关节炎基于透皮技术雷公藤多苷微乳制剂

摘要：雷公藤为(Tripteryglum. wilfordii. Hook, f)为卫矛科植物雷公藤的根,味苦、辛,性寒。近年来根据各学者探讨和临床运用,其主要药理作用有抗炎、抗菌、免疫抑制、活血化瘀、抗癌等。其在抗关节炎及免疫抑制上均具有良好的疗效,有着十分广泛的临床运用。但临床探讨结果表明,雷公藤的毒副作用发生率为58.1%。由此,非常有必要开发一种非口服给药途径的雷公藤制剂,降低雷公藤的毒副作用,满足临床用药需要,提升患者的顺以性,创造更大的市场价值。本论文通过透皮制剂即经过皮肤给药而起到全身治疗作用的控释制剂。该系统具有超越口服给药策略的独特优点,不需要进入胃肠道,避开了药物对胃黏膜的刺激,血药浓度平稳,没有显著的峰谷作用,降低了对消化系统的毒副作用。雷公藤提取物中有效成分雷公藤内酯甲、雷公藤甲素都具有良好的透皮行为探讨基础。同时,微乳作为透皮给药载体有着增加药物的溶解度、提升药物的透皮能力等优点。由此,微乳透皮给药系统(microemulsion transdermal drug depvery system, METDDS)是一种非常优良的透皮给药系统。所以本课题拟建立雷公藤多苷的微乳透皮制剂,以期得到更好的药效和更低的毒性。在结合雷公藤多苷在各组分中的溶解度数据之后,通过以累积透皮量及4小时炎症抑制率为评价指标,采取星点设计-效应面法,确定了雷公藤多苷微乳制剂的优化处方。优化处方中油相油酸比例为0.12、表面活性剂(Labrasol)和助表面活性剂(Transcutol P和Pharmasolve)的比例为0.59,水相比例为0.29。这时微乳累积透皮量为35.87mg/ml,4小时炎症抑制率为61.56%。随后,我们对优化处方进行了验证,发现利用星点设计-效应面法能够快捷便利地得到雷公藤多苷微乳透皮制剂的优化处方,且所建立的模型具有良好的预测性。药效学探讨通过弗氏完全佐剂法建立大鼠类风湿性关节炎动物模型,分别连续给予30、60、120mg/kg雷公藤多苷微乳及雷公藤多苷原料药24天,给药历程中观察大鼠的一般状态,每周监测大鼠体重及摄食量,各组动物自造模起,于0,4,8,12,18,24,28,36和42天测量其足体积,计算肿胀度,末次给药后对大鼠进行血生化指标检测、系统尸检、血清前列腺素含量、睾丸中芳香化酶活性、睾丸电镜检查、CASA浅析以及组织病理学检查,以全面评价雷公藤多苷透皮微乳的药效及毒性。结果显示,雷公藤多苷透皮微乳较雷公藤多苷原料药抗炎活性增强,主要体现为对大鼠足肿胀和血清中前列腺素的抑制作用增强,病理切片发现其对踝关节及滑膜损伤有一定的保护作用；肝脏毒性有所减轻,对雷公藤多苷引起的生殖毒性的保护作用十分显著,睾丸和附睾病理损伤小,与正常对照组无显著差别。本课题考察了透皮微乳喷雾定量给药装置的密闭性、每喷剂量、以及中国药典中关于喷雾剂的其他规定,结果显示所选用的喷雾定量给药装置各项测试均符合要求。同时,参考中国药典、部颁标准进行雷公藤多苷透皮微乳喷雾剂的质量评价,进行了影响因素试验、加速试验和长期试验,考察了喷雾剂的稳定性。以喷雾剂外观、pH、薄层色谱和LC-MS-MS法等方面评价喷雾剂的质量,并根据结果建立了质量标准草案。影响因素试验结果表明喷雾剂在高温、高湿和强光照条件下均不稳定,提示喷雾剂应该在阴凉、干燥、避光的环境中存放。加速试验和长期试验表明,喷雾剂在40℃±2℃和RH75%±5%的条件下以及25℃±2℃和RH40%±10%下放置3个月后仍较稳定。加速试验6个月以及长期试验6、9、12、18、24和36月在进行中。以以上结果可以初步推测本课题所研制的雷公藤多苷透皮微乳喷雾剂较好地达到了课题设计的预期目标,增加了药物的药效,并降低了药物的毒性,同时提供了一个较平缓的给药浓度,质量可控,稳定性试验结果也初步证明了喷雾剂具有良好的稳定性。关键词：雷公藤论文透皮微乳喷雾剂论文药效学论文类风湿关节炎模型论文质量评价论文稳定性论文

摘要8-10

Abstract10-13

前言13-17

第一章 雷公藤多苷微乳透皮制剂的制备17-41

第一节 雷公藤多苷透皮微乳制剂的处方前探讨17-22

1 仪器和材料17-18

1.1 仪器17

1.2 药品与试剂17-18

2 实验策略18-19

2.1 LC-MS法浅析雷公藤多苷原料药18

2.1.1 色谱条件18

2.1.2 质谱检测方式与主要参数18

2.2 雷公藤内酯甲的Hplc浅析策略的建立18-19

2.2.1 色谱条件18

2.2.2 雷公藤多苷样品处理18

2.2.3 标准曲线的制备18-19

2.2.4 策略专属性19

2.3 雷公藤多苷在油、表面活性剂、助表面活性剂中平衡溶解度的考察19

3 实验结果19-22

3.1 LC-MS法浅析雷公藤多苷原料药19-20

3.2 雷公藤内酯甲的Hplc浅析策略的建立20-21

3.3 雷公藤多苷在油、表面活性剂、助表面活性剂中平衡溶解度21-22

第二节 雷公藤多苷透皮微乳制剂的处方探讨22-41

1 仪器和材料22-23

1.1 仪器22-23

1.2 药品与试剂23

2 实验策略23-25

2.1 伪三元相图的制备23

2.2 不同油、表面活性剂和助表面活性剂的配伍选择23

2.3 离体皮肤的制备23

2.4 体外透皮实验23-24

2.5 角叉菜胶致炎模型实验24

2.6 实验设计24

2.7 模型拟合24

2.8 雷公藤多苷微乳的表征24-25

3 实验结果25-38

3.1 不同油、表面活性剂和助表面活性剂的配伍选择25-34

3.1.1 油相的选择25-27

3.1.2 表明活性剂对微乳形成的影响27-29

3.1.3 助表面活性剂对微乳形成的影响29-31

3.1.4 表面活性剂与助表面活性剂Km对微乳形成的影响31-34

3.2 星点设计-效应面优化法实验34-37

3.3 雷公藤多苷微乳的表征37-38

4 讨论38-39

5 本章小结39-40

53

3.6 电镜下睾丸细胞形态53-54

3.7 睾丸中芳香化酶测定54-55

3.8 雷公藤多苷透皮微乳对精子数量及精子活力的影响55-56

3.9 细胞免疫实验56

4 讨论56-57

5 本章小结57

论81

5 本章小结81-82