本站原创摘要2-4
ABSTRACT4-9
第1章 文献综述9-19
1 抗肿瘤药物的进展与分类9-11
1.1 抗肿瘤药物进展史9-11
1.2 抗肿瘤药物的分类11
1.2.1 矿物药物11
1.2.2 动物药物11
1.2.3 植物药物11
1.2.4 微生物药物11
2 抗肿瘤药物的筛选模型11-13
2.1 体内筛选模型12
2.2 体外筛选模型12-13
2.3 基于作用机理的筛选模型13
3 共附生微生物资源的特点及其活性物质13-17
3.1 海洋共附生微生物14-15
3.1.1 海洋微生物的特点及其多样性14-15
3.1.2 海绵共附生微生物的特点15
3.2 植物内生菌15-17
3.2.1 植物内生菌的特点及其多样性15-16
3.2.2 植物内生菌的活性产物探讨进展16-17
4 本探讨目的、作用及内容17-19
第2章 共附生微生物抗肿瘤活性菌的筛选与鉴定19-30
1 试验材料19-20
1.1 菌株来源19
1.2 活性筛选材料19
1.3 主要试剂19
1.4 培养基19
1.5 主要仪器19-20
2 试验策略20-24
2.1 菌株活化20
2.1.1 海绵共生细菌的活化20
2.1.2 植物内生真菌的活化20
2.2发酵培养20
2.2.1 海绵共生细菌的发酵20
2.2.2 植物内生真菌的发酵20
2.3 测试样品制备20-21
2.4 肿瘤细胞培养21
2.4.1 细胞复苏21
2.4.2 细胞传代和冻存21
2.5 抗肿瘤活性菌株筛选21-22
2.5.1 SRB法21-22
2.5.2 MTT法22
2.5.3 染料排斥法22
2.6 抗肿瘤活性菌株鉴定22-24
2.6.1 形态特点观察22
2.6.2 扫描电镜观察22
2.6.3 rDNA ITS序列浅析22-24
3 试验结果24-28
3.1 抗肿瘤活性菌株筛选24-26
3.1.1 三种策略初筛结果24
3.1.2 复筛结果24-26
3.2 抗肿瘤活性菌株鉴定26-28
3.2.1 形态特点观察26
3.2.2 扫描电镜观察26-27
3.2.3 rDNA ITS序列浅析27-28
4 小结28-30
4.1 抗肿瘤活性菌株筛选28-29
4.2 抗肿瘤活性菌株鉴定29-30
第3章 YX-5发酵条件优化及活性产物稳定性探讨30-42
1 试验材料30
1.1 供试菌株30
1.2 指示肿瘤细胞30
1.3 细胞培养基30
1.4 发酵培养基30
1.5 主要仪器30
2 试验策略30-32
2.1 真菌发酵条件优化31
2.1.1 发酵培养基31
2.1.2 发酵时间31
2.1.3 发酵温度31
2.1.4 发酵培养基pH31
2.1.5 摇床转速31
2.2 活性物质稳定性探讨31-32
2.2.1 热稳定性32
2.2.2 酸碱稳定性32
2.2.3 UV稳定性32
2.2.4 抗蛋白酶稳定性32
3 试验结果32-40
3.1 真菌发酵条件优化32-37
3.1.1 发酵培养基32-33
3.1.2 发酵时间33-34
3.1.3 发酵温度34-35
3.1.4 发酵培养基pH35-36
3.1.5 摇床转速36-37
3.2 活性物质稳定性探讨37-39
3.2.1 热稳定性37-38
3.2.2 酸碱稳定性38-39
3.2.3 UV稳定性39
3.2.4 抗蛋白酶稳定性39-40
4 小结40-42
4.1 真菌的发酵条件40-41
4.2 活性产物稳定性41-42
第4章 YX-5抗肿瘤活性产物的分离和鉴定42-52
1 试验材料42
1.1 供试菌株42
1.2 指示肿瘤细胞42
1.3 发酵培养基42
1.4 细胞培养基42
1.5 主要仪器42
2 试验策略42-44
2.1 YX-5规模发酵42-43
2.2 发酵产物提取43
2.3 发酵产物分离43-44
2.3.1 粗提物初分离43
2.3.2 活性产物柱层析分离43-44
2.4 活性产物鉴定44
2.4.1 GC-MS浅析44
2.4.2 核磁共振浅析44
3 试验结果44-51
3.1 发酵产物提取44-45
3.2 发酵产物分离45-50
3.2.1 粗提物初分离45
3.2.2 活性物质柱层析分离45-50
3.3 活性产物鉴定50-51
3.3.1 GC-MS浅析50
3.3.2 核磁共振浅析50-51
4 小结51-52
第5章 讨论与总结52-56
1 讨论与总结52-55
1.1 抗肿瘤活性菌株筛选52
1.2 菌株鉴定及其活性产物52-55
2 展望55-56