摘要:[目的]初步阐明KCs的抗原提呈功能在大鼠NAFL发病中是否发挥作用。[策略](1)雄性SD大鼠40只,随机分为2组,模型组和对照组,模型组给予高脂饲料(82.5%基础饲料+10%猪油+2%胆固醇+5%蛋黄粉+0.5%胆盐),对照组以基础饲料。11w末每组处死10只,测定体重、肝脏湿重、血清ALT、AST、TC、TG水平、肝组织HE染色观察肝组织病理;(2)免疫荧光组织化学染色法观察两组大鼠KCs数量;(3)采取改良灌注消化法分离大鼠KCs, ED1免疫细胞化学染色结合吞噬实验鉴定KCs。(4)流式细胞仪检测KCs抗原提呈分子CD54、CD86和MHC-Ⅱ表达,将分离KCs与淋巴细胞共培养,MTT法检测淋巴细胞增殖情况。[结果](1)11周末模型组大鼠肝脏病变进展为中度脂肪肝;(2)原位免疫组织化学荧光染色法测定模型组大鼠KCs数量较对照组显著增加;(3)改良灌注消化法成功分离KCs,经鉴定其纯度、活性达98%,可满足实验需求;(4)模型组KCs表面CD86、 MHC-Ⅱ类分子与对照组比较表达显著增加(P0.05),而CD54分子的表达比例也有增加,但差别无统计学作用(P0.05),KCs与淋巴细胞共培养实验模型组KCs促淋巴细胞增殖能力较对照组显著增强(P0.01)。[结论](1)高脂饮食成功建立SD大鼠NAFL模型;(2)NAFL大鼠KCs数量较对照组显著增加;(3)NAFL大鼠KCs CD86、MHC-Ⅱ分子表达上调;(4)NAFL大鼠KCs抗原提呈功能增强,该功能可能参与NAFL的发病。关键词:非酒精性脂肪肝论文Kupffer细胞论文抗原提呈功能论文细胞表型论文大鼠论文
中文摘要3-4
ABSTRACT4-6
中英文对照縮略语表6-10
前言10-13
第一部分 高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪肝模型及检测肝脏Kupffer细胞数量变化13-24
Ⅰ 高脂饮食建立非酒精性脂肪肝大鼠模型13-20
引言13
材料和策略13-15
结果15-18
讨论18-20
Ⅱ NAFL大鼠Kupffer细胞数量变化20-24
引言20
材料和策略20-21
结果21-22
讨论22-24
第二部分 非酒精性脂肪肝大鼠Kupffer细胞抗原提呈功能探讨24-43
Ⅰ 大鼠Kupffer细胞分离、培养及鉴定24-35
引言24
材料和策略24-28
结果28-33
讨论33-35
Ⅱ 大鼠Kupffer细胞抗原提呈相关分子及抗原提呈功能变化35-43
引言35
材料和策略35-38
结果38-40
讨论40-43