您的位置: turnitin查重官网> 医药学 >> 生物药物 >试谈右旋糖酐右旋糖酐酶和右旋糖酐蔗酶共固定化和右旋糖酐发酵生产中酶解新工艺

试谈右旋糖酐右旋糖酐酶和右旋糖酐蔗酶共固定化和右旋糖酐发酵生产中酶解新工艺

收藏本文 2024-04-04 点赞:12785 浏览:41436 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:右旋糖酐酶(Dextranase, E.C.3.2.1.11)能够水解右旋糖酐中的α-1,6糖苷键,并释放出异麦芽糖、异麦芽三糖等。本论文利用右旋糖酐蔗糖酶催化蔗糖合成右旋糖酐以及右旋糖酐酶对右旋糖酐的水解作用,首先将右旋糖酐酶与右旋糖酐蔗糖酶进行共固定化探讨,并对固定化双酶催化合成右旋糖酐及其分子量制约进行初步探讨;另外,论文还对基于右旋糖酐酶酶解法替代现有工业中酸解法生产右旋糖酐的新工艺进行了探讨。1.首先以交联法、吸附法、胶囊法、吸附-胶囊法、吸附-包埋法对右旋糖酐酶与右旋糖酐蔗糖酶的固定化进行了初步探讨,结果显示树脂吸附-海藻酸钙胶囊法效果最好,所得的固定化酶活力稳定,重复利用6次以后酶活回收率仍在50%以上。最终选定该策略对右旋糖酐酶与右旋糖酐蔗糖酶进行固定化。2.其次对影响树脂吸附-海藻酸钙胶囊法的固定化条件进行了优化。结果表明,优化后的最佳工艺参数为:LX-1000NHF型树脂与两种酶混合液的比例是1:6(w/v),吸附时间为12h,吸附后的酶与6%高分子右旋糖酐溶液(含1.5%CaCl2)的比例是1:5(w:v),海藻酸钠的浓度为1.5%,CaCl_2固定液的浓度为1.5%。随后对固定化酶合成右旋糖酐的论述探讨进行初步探讨,得到固定化酶催化合成药用右旋糖酐的反应条件为:100ml10%的蔗糖溶液与上面陈述的的共固定化酶进行反应,其中右旋糖酐酶与右旋糖酐蔗糖酶的酶活配比分别为1:30、1:40、1:50,固定化酶活为400U,在30℃,200r/min条件下,分别反应20h、18h、20h,醇沉后得到的主产品分别为右旋糖酐20、40、70。对固定化酶催化反应进行重复实验,结果表明催化稳定性良好,前3次重复实验中反应主产物保持不变,底物转化率均在70%以上。3.最后对肠膜状明串菌株发酵法并结合游离右旋糖酐酶水解工艺制备药用右旋糖酐进行了探讨。最终确定最佳反应条件为:高分子右旋糖酐底物浓度为9%,右旋糖酐酶浓度为4IU/ml,反应时间150min。再用无水乙醇对反应液进行分级醇沉,最终可得到三种不同分子量的右旋糖酐,分别为右旋糖酐70、40、20,总产率为86.2%。本探讨为右旋糖酐酶与右旋糖酐蔗糖酶的共固定化和右旋糖酐生产新工艺的运用提供了基础。关键词:右旋糖酐酶论文固定化论文右旋糖酐蔗糖酶论文酶催化论文工艺论文

    摘要5-6

    ABSTRACT6-8

    致谢8-14

    第一章 绪论14-20

    1.1 引言14

    1.2 右旋糖酐酶14-16

    1.2.1 右旋糖酐酶的分类与来源14-15

    1.2.2 右旋糖酐酶的性质15

    1.2.3 右旋糖酐酶的结构及催化机理15-16

    1.3 右旋糖酐蔗糖酶16

    1.4 酶的固定化策略16-18

    1.4.1 吸附法16-17

    1.4.2 包埋法17

    1.4.3 交联法17

    1.4.4 多酶固定化策略17-18

    1.5 本课题的探讨作用18

    1.6 探讨内容与思路18-20

    第二章 右旋糖酐酶与右旋糖酐蔗糖酶的共固定化策略的探讨20-29

    2.1 引言20

    2.2 实验仪器与材料20-21

    2.2.1 菌株来源20

    2.2.2 培养基20-21

    2.2.3 主要试剂及仪器21

    2.3 实验策略21-25

    2.3.1 右旋糖酐酶与右旋糖酐蔗糖酶的制备策略21-22

    2.3.2 酶活测定22-23

    2.3.3 双酶固定化率及固定化酶活回收率的计算23

    2.3.4 交联法23-24

    2.3.5 胶囊法24

    2.3.6 吸附法24-25

    2.3.7 吸附-胶囊法25

    2.3.8 吸附-包埋法25

    2.4 实验结果与浅析25-28

    2.4.1 不同策略的固定化率25-26

    2.4.2 不同策略的固定化酶活力回收率26-27

    2.4.3 不同策略的固定化酶利用次数27-28

    2.5 本章小结28-29

    第三章 吸附-胶囊法固定右旋糖酐酶与重组右旋糖酐蔗糖酶的探讨29-42

    3.1 引言29

    3.2 实验仪器与材料29-30

    3.2.1 菌株来源29

    3.2.2 培养基29

    3.2.3 主要试剂及仪器29-30

    3.3 实验策略30-33

    3.3.1 固定化酶活力测定30

    3.3.2双酶固定化率及固定化酶活回收率的计算30

    3.3.3 右旋糖酐分子量的检测策略30-31

    3.3.4 吸附-胶囊法固定双酶条件的探讨31-32

    3.3.5 固定化酶制备右旋糖酐的论述探讨32-33

    3.4 实验结果与浅析33-41

    3.4.1 吸附-胶囊法固定双酶条件的探讨33-36

    3.4.2 固定化酶制备右旋糖酐的论述探讨36-41

    3.5 本章小结41-42

    第四章 右旋糖酐酶在改善传统右旋糖酐生产工艺中的运用探讨42-57

    4.1 引言42

    4.2 实验材料42-43

    4.2.1 菌株42

    4.2.2 培养基42

    4.2.3 主要试剂和仪器42-43

    4.3 实验策略43-47

    4.3.1 酶催化法制备右旋糖酐的工艺流程43-44

    4.3.2 右旋糖酐酶活力测定策略44

    4.3.3 右旋糖酐分子量的检测策略44

    4.3.4 发酵法制备高分子右旋糖酐44

    4.3.5 酶法催化水解高分子右旋糖酐的条件优化44-45

    4.3.6 发酵法结合酶法制备药用右旋糖酐45-46

    4.3.7 酶催化工艺产品的结构鉴定与质量浅析46-47

    4.4 结果与浅析47-56

    4.4.1 酶法催化水解高分子右旋糖酐的条件优化47-51

    4.4.2 右旋糖酐酶法水解工艺制备药用右旋糖酐51-56

    4.5 本章小结56-57

    第五章 结论与展望57-59

    5.1 结论57

    5.2 展望57-59

copyright 2003-2024 Copyright©2020 Powered by 网络信息技术有限公司 备案号: 粤2017400971号