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【摘要】 目的：初步观察雄黄对MRL/lpr狼疮小鼠SLE动物模型抗双链DNA抗体及T细胞表面分子CD69、CD25表达及其生存时间的影响。方法：将MRL/lpr狼疮小鼠随机分为空白（蒸馏水）对照组、纳米雄黄低中高剂量组，每天灌胃一次，分别在不同时间点采集血清和称重；在实验结束后，取外周淋巴结分离T细胞并体外培养；放射免疫法测定血清抗ds-DNA抗体效价，流式细胞仪检测T细胞表面活化分子CD69、CD25表达水平；并计算各个观察点的小鼠死亡率。结果：雄黄治疗各组MRL/lpr小鼠生存时间比对照组明显延长，差异有统计学意义（P<0.05）；雄黄低、中、高各组血清抗ds-DNA抗体总平均值显著低于对照组，其中高剂量与低剂量比较，差异也有统计学意义（P<0.05）。雄黄各剂量组T细胞表面的CD69和CD25表达水平较空白对照组有明显的降低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：雄黄可能通过抑制MRL/lpr小鼠T细胞表面的CD69和CD25表达以减少T细胞的活化，从而减少抗ds-DNA抗体的分泌，减轻小鼠自身免疫反应损伤，延缓SLE疾病发展进程。
【关键词】 雄黄； SLE； MRL/lpr小鼠； 抗ds-DNA抗体； T细胞； CD69； CD25
Effect of Realgar on Anti-dsDNA Antibody and the Expression the Expression of CD69，C
【Abstract】 Objective：To investigate the effects of Realgar on anti ds-DNA antibody and the expression of CD69，CD25 on MRL/lpr mouse T cell.Method：MRL/lprmice were divided into four groups：control group，Low dose realgar group，Medium dose realgar group，and High dose realgar group separation the peripheral lymph node during treatment，all mice were respectively collected serum and weighing in each time.In the end，T cells were cultured in vitro，which were separated from the peripheral lymph node in MRL/lpr mouse.Anti dsDNA antibody in serum were detected by radioimmunoassay，flow cytometry were used to detect the express of CD69 and CD25 by activated T cells in vitro in response to Concanalin（Con A）.Result：The serum level of anti ds-DNA antibody in realgar groups were much lower than those in control group of MRL/lpr mice（P<0.05）；Realgar treatment group MRL/LPR mice survival time was significantly longer than the control group（P<0.05）；Realgar caused a dose-dependent suppression of CD69 and CD25 expression were significantly less than blank control group（P<0.05）.Conclusion：Realgar can reduce T cell activation maybe by inhibiting expression of CD25and CD69 on T cell surface in MRL/lrp mouse，thus reducing anti ds-DNA antibody secretion，and reduce mouse damage by autoimmunnical response，delay SLE development process.
【Key words】 Realgar； Systemic Lupus erythematosus； MRL/lrp mouse ； Anti-dsDNA Antibody； T Lymphocyte； CD69； CD25
First-author’s address：The Affiliated Hospital of JiangXi TCM College，Nanchang 330006，China；Institue of Basic Research in Clinical Medicine，China Academy of Chinese Medical Sciences
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.3
1.1 实验材料 天然雄黄纳米颗粒，购自上海延真纳米材料科技发展有限公司，用双蒸水配成混悬液，低中高剂量组浓度分别为：0.01 mg/ml，0.02 mg/ml，0.03 mg/ml。ConA，美国Sigma-Aldrich公司。anti-mouse-CD3、anti-mouse-CD69和anti-mouse-CD25单克隆荧光抗体，美国Santa-cruz公司。RPMI1640完全培养液、胎牛血清等培养品，英国Gibico公司。GC-1200C放射免疫计数器，购自北方生物技术研究所。MRL/lpr狼疮小鼠，4周龄，雌性，购自上海实验动物中心。流式细胞仪，美国BeckmanCoulter公司。
1.2.2 小鼠生存时间和体重的观察 两组分别于实验开始后第0、1
1.2.4 淋巴细胞悬液的制备 实验结束后，将各组MRL/lpr小鼠断髓处死，无菌分离小鼠的双侧颌下、腋窝、浅腹股沟及肠系膜淋巴结，200目筛网过滤，收集细胞，用冷PBS洗涤细胞两次（250×g，5 min）后，细胞重悬于RPMI1640完全培养液中，调整细胞密度为2×109·L-1，0.2%台盼蓝染色判断活细胞百分率达97%。
1.2.5 淋巴细胞培养 将密度为2×109·L-1淋巴细胞悬液接种在24孔细胞培养板上，每孔1 ml，然后分别加入多克隆刺激剂ConA （终浓度5 μg/ml），在37 ℃、5% CO2培养箱培养48 h。
1.2.6 T细胞表面活化分子CD69、CD25的检测 采用直接免疫荧光标记法染色，取出各孔细胞悬液离心浓缩后加入anti-mouse-CD3-PE、anti-mouse-CD69-FITC或anti-mouse-CD25-FITC 1μg/106细胞，混匀后，4 ℃避光作用30 min，PBS洗涤细胞两次（250×g，5 min），以4%多聚甲醛固定，24 h内进行流式细胞仪检测。
1.2.7 流式细胞仪检测及分析 全部数据经Beckman Coulter流式细胞仪和Protocol软件获取，每管样品检测10 000个细胞，获得的数据用Protocol软件分析。
1.3 统计学处理 用SPSS 13.0统计软件进行数据处理，根据资料特征，两样本均数的比较采用t检验或秩和检验，多组间比较采用Oneway-ANOVA，两组间比较用非配对Students t-test，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
组别存活小鼠数
实验90 d实验180 d
对照组（n=25）17（68） 9（36）
低剂量组（n=25）18（72） 12（48）*
中剂量组（n=25）19（76） 14（56）*
高剂量组（n=25）20（80） 17（68）*△
*与对照组同期比较，P<0.05；△与低剂量组比较，P<0.05
从表1可以看出，实验90 d时，雄黄低、中、高剂量组分别存活18、19、20只（72%、76%、80%）和对照组17只（68%），但各实验组和对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）；至180 d时，雄黄低、中、高剂量组分别存活12、14、17只（48%、56%、68%），对照组存活9只（36%），差异有统计学意义（P<0.05）。实验组两两组间比较，只有高剂量组与低剂量组比较差异有统计学意义（P<0.05）。
组别CD3+CD69+CD3+CD25+
对照组（n=25）98.52±0.398
从表3可以明显看出，经多克隆刺激剂PDB和ConA刺激48 h后，对照组CD69和CD25表达明显增加。而雄黄高中低各剂量组MRL/lpr小鼠T细胞表面的CD69和CD25表达并没有明显增加，实验各组和对照组比较差异均有统计学意义（P<0.05），说明雄黄对它们的表达有抑制作用。3 讨论
系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，
MRL/lpr小鼠是SLE模型之一，由于存在凋亡基因的缺陷导致自身反应性淋巴细胞凋亡异常，产生自身抗体。与人类SLE相似，该小鼠均产生针对包括抗ds-DNA抗体在内的高水平IgG型自身抗体，且可能在SLE活动时通过循环和原位免疫复合物在肾小球沉积而介导肾炎[8]。因此，控制这些抗体的分泌成为治疗SLE的重要靶点之一。
目前，抗ds-DNA抗体是SLE活动性的重要指标[9]。本实验结果显示，MRL/lpr小鼠经雄黄低中高三个剂量组治疗3个月后，血清抗ds-DNA抗体比治疗前和对照组明显下降。通过统计分析其具体数据，笔者发现，雄黄治疗90 d时，高、中剂量两治疗组已经低于对照组，但低剂量组差异不显著，据此可推测，90 d时高、中剂量两组的雄黄已开始起效。180 d时，高中低剂量治疗组的抗ds-DNA抗体水平都进一步下降，且与对照组之间差异均有统计学意义，因此，笔者可以认为，一般剂量的雄黄至少要经过三个月以上的治疗，才能抑制MRL/lpr小鼠血清中抗ds-DNA抗体的表达。另外，实验各组治疗前后小鼠体重稳定，可推测雄黄对其食欲、能量代谢并无明显影响。据此可认为，雄黄能抑制MRL/lpr小鼠自身免疫反应，从而缓解SLE病情和延长其生存时间。
现有的研究已经明确，T细胞针对自身抗原的反应是由于对这些自身抗原结构的免疫耐受的破坏。凋亡细胞的清除障碍、感染微生物的持续存在及某些药物都可以导致免疫耐受的破坏。致病性自身抗原达到一定浓度，以及调节性和杀伤性T细胞的功能缺陷等遗传因素和感染、药物等环境因素的共同作用，可导致机体对自身抗原的耐受丧失，出现自身抗原特异性T细胞，并辅助B细胞产生自身抗体。随着抗原表位扩展，B细胞产生大量的IgG致病性自身抗体，引起LN的发病和SLE的其他症状[10]。CD69是目前已知的T细胞活化后表达最早的一个表面分子，在多克隆刺激剂作用下迅速表达，发生从2%～98%的大幅度变化[11]。而CD25是白细胞介素2受体（IL-2R）α链，是T细胞中期活化抗原，静止T细胞表达很少，活化后则大量诱导表达，与IL-2Rβ、IL-2Rγ链共同构成高亲和力的IL-2R，以供IL-2结合并选择性支持经抗原刺激而活化的T细胞进行扩增[12]。笔者用ConA来刺激T淋巴细胞表达CD69、CD25。实验结果表明，雄黄各浓度组对经ConA刺激48 h后T淋巴细胞CD2
总之，根据本实验的结果可以认为，雄黄能抑制MRL/lpr小鼠T细胞表面的CD69和CD25表达，降低血清抗ds-DNA，缓解自身免疫，延缓疾病进程，延长生存时间。本研究为中药雄黄治疗系统性红斑狼疮提供了可靠的实验依据。下一步还需通过实验研究雄黄通过干预哪条何种细胞信号转导通路途径而抑制CD69和CD25的表达，以便更加全面地了解该药的具体治疗机制。
参考文献
唐永，李先荣，程霞，等.雄黄药理作用的实验研究及其毒性观察[J].时珍国医国药，1998，9（4）：322-323.
白月辉，黄世林.雄黄对NB及HL-60的促凋亡作用[J].中华血液学杂志，1998，19（9）：477-480.
[3] 张晨，黄世林，向阳，等.低剂量雄黄诱导细胞细胞凋亡的研究[J].中国中医基础医学杂志，2000，6（2）81-82.
[4] 成静，祝寿芬.对小鼠免疫系统的影响[J].中国地方病学杂志，2000，19（1）：16-19.
[5] 朱小春，金晓冬，黄朝兴，等.对BXSB自发狼疮鼠血清自身抗体与肾小球免疫球蛋白沉着的影响[J].中华内科杂志，2001，40（11）：764-765.
[6] 朱小春，吕吟秋，黄朝兴，等.亚砷酸对BXSB狼疮鼠狼疮性肾炎的治疗作用[J].中国中西医结合肾病杂志，2004，5（1）：7-10.
[7] 叶冬青.红斑狼疮[M].北京：人民卫生出版社，2006.
[8]彭庆双，陈学荣，李世荫.红斑狼疮动物模型的自身免疫[J].国际皮肤性病学杂志，1989，15（4）：207-211.
[9] Bengtsson A，Nezlin R，Shoenfeld Y，et al.DNA levels in circulating immune complexes decrease at severe SLE disease activity correlation with complement component C1q[J].Autoimmun，1999，13（1）：111-119.
[10] Pisetsky D S.The immune response to cell death in SLE[J].Autoimmun Rev，2004，3（7-8）：500-504.
[11] Testi R，Ambrosio D D，Maria R D，et al.The CD69 receptor： a multipurpose cell-surface trigger for hematopoietic cells[J].Immunol Today，1994，15（10）：479-483.
[12] Gonzalez-Garcia A，Merida I，Martinez A C，et al.Intermediate affinity interleukin-2 receptor ediates survival via a phosphatidylinositol 3-kinase-dependent pathway[J].J Biol Chem，1997，272（15）：10220-10226.
（收稿日期：2012-08-20） （本文编辑：连胜利）
【关键词】 雄黄； SLE； MRL/lpr小鼠； 抗ds-DNA抗体； T细胞； CD69； CD25
Effect of Realgar on Anti-dsDNA Antibody and the Expression the Expression of CD69，C
摘自：毕业论文格式设置www.udooo.com
D25 on MRL/lpr Mouse T Cell/XU Wei-dong，FAN Yong-sheng，GU Huan-peng，et al.//Medical Innovation of China，2012，9（31）：001-003【Abstract】 Objective：To investigate the effects of Realgar on anti ds-DNA antibody and the expression of CD69，CD25 on MRL/lpr mouse T cell.Method：MRL/lprmice were divided into four groups：control group，Low dose realgar group，Medium dose realgar group，and High dose realgar group separation the peripheral lymph node during treatment，all mice were respectively collected serum and weighing in each time.In the end，T cells were cultured in vitro，which were separated from the peripheral lymph node in MRL/lpr mouse.Anti dsDNA antibody in serum were detected by radioimmunoassay，flow cytometry were used to detect the express of CD69 and CD25 by activated T cells in vitro in response to Concanalin（Con A）.Result：The serum level of anti ds-DNA antibody in realgar groups were much lower than those in control group of MRL/lpr mice（P<0.05）；Realgar treatment group MRL/LPR mice survival time was significantly longer than the control group（P<0.05）；Realgar caused a dose-dependent suppression of CD69 and CD25 expression were significantly less than blank control group（P<0.05）.Conclusion：Realgar can reduce T cell activation maybe by inhibiting expression of CD25and CD69 on T cell surface in MRL/lrp mouse，thus reducing anti ds-DNA antibody secretion，and reduce mouse damage by autoimmunnical response，delay SLE development process.
【Key words】 Realgar； Systemic Lupus erythematosus； MRL/lrp mouse ； Anti-dsDNA Antibody； T Lymphocyte； CD69； CD25
First-author’s address：The Affiliated Hospital of JiangXi TCM College，Nanchang 330006，China；Institue of Basic Research in Clinical Medicine，China Academy of Chinese Medical Sciences
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.3
1.001
雄黄为硫化物类矿物雄黄的矿石，又名黄金石。《神农本草经》记载：“黄金石，辛温，主寒热，鼠瘘，恶疮，疽痔，死肌，杀白虫毒。”《金匮要略》记载含有雄黄的升麻鳖甲汤用于治疗阴阳毒，而阴阳毒与系统性红斑狼疮（SLE）的症状很相似。中医临床上主要用于祛风除湿，解毒杀虫。雄黄既可入丸散作为复方使用，也可单独应用。近年来，雄黄及其复方应用于白血病治疗，取得肯定的临床疗效，其基础研究也获得了可喜的成绩，展示了广阔的应用前景，使人们重新认识雄黄。新近的研究表明，雄黄能增强内皮系统的吞噬功能，诱导肿瘤细胞凋亡[1-3]；成静等[4]报道对小鼠免疫功能有抑制作用；朱小春等[5-6]报道雄黄的主要成分之一剂可以减轻MRL/lpr狼疮小鼠的临床症状，提示雄黄也可能具有治疗SLE的作用。然而国内外对雄黄的安全性和免疫调节作用机制研究很少。本实验初步观察了雄黄对SLE动物模型抗双链DNA抗体及T细胞表面活化分子CD69、CD25表达及其生存时间的影响，旨在探讨中药雄黄治疗狼疮的价值，并研究其具体的分子作用机制，现报告如下。1 材料与方法1.1 实验材料 天然雄黄纳米颗粒，购自上海延真纳米材料科技发展有限公司，用双蒸水配成混悬液，低中高剂量组浓度分别为：0.01 mg/ml，0.02 mg/ml，0.03 mg/ml。ConA，美国Sigma-Aldrich公司。anti-mouse-CD3、anti-mouse-CD69和anti-mouse-CD25单克隆荧光抗体，美国Santa-cruz公司。RPMI1640完全培养液、胎牛血清等培养品，英国Gibico公司。GC-1200C放射免疫计数器，购自北方生物技术研究所。MRL/lpr狼疮小鼠，4周龄，雌性，购自上海实验动物中心。流式细胞仪，美国BeckmanCoulter公司。
1.2 实验方法
1.2.1 实验动物及分组 选择实验模型小鼠100只，随机将其分为空白对照组，纳米雄黄低、中、高剂量组，每组各25只。空白对照用蒸馏水0.2 ml，纳米雄黄各组均用0.2 ml混悬液，每天灌胃一次。所有动物均饲养在同一动物房，自由饮食活动。1.2.2 小鼠生存时间和体重的观察 两组分别于实验开始后第0、1
5、30、460、790天取血检测血清指标，生存时间观察至第180天。
1.2.3 血清的采集和抗双链DNA（ds-DNA）抗体测定 所有小鼠均于实验设计点采取尾血标本并称体重，血清分离后于-70℃保存待测抗ds-DNA抗体。采用GC-1200C放射免疫计数器测定抗dsDNA抗体的效价，严格按照试剂说明书进行操作。1.2.4 淋巴细胞悬液的制备 实验结束后，将各组MRL/lpr小鼠断髓处死，无菌分离小鼠的双侧颌下、腋窝、浅腹股沟及肠系膜淋巴结，200目筛网过滤，收集细胞，用冷PBS洗涤细胞两次（250×g，5 min）后，细胞重悬于RPMI1640完全培养液中，调整细胞密度为2×109·L-1，0.2%台盼蓝染色判断活细胞百分率达97%。
1.2.5 淋巴细胞培养 将密度为2×109·L-1淋巴细胞悬液接种在24孔细胞培养板上，每孔1 ml，然后分别加入多克隆刺激剂ConA （终浓度5 μg/ml），在37 ℃、5% CO2培养箱培养48 h。
1.2.6 T细胞表面活化分子CD69、CD25的检测 采用直接免疫荧光标记法染色，取出各孔细胞悬液离心浓缩后加入anti-mouse-CD3-PE、anti-mouse-CD69-FITC或anti-mouse-CD25-FITC 1μg/106细胞，混匀后，4 ℃避光作用30 min，PBS洗涤细胞两次（250×g，5 min），以4%多聚甲醛固定，24 h内进行流式细胞仪检测。
1.2.7 流式细胞仪检测及分析 全部数据经Beckman Coulter流式细胞仪和Protocol软件获取，每管样品检测10 000个细胞，获得的数据用Protocol软件分析。
1.3 统计学处理 用SPSS 13.0统计软件进行数据处理，根据资料特征，两样本均数的比较采用t检验或秩和检验，多组间比较采用Oneway-ANOVA，两组间比较用非配对Students t-test，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 雄黄对各组MRL/lpr狼疮小鼠生存时间的影响见表1。
表1 雄黄对各组MRL/lpr狼疮小鼠生存时间的影响只（%）组别存活小鼠数
实验90 d实验180 d
对照组（n=25）17（68） 9（36）
低剂量组（n=25）18（72） 12（48）*
中剂量组（n=25）19（76） 14（56）*
高剂量组（n=25）20（80） 17（68）*△
*与对照组同期比较，P<0.05；△与低剂量组比较，P<0.05
从表1可以看出，实验90 d时，雄黄低、中、高剂量组分别存活18、19、20只（72%、76%、80%）和对照组17只（68%），但各实验组和对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）；至180 d时，雄黄低、中、高剂量组分别存活12、14、17只（48%、56%、68%），对照组存活9只（36%），差异有统计学意义（P<0.05）。实验组两两组间比较，只有高剂量组与低剂量组比较差异有统计学意义（P<0.05）。
2.2 各组实验前后MRL/lpr小鼠血清抗ds-DNA效价和体重比较见表2。
由表2可见，到第90天，纳米雄黄低、中、高剂量各组抗ds-DNA抗体已较对照组低，其中中、高剂量组与空白对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；到第180天，治疗各组的抗ds-DNA下降得更多，实验各组与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）；其中高剂量与低剂量比较，差异也有统计学意义（P<0.05）。各组治疗前后体重均无明显变化。2.3 雄黄对MRL/lpr小鼠T细胞表达CD69和CD25的影响见表3。
表3 雄黄对MRL/lpr小鼠T细胞表达CD69和CD25的影响（x±s）组别CD3+CD69+CD3+CD25+
对照组（n=25）98.52±0.398
7.61±0.
源于：论文格式字体要求www.udooo.com
42 低剂量组（n=25）68.32±0.32*66.60±0.31*
中剂量组（n=25）57.65±0.76*49.03±0.46*
高剂量组（n=25）46.27±0.32*31.76±0.36*
*与对照组比较，P<0.05从表3可以明显看出，经多克隆刺激剂PDB和ConA刺激48 h后，对照组CD69和CD25表达明显增加。而雄黄高中低各剂量组MRL/lpr小鼠T细胞表面的CD69和CD25表达并没有明显增加，实验各组和对照组比较差异均有统计学意义（P<0.05），说明雄黄对它们的表达有抑制作用。3 讨论
系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，
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SLE）是一种典型的自身免疫性疾病，其临床特征是产生大量自身抗体和多系统、器官受累。世界范围内SLE的发病率约为50/10万，我国约为70/10万，高于日本等其他东亚国家[7]。该病女性发病率较男性高，比例约为9：1，且多见于育龄期妇女。SLE的病因和发病机制至今尚未完全阐明，一般认为是多因素性的，涉及遗传因素（如染色体畸变、基因突变、染色体数目异常等）、环境因素（如紫外线，化学因素、饮食因素、感染因素和过敏原等）等。他们错综复杂的交互作用可引起机体免疫功能的紊乱，产生多种免疫异常，如自身反应性T、B淋巴细胞的过度激活、细胞因子分泌异常和细胞凋亡紊乱等，导致大量致病性自身抗体和免疫复合物的产生，沉积于组织器官而引发相应的病理损害。MRL/lpr小鼠是SLE模型之一，由于存在凋亡基因的缺陷导致自身反应性淋巴细胞凋亡异常，产生自身抗体。与人类SLE相似，该小鼠均产生针对包括抗ds-DNA抗体在内的高水平IgG型自身抗体，且可能在SLE活动时通过循环和原位免疫复合物在肾小球沉积而介导肾炎[8]。因此，控制这些抗体的分泌成为治疗SLE的重要靶点之一。
目前，抗ds-DNA抗体是SLE活动性的重要指标[9]。本实验结果显示，MRL/lpr小鼠经雄黄低中高三个剂量组治疗3个月后，血清抗ds-DNA抗体比治疗前和对照组明显下降。通过统计分析其具体数据，笔者发现，雄黄治疗90 d时，高、中剂量两治疗组已经低于对照组，但低剂量组差异不显著，据此可推测，90 d时高、中剂量两组的雄黄已开始起效。180 d时，高中低剂量治疗组的抗ds-DNA抗体水平都进一步下降，且与对照组之间差异均有统计学意义，因此，笔者可以认为，一般剂量的雄黄至少要经过三个月以上的治疗，才能抑制MRL/lpr小鼠血清中抗ds-DNA抗体的表达。另外，实验各组治疗前后小鼠体重稳定，可推测雄黄对其食欲、能量代谢并无明显影响。据此可认为，雄黄能抑制MRL/lpr小鼠自身免疫反应，从而缓解SLE病情和延长其生存时间。
现有的研究已经明确，T细胞针对自身抗原的反应是由于对这些自身抗原结构的免疫耐受的破坏。凋亡细胞的清除障碍、感染微生物的持续存在及某些药物都可以导致免疫耐受的破坏。致病性自身抗原达到一定浓度，以及调节性和杀伤性T细胞的功能缺陷等遗传因素和感染、药物等环境因素的共同作用，可导致机体对自身抗原的耐受丧失，出现自身抗原特异性T细胞，并辅助B细胞产生自身抗体。随着抗原表位扩展，B细胞产生大量的IgG致病性自身抗体，引起LN的发病和SLE的其他症状[10]。CD69是目前已知的T细胞活化后表达最早的一个表面分子，在多克隆刺激剂作用下迅速表达，发生从2%～98%的大幅度变化[11]。而CD25是白细胞介素2受体（IL-2R）α链，是T细胞中期活化抗原，静止T细胞表达很少，活化后则大量诱导表达，与IL-2Rβ、IL-2Rγ链共同构成高亲和力的IL-2R，以供IL-2结合并选择性支持经抗原刺激而活化的T细胞进行扩增[12]。笔者用ConA来刺激T淋巴细胞表达CD69、CD25。实验结果表明，雄黄各浓度组对经ConA刺激48 h后T淋巴细胞CD2
5、CD69的表达均有明显抑制作用，其差异有统计学意义（P<0.05）。
本研究结果还表明，180 d时雄黄治疗各组MRL/lpr小鼠生存时间比对照组明显延长，差异有统计学意义（P<0.05），提示雄黄对MRL/lpr小鼠确实可能有治疗作用，但其作用机制是多方面，有待更深入的研究。总之，根据本实验的结果可以认为，雄黄能抑制MRL/lpr小鼠T细胞表面的CD69和CD25表达，降低血清抗ds-DNA，缓解自身免疫，延缓疾病进程，延长生存时间。本研究为中药雄黄治疗系统性红斑狼疮提供了可靠的实验依据。下一步还需通过实验研究雄黄通过干预哪条何种细胞信号转导通路途径而抑制CD69和CD25的表达，以便更加全面地了解该药的具体治疗机制。
参考文献
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（收稿日期：2012-08-20） （本文编辑：连胜利）