受体脑室注射M871和M1145对糖尿病鼠骨骼肌Glut4膜转位影响

摘要：目的：探讨甘丙肽受体2(GALR2)与骨骼肌细胞葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的数量和膜转位之间的联系；利用GALR2的激动剂M1145和拮抗剂M871探讨GALR2与糖尿病代谢紊乱及胰岛素敏感性之间是否有着内在的联系；探查甘丙肽、GLUT4和糖尿病之间的联系；思索未来利用甘丙肽几种亚型受体的激动剂和拮抗剂治疗糖尿病的可能性。策略：选用健康9-10周Wistar大鼠,选取体重高于250g大鼠为实验对象,腹腔多次注射小剂量链脲佐菌素(STZ)35+15+10mg/kg,建立糖尿病模型。随机将模型鼠分三组：糖尿病对照组侧脑室注射脑脊液5uL/d；糖尿病用药组注射甘丙肽受体2特异性拮抗剂M871,5uL/d;糖尿病用药组注射甘丙肽受体2特异性激动剂M1145；另设健康对照组,也侧脑室注射脑脊液5uL/d。每组大鼠各8只,均连续注射15天。用快速血糖仪测空腹血糖；正糖钳法了解胰岛素敏感性；ELASA试剂盒测空腹血清Isupn浓度、Glanin浓度；Wistar大鼠骨骼肌细胞中Glut4含量和转位情况用Western Blot法检测；大鼠骨骼肌细胞内外膜Glut4含量用免疫组化法检测；并且用RT-PCR检测骨骼肌中Glut4mRNA的含有量。结果：糖尿病组大鼠较健康组大鼠,血清甘丙肽(Galanin)浓度下降,血清(Insupn)浓度升高,胰岛素的敏感性(Insupn sensitivity)下降,大鼠骨骼肌细胞中的Glut4mRNA表达量减少,Glut4膜转位数量也减少。糖尿病M1145用药组(C组)较糖尿病对照组(B组),血清Galanin浓度升高,大鼠骨骼肌细胞的Glut4mRNA表达量和Glut4蛋白表达总量分别上升,胰岛素Insupn分泌量不变,葡萄糖输注速率都有显著增加,说明敏感性增加,并且GLUT4转位数量增加,体重和血糖都有下降。糖尿病M871用药组(D组)较糖尿病对照组,血清Galanin浓度升高,骨骼肌细胞的GlutmRNA表达量和Glut4蛋白表达总量都有所下降,胰岛素分泌量增加,但葡萄糖输注速率都显著降低,说明敏感性降低,Glut4膜转位数量减少,血糖也降低。结论：GAL一方面抑制胰岛素分泌而升高血糖,另一方面在一定条件下可骨骼肌对葡萄糖的转运而降低血糖。本试验中通过糖尿病用药组和糖尿病对照组的比较,糖尿病大鼠注射GALR2受体激动剂M1145,胰岛素的敏感性升高,血糖降低；糖尿病大鼠注射GALR2受体拮抗剂M871,胰岛素的敏感性降低,血糖升高。所以GAL增加葡萄糖转运能力的作用与GALR2有关,或者说GALR2参与了其中的调节作用。综上所述,GALR2通过介导调节各因子达到调节代谢紊乱的作用,可以减轻胰岛素抵抗,增加胰岛素敏感性,增加脂肪细胞GLUT4的膜转位,最终起到一定的降血糖的效果。对糖尿病大鼠注射M1145增加了GALR2受体降血糖的作用,而对糖尿病大鼠注射GALR2阻断剂M871起到了相反的效果。糖尿病的治疗一直是医学界的难题,本实验中通过给糖尿病大鼠注射GALR2激动剂M1145和GALR2拮抗剂M871,初步证明GALR2具有推动大鼠骨骼肌细胞GLUT4膜转位的功能,能对糖尿病大鼠起到降血糖和增加胰岛素敏感性的作用。由此,有理由提出在糖尿病的临床治疗中,GALR2激动剂为糖尿病新药的开发有积极的探讨作用。关键词：糖尿病论文甘丙肽论文甘丙肽受体2论文M1145论文M871论文葡萄糖转运蛋白4论文胰岛素论文

摘要2-4

Abstract4-9

缩语表9-11

第一部分 文献综述11-41

1 糖尿病11-13

1.1 糖尿病患病近况和走势11-12

1.2 糖尿病病因12

1.3 糖尿病分型12

1.4 糖尿病发病机制12-13

2. 甘丙肽13-17

2.1 甘丙肽家族13-14

2.2 甘丙肽在体内的分布和生理功能14

2.2.1 GAL在中枢神经系统内的分布14

2.2.2 GAL在周围神经系统内的分布14

2.2.3 甘丙肽的生理功能14

2.3 甘丙肽受体14-17

2.3.1 GalR115

2.3.2GalR215-16

2.3.3 GalR316-17

2.4 甘丙肽受体激动剂和拮抗剂17

3 葡萄糖转运蛋白(GLUT4)17-20

3.1 GLUT4的结构和分布17-19

3.2 GLUT4的功能19

3.3 GLUT4转位与内在活性19-20

4 胰岛素20-27

4.1 胰岛素的组成和结构20-21

4.2 胰岛素的分泌及影响因素21-22

4.3 胰岛素的作用22-23

4.3.1 胰岛素的药理作用22

4.3.2 胰岛素的生理作用22-23

4.4 体内与胰岛素相关的激素23-24

4.5 胰岛素受体(insupn receptor,IR)24

4.6 胰岛素受体底物(insupn receptor substrate,IRS)24-26

4.6.1 IRS-125

4.6.2 IRS-225

4.6.3 IRS-3及IRS-425-26

4.7 胰岛素的信号转导通路26-27

4.7.1 磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)途径26

4.7.2 CAP/Cbl/Tc10途径26-27

4.7.3 Ras MAPK途径27

5 胰岛素与糖尿病27

6 甘丙肽和糖尿病27-28

7 GLUT4和糖尿病28-29

8 其他一些与糖尿病发病相关的因子29-34

8.1 瘦素29-30

8.1.1 瘦素的分子结构29

8.1.2 瘦素与糖尿病的联系29-30

8.2 脂联素30-31

8.2.1 脂联素的化学分子结构30

8.2.2 脂联素受体及信号转导30

8.2.3 脂联素的生理功能30-31

8.3 抵抗素31-32

8.3.1 抵抗素的分子结构31

8.3.2 抵抗素与糖尿病31-32

8.4 内脏脂肪素32-34

8.4.1 内脏脂肪素的分子结构32

8.4.2 内脏脂肪素的生物作用32-34