Nkx2.5在妊娠糖尿病子鼠心脏发育中表达与作用前言

摘要：目的:通过药物诱导建立妊娠糖尿病大鼠模型，了解心肌转录因子Nkx2.5在妊娠糖尿病子鼠心肌组织的表达变化情况，以而推断Nkx2.5在妊娠糖尿病胎儿心脏发育异常中可能的作用机制。策略：选取80只SD雌性成年大鼠，随机分为实验组和对照组各40只，与雄性大鼠合笼，明确后，在实验组雌鼠的腹腔注射链脲佐菌素（STZ），在对照组雌鼠的腹腔注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，给药72小时后,每天采尾静脉血测血糖，两组分别于孕12、15、19天随机分组并剖腹，取子鼠心肌组织。HE染色后镜下观察心肌组织的病理转变，采取免疫组织化学策略检测Nkx2.5蛋白在子鼠心肌组织的表达情况。结果：1.实验组雌鼠给药三天后血糖值（15.00±0.76mmol/l vs4.00±0.62mmol/l，P＜0.01）显著升高,且持续至妊娠后期,同时出现糖尿病典型临床体现,同一时间点血糖值与对照组相比,差别有统计学作用（P＜0.01）。两组雌鼠体重随胎龄增加均呈上升走势,孕9天始,同一孕期实验组雌鼠体重相对对照组减轻（P＜0.01）。实验组雌鼠孕12天流产数较对照组显著增加（P0.05）。实验组子鼠体重较对照组显著减轻（P＜0.01）,且巨大胎、心脏发育异常及畸型胎数均较对照组显著增加（P＜0.01）。2.免疫组化浅析结果:对照组Nkx2.5心肌蛋白表达随胎龄的增加而呈上升历程，上升幅度不大。实验组Nkx2.5心肌蛋白表达亦随胎龄的增加而呈上升历程且孕12至15天Nkx2.5蛋白表达上升幅度较大。同一孕期实验组Nkx2.5蛋白表达较对照组显著减少,差别有统计学作用（P＜0.01）。结论：妊娠糖尿病雌鼠所生子鼠心脏发育异常数较对照组显著增高。Nkx2.5蛋白于孕12、15、19天在妊娠糖尿病子鼠心肌组织的表达较对照组显著减少。提示Nkx2.5可能参与了妊娠糖尿病致先天性心脏病的发病历程。关键词：Nkx2.5论文妊娠糖尿病论文心脏发育论文免疫组化论文

摘要3-4

ABSTRACT4-7

前言7-14

1.1 课题探讨背景及作用7-8

1.2 Nkx2.5 与心脏的形成及发育8-12

1.2.1 Nkx2.5 的结构特点9-10

1.2.2 Nkx2.5 与先天性心脏病10-12

1.2.3 Nkx2.5 与心肌肥厚12

1.2.4 Nkx2.5 与糖尿病的联系12

1.3 总结12-14

第二部分 实验探讨14-25

2.1 试验材料14-16

2.1.1 实验动物14

2.1.2 主要实验仪器14-15

2.1.3 主要实验试剂及配制15-16

2.2 试验策略16-20

2.2.1 SD 大鼠的准备和分组16

2.2.2 GDM 模型的建立16-17

2.2.3 标本的收集和处理17

2.2.4 光镜切片及 HE 染色17-18

2.2.5 免疫组化半定量检测子鼠心脏组织中 Nkx2.5 蛋白表达18-19

2.2.6 统计学处理19-20

2.3. 实验结果20-25

2.3.1 母鼠生长的一般情况20-21

2.3.2 子鼠发育的一般情况21-22

2.3.3 母鼠与子鼠外形观察22-23

2.3.4 镜下观察的心脏组织结构（HE 染色）23

2.3.5 NKX2.5 蛋白在子鼠心肌组织的表达23-25

第三部分 讨论25-29

第四部分 结论29-30

附图30-32