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摘要：目的：建立磨损颗粒诱导骨溶解小鼠植骨气囊模型，观察气囊局部注射血管内皮生长因子（VEGF）及VEGF抑制剂bevacizumab对磨损颗粒诱导的无菌性炎症及骨溶解的影响，进一步探讨VEGF在人工关节无菌性松动中的作用。策略：取8～10周龄雌性昆明小鼠50只，体重约25g。10只作为气囊植骨模型颅骨供体。剩余40只小鼠随机分为4组（n=10），分别为空白对照组（A组）、颗粒组（B组）、VEGF刺激组（C组）和VEGF抑制组（D组）。首先于小鼠背部皮射无菌空气3mL形成初始气囊，隔天在气囊内加注1ml无菌空气维持，第8d天切开气囊植入颅骨骨片，建立植骨气囊模型。于植骨后第一天B、C、D组小鼠气囊内注入0.5mL颗粒悬液，A组注入0.5mLPBS。气囊植骨前第6、7天及植骨后隔天，在C、D组小鼠气囊内分别注射0.2mL的rh-VEGF和bevacizumab溶液，A、B组注射0.2mL生理盐水。植骨2周后取囊壁连同骨片行HE染色、TRAP染色、qRT-PCR及ELISA检测。结果：各组小鼠均存活至实验完成。大体观察见A组气囊红肿轻，少见新生血管。B、C、D组气囊红肿较重，可见较多渗出及新生血管，其中C组最重，B组次之，D组介于A、B组之间。组织学及分子生物学检测发现，B组囊壁显著炎性反应及骨溶解，囊壁厚度、细胞密度及TNF-α、IL-1β、VEGF表达均较A组显著增加（P0.05）；C组囊壁炎性反应及骨溶解最显著，以上观察指标均高于B组（P0.05）；D组囊壁亦可见炎性反应及骨溶解，但以上指标均低于B组（P0.05），高于A组（P0.05）。结论：磨损颗粒在体内可以诱导VEGF表达，而VEGF在人工关节无菌性松动中起重要作用，VEGF抑制剂可抑制磨损颗粒诱导的无菌性炎症反应及骨溶解。关键词：血管内皮生长因子论文血管内皮生长因子抑制剂论文人工关节论文磨损颗粒论文骨溶解论文无菌性松动论文
摘要3-4
ABSTRACT4-9
第1章 前言9-10
第2章 材料与策略10-20
2.1 材料10-12
2.1.1 主要仪器10
2.1.2 主要试剂10-11
2.1.3 磨损颗粒制备11-12
2.1.4 实验动物12
2.2 策略12-19
2.2.1 主要药物配制12
2.2.2 植骨气囊模型的建立12-14
2.2.3 药物干扰及标本采集14
2.2.4 囊壁HE染色14-15
2.2.5 囊壁厚度及细胞密度计算15
2.2.6 囊壁TRAP染色15
2.2.7 qRT-PCR检测囊壁VEGF、IL-1β及TNF-α的mRNA表达量15-17
2.2.8 ELISA检测气囊中TNF-α、IL-1β蛋白含量17-18
2.2.9 统计学浅析18-19
技术路线图19-20
第3章 结果20-27
3.1 气囊大体观20
3.2 囊壁HE染色20-24
3.3 囊壁TRAP染色24-25
3.4 囊壁VEGF、IL-1β及TNF-α的mRNA表达量25-26
3.5 囊壁炎性细胞因子含量26-27
第4章 讨论27-34
4.1 磨损颗粒与人工关节无菌性松动28-29
4.2 磨损颗粒诱导骨溶解动物模型29-30
4.3 VEGF与人工关节无菌性松动30-32
4.4 VEGF抑制剂抑制磨损颗粒诱导炎症反应及骨溶解32-34
第5章 结论34-35
致谢35-36