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[摘要] 目的 评价注射D-半乳糖（D-galactose）的致衰老效应。 方法 30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型1组和模型2组，每组各10只。模型1组每天皮射D-半乳糖50 mg/kg；模型2组每天腹腔注射D-半乳糖500 mg/kg；对照组每天颈部皮射等量（50 mg/kg）生理盐水。各组大鼠均连续给药6周。观察各组体重增加比例、胸腺指数、脾指数、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量。 结果 与对照组比较，模型1组和模型2组体重增加比例降低，胸腺明显萎缩，胸腺指数降低（P < 0.01）；胸腺组织出现明显病理变化；血清中SOD活性明显下降（P < 0.01），MDA含量明显升高（P < 0.01）。 结论 皮射和腹腔注射D-半乳糖诱导的衰老效应基本相似。
[关键词] D-半乳糖；大鼠；衰老模型
[] A [文章编号] 1673-7210（2013）03（c）-0025-03
我国正快速进入老龄化社会，据第六次全国人口普查显示，我国60岁及以上人口已达1.78亿，占总人口的13.26%。预计到21世纪中叶，我国60岁以上老年人将达到4.8亿，占总人口的34%。随着老龄人口的增加，各种老年疾病也随之而来，如何延缓衰老已成为世界各国学者研究的热点。因此，研究衰老机制、建立衰老动物模型显得尤为重要。近年来，我国老年学研究中广泛将拟自然衰老动物模型应用于衰老机制、衰老过程和抗衰老的研究上，取得了许多研究成果，促进了老年生物学和老年医学的发展。目前用于衰老研究的动物模型有D-半乳糖衰老模型、自然衰老模型、臭氧损伤衰老模型和去胸腺衰老模型等。在衰老研究上以自然衰老动物模型最为理想，但由于饲养周期长、昂贵、动物来源不统一、个体间差异大，从而影响实验结果的准确性。虽然D-半乳糖在衰老研究方面应用广泛，但是具体机制还有待进一步证实[3-4]。本实验对皮射和腹腔注
SPF级雄性Wistar大鼠30只，体重250～300 g，购自军事医学科学院实验动物中心，合格证为SCXK-（军）2007-001。动物饲养在屏障系统内，许可证为SYXK-（军）2007-008。动物适应性饲养1周后，开始正式实验。
2 结果
[关键词] D-半乳糖；大鼠；衰老模型
[] A [文章编号] 1673-7210（2013）03（c）-0025-03
我国正快速进入老龄化社会，据第六次全国人口普查显示，我国60岁及以上人口已达1.78亿，占总人口的13.26%。预计到21世纪中叶，我国60岁以上老年人将达到4.8亿，占总人口的34%。随着老龄人口的增加，各种老年疾病也随之而来，如何延缓衰老已成为世界各国学者研究的热点。因此，研究衰老机制、建立衰老动物模型显得尤为重要。近年来，我国老年学研究中广泛将拟自然衰老动物模型应用于衰老机制、衰老过程和抗衰老的研究上，取得了许多研究成果，促进了老年生物学和老年医学的发展。目前用于衰老研究的动物模型有D-半乳糖衰老模型、自然衰老模型、臭氧损伤衰老模型和去胸腺衰老模型等。在衰老研究上以自然衰老动物模型最为理想，但由于饲养周期长、昂贵、动物来源不统一、个体间差异大，从而影响实验结果的准确性。虽然D-半乳糖在衰老研究方面应用广泛，但是具体机制还有待进一步证实[3-4]。本实验对皮射和腹腔注
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射D-半乳糖在动物体内导致的自由基代谢、免疫指标及病理变化进行比较，观察其拟衰老效应。1 材料与方法
1.1 实验动物SPF级雄性Wistar大鼠30只，体重250～300 g，购自军事医学科学院实验动物中心，合格证为SCXK-（军）2007-001。动物饲养在屏障系统内，许可证为SYXK-（军）2007-008。动物适应性饲养1周后，开始正式实验。
1.2 仪器及试剂
紫外/可见分光光度计，美国Beckman公司；高速冷冻离心机，上海安亭科学仪器厂；电子天平，上海电子天平仪器厂。D-半乳糖购自上海第一制药厂；氯化钠注射液购自北京双鹤药业股份有限公司；D-半乳糖与氯化钠注射液配成5% D-半乳糖-氯化钠注射液，使用前配制，常规灭菌后使用；超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）试剂盒购自南京建成生物工程研究所；甲醛溶液购自北京市旭东化工厂。1.3 实验动物分组
30只大鼠随机分成对照组、模型1组和模型2组，每组各10只。参照王亚利等[5]、崔美芝等[6]方法进行D-半乳糖衰老模型的建立。模型1组每天颈部皮射D-半乳糖50 mg/（kg·d）；模型2组每天腹腔注射D-半乳糖500 mg/（kg·d）；对照组每天颈部皮射等量（50 mg/kg）生理盐水。各组大鼠均每天上午给药，连续给药6周。1.4 体重、胸腺指数和脾指数测定
每周称重1次。动物处死后迅速取出胸腺及脾，吸去血液，修去脂肪、系膜。用电子天平称取胸腺、脾湿重，根据体重计算胸腺指数、脾指数。1.5 胸腺和脾病理组织变化
胸腺和脾分别称取湿重后，置于10%中性固定液中固定，行常规脱水，石蜡包埋，组织切片，苏木精-伊红（HE）染色，在光镜下进行组织形态学观察。1.6 血常规、SOD活性和MDA含量测定
动物处死前眼球采血，测定血常规；分离血清，采用化学比色法测定SOD活性和MDA含量，方法按试剂盒说明书要求进行。1.7 统计学方法
采用SPSS 10.0软件进行统计分析，数据用均数±标准差（x±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。以P < 0.05为差异有统计学意义，以P < 0.01为差异有高度统计学意义。2 结果
2.1 D-半乳糖对大鼠体重、胸腺指数和脾指数的影响
如表1所示，与对照组比较，模型1组和模型2组大鼠体重增加比例降低，胸腺明显萎缩，胸腺指数明显减少（P < 0.01），而脾指数增高，但差异无统计学意义（P > 0.05）；模型1组和模型2组间各指标差异无统计学意义（P> 0.05）。2.2 D-半乳糖对胸腺和脾病理组织形态的影响
病理组织观察显示，对照组胸腺淋巴细胞结构清晰，细胞密集，染色较深；脾细胞结构正常。模型1组胸腺皮质明显变薄、萎缩，细胞排列稀疏，间隙增大，髓质缩小；脾白髓缩小，细胞减少，红髓扩大并充血。模型2组胸腺和脾病理变化同模型1组。说明衰老模型大鼠的胸腺萎缩，脾轻度病理改变。2.3 D-半乳糖对血常规的影响
如表2所示，D-半乳糖对血常规无明显影响，三组血常规各指标差异无统计学意义（P > 0.05）。2.4 D-半乳糖对血清SOD活性和MDA含量的影响
如表3所示，与对照组比较，模型1组和模型2组血清SOD活性显著下降（P < 0.01），说明自由基代谢出现异常；血清MDA含量显著升高（P < 0.01），说明D-半乳糖促进机体过氧化产物形成，使动物产生拟衰老效应。源于：论文写法www.udooo.com