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论过氧化氢四角蛤蜊CAT、GPX抗氧化酶基因克隆查抄袭率

收藏本文 2024-04-06 点赞:12828 浏览:48891 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:贝类养殖是我国传统海水养殖业中的重要组成部分。贝类通常利用滩涂进行养殖,而滩涂是海洋环境中受人类活动影响最为严重的区域。我国滩涂面积广阔,随着滩涂生态与环境情况的恶化,以及病害的不断爆发,滩涂贝类的养殖面对重大的威胁。贝类受到各种压力胁迫刺激时,往往导致机体活性氧自由基的产生。依靠活性氧分子极强的反应特性,实现对入侵病原的杀灭。但是这种机制不具特异性,因而也会破坏生物体自身的生物膜、蛋白分子及核酸等,诱导细胞凋亡,对机体造成严重的伤害。机体的抗氧化防御系统能够及时清除活性氧,维持机体内氧环境平衡,保护机体免受氧化损伤。其中,过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)是抗氧化防御系统的关键酶类。四角蛤蜊作为一种典型的埋栖型滩涂贝类,广泛分布在我国、韩国和日本沿海,是我国主要的经济贝类之一,也是开展滩涂增养殖的优质品种。其埋栖生活的特性,对沉积物污染有较好的指示作用。本探讨采取同源克隆的策略,对四角蛤蜊过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)基因进行克隆,首次得到过氧化氢酶(CAT)基因cDN段,共780bp,编码211个氨基酸。具有在大多数物种中较为保守的CAT基因的特点性序列结构,查找到一个CAT基因催化活性位点Asn145,以及9个NADPH的结合位点。通过系统进化树的构建,表明四角蛤蜊CAT基因与硬壳蛤及文蛤的亲缘联系较近。关键词:四角蛤蜊论文过氧化氢酶论文谷胱甘肽过氧化物酶论文基因克隆论文

    摘要3-4

    Abstract4-9

    1 引言9-27

    1.1 贝类的免疫防御机制9-14

    1.1.1 贝类的体液防御机制10-12

    1.1.2 贝类的细胞防御机制12-14

    1.2 活性氧14-18

    1.2.1 活性氧定义14

    1.2.2 活性氧的生成14-16

    1.2.3 活性氧对机体的影响16-17

    1.2.4 活性氧的清除17-18

    1.3 抗氧化系统及其主要抗氧化酶18-25

    1.3.1 抗氧化系统18

    1.3.2 过氧化氢酶(CAT)18-20

    1.3.3 谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)20-22

    1.3.4 超氧化物歧化酶(SOD)22-25

    1.4 四角蛤蜊的生物学特点及其探讨近况25-27

    1.4.1 四角蛤蜊的生物学地位、生态分布及形态特点25

    1.4.2 四角蛤蜊的生活习性及食性25

    1.4.3 四角蛤蜊的价值25-26

    1.4.4 四角蛤蜊的探讨近况26-27

    2 实验材料及策略27-34

    2.1 实验材料27-29

    2.1.1 实验前期处理27

    2.1.2 实验动物27

    2.1.3 实验所用引物27-28

    2.1.4 主要化学试剂和仪器设备28-29

    2.2 实验策略29-34

    2.2.1 四角蛤蜊组织总 RNA 提取29

    2.2.2 四角蛤蜊 CAT 基因 cDNA 片段克隆29-32

    2.2.3 四角蛤蜊 GPX 基因 cDNA 片段克隆32-33

    2.2.4 CAT、GPX 基因 cDNA 片段的生物信息学浅析33-34

    3 结果与讨论34-40

    3.1 四角蛤蜊组织总 RNA 提取34

    3.2 四角蛤蜊 CAT 基因 PCR 扩增产物34-35

    3.3 四角蛤蜊 CAT 基因 cDNA 片段及推导氨基酸序列浅析35-36

    3.4 四角蛤蜊 CAT 基因推导氨基酸序列同源性浅析36-39

    3.5 四角蛤蜊 CAT 基因推导氨基酸序列进化性浅析39-40

    3.6 四角蛤蜊 GPX 基因 cDNA 片段浅析40

    4 结论40-41

    5 运用与展望41-42

    致谢42-43

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