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分析中国2009~2010年H_6亚型AIV生物学特性查抄袭率怎么

收藏本文 2024-02-09 点赞:32985 浏览:148334 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:为了解近年我国H6亚型禽流感病毒的生物学特性,本探讨对2009~2010年禽流感流行病学检测期间分离到的18株H6亚型禽流感病毒进行全基因组序列测定、进化浅析、同源性比对、抗原性浅析、基因组浅析,并选取其中8株病毒进行SPF鸡以及BALB/c小鼠的致病性试验。基因组浅析发现:18株病毒的所有基因序列均包含完整的ORF,HA氨基酸序列裂解位点无连续多个碱性氨基酸插入,具有低致病性流感病毒的典型特点,NA基因没有发生颈部缺失;遗传进化浅析结果显示:病毒的基因来源复杂,某些毒株与其他国家或地区的H5、H7等高致病性禽流感毒株同源性较高,少数几株病毒甚至与H1、H2、H3、H4、H13、H15等多个亚型的内部基因处于同一分支,并且与人、猪流感病毒基因的核苷酸同源性也相对较高;抗原性浅析结果发现:其抗原性大致分为7个抗原群,各亚群之间抗原性差别显著。8株病毒对动物的致病性实验结果显示:5株病毒能使感染SPF鸡群的血清转阳,其中1株在鸡气管和肺脏有较高的病毒滴度;8株病毒其中7株都能在感染BALB/c小鼠的肺脏中有效复制,且病毒株DK/HN/393/09、GS/GD/256/09及DK/HN/315/10还能在小鼠的鼻甲内复制,但是感染小鼠14d内的体重变化情况并不显著。本探讨可以得出以下结论:我国近年H6亚型流感病毒与其他多个亚型流感病毒之间普遍有着基因重排现象;部分H6亚型禽流感病毒逐渐跨越种间障碍,获得由水禽到陆禽的感染能力,并且能够感染哺乳动物模型-BALB/c小鼠。关键词:H6亚型禽流感病毒论文进化浅析论文抗原浅析论文致病性论文

    摘要2-3

    Summary3-4

    缩略语表4-7

    第一章 禽流感及其病原探讨进展7-16

    1 AIV与人类历史上的流感大流行7-9

    1.1 西班牙流感7-8

    1.2 洲流感8

    1.3 1968年香港流感8

    1.4 俄国流感8-9

    2 我国HPAIV的流行近况9-10

    2.1 广东1996年禽流感9

    2.2 香港97年流感事件9

    2.3 2005年青海湖候鸟流感事件9-10

    3 LPAIV的流行近况10-11

    4 流感病毒的基因和编码蛋白11-16

    4.1 血凝素(Hemagglutinin,HA)11-13

    4.2 神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)13

    4.3 内部基因13-16

    4.3.1 聚合酶蛋白(Ploymerase)13-14

    4.3.2 核蛋白(Nucleoprotein,NP)14-15

    4.3.3 基质蛋白(Matrix Protein,M)15

    4.3.4 非结构蛋白(Nonstructural Protein,NS)15-16

    第二章 2009~2010年H6型禽流感病毒进化浅析16-36

    1 材料与策略16-20

    1.1 材料16-17

    1.1.1 病毒分离株及实验动物16

    1.1.2 主要试剂与仪器16-17

    1.2 策略17-20

    1.2.1 病毒分离及纯化17

    1.2.2 病毒核酸的提取17

    1.2.3 cDNA合成17-18

    1.2.4 聚合酶链式反应(PCR)18

    1.2.5 PCR产物鉴定及回收纯化18-19

    1.2.6 目的片段的克隆19

    1.2.7 全基因的序列测定19-20

    1.2.8 序列拼接与浅析20

    2 结果与浅析20-33

    2.1 PCR及序列测定结果20

    2.2 HA基因的遗传进化浅析20-24

    2.2.1 HA基因组浅析20-21

    2.2.2 HA基因的同源性浅析21-24

    2.3 NA基因的遗传进化浅析24-27

    2.3.1 NA基因组浅析24

    2.3.2 NA基因同源性浅析24-27

    2.4 内部基因的遗传进化浅析27-33

    2.4.1 PB2基因27-28

    2.4.2 PB1基因28

    2.4.3 PA基因28

    2.4.4 NP基因28-29

    2.4.5 M基因29

    2.4.6 NS基因29-33

    3 讨论33-36

    第三章 H6型禽流感病毒的抗原性浅析36-40

    1 材料与策略36

    1.1 材料36

    1.1.1 病毒分离株36

    1.1.2 试剂及实验室耗材36

    1.2 策略36

    1.2.1 病毒特异性血清的制备36

    1.2.2 交叉血凝抑制(HI)试验36

    1.2.3 抗原差别性浅析36

    2 结果36-39

    2.1 交叉HA-HI试验结果36-37

    2.2 r值结果37-39

    3 讨论39-40

    第四章 H6亚型禽流感病毒的致病性试验40-46

    1 材料与策略40-41

    1.1 材料40

    1.1.1 病毒40

    1.1.2 试验动物40

    1.2 策略40-41

    1.2.1 鸡胚半数感染量(EID50)的测定40

    1.2.2 SPF鸡感染实验40

    1.2.3 BALB/c小鼠感染实验40-41

    2 结果41-43

    2.1 病毒EID50测定结果41

    2.2 病毒对SPF鸡感染实验的结果41-43

    2.3 病毒对BALB/c小鼠感染实验的结果43

    2.3.1 组织脏器的病毒分离滴定43

    2.3.2 小鼠体重变化情况43

    3 讨论43-46

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