词表10-11
目录11-12
前言12-15
第一部份：筛选与DAC联合效果最佳的药物和联合方式15-25
1.1 材料与策略15-19
1.2 实验结果19-25
第二部份：探讨DAC与最佳药物协同抗白血病作用的机制25-67
2.1 材料与策略25-38
2.2 结果38-56
2.3 讨论56-61
2.4 结论61-62
2.5 参考文献62-67
综述67-75