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摘要：替尼泊苷(Teniposide)又称足叶噻吩苷,抗瘤谱广、毒性低,对小细胞肺癌、恶性淋巴瘤、睾丸癌、急性白血病等多种癌症均有良好的疗效。替尼泊苷几乎不溶于水,口服生物利用度低。目前有注射剂,不良反应多,可导致严重的过敏反应,而且静脉注射时渗漏可导致皮肤灼伤。由此,本论文制备了替尼泊苷纳米乳,用于提升其口服吸收的探讨。本论文建立了替尼泊苷体夕(?)Hplc浅析策略,在0.4-80.Omg/L范围内,替尼泊苷峰面积和浓度成良好的线性联系,且专属性强,精密度、回收率均符合浅析要求,可以用于替尼泊苷含量测定、替尼泊苷纳米乳的质量评价。建立了替尼泊苷体内HPLC浅析策略,在0.1-20.0mg.L-1范围内,替尼泊苷血浆样品峰面积和浓度成良好的线性联系,此策略操作简单,专属性强,精密度、回收率均符合要求,可以用于胃肠道吸收特性及组织分布测定的需要。以小檗碱为内标建立了替尼泊苷体内HPLC-MS/MS浅析策略,在1.00-1000ng·mL-1范围内,线性联系良好,专属性强,精密度、回收率均符合要求,可以用于体内药动学及淋巴转运的测定。本论文采取薄膜一水化法制备了替尼泊苷纳米乳(TSN),以包封率为评价指标,采取正交设计考察药物与中链油之比、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯与聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯之比、水化温度、成膜时圆底烧瓶与旋转轴的倾斜角度四个因素对包封率的影响,对TSN的处方和制备工艺进行优化。对TSN表征结果：粒子均匀圆整,TSN平均粒径为31.19±4.11nm,Zeta电位为-10.1±0.5mv。HPLC测定其包封率为99.25%,载药量为2.20%,且冻干前后,TSN质量稳定。替尼泊苷包载于TSN后,主要以分子状态或无定形态有着,在人工肠液中释放较快。细胞实验探讨表明TSN能够显著增加替尼泊苷的抗肿瘤效果,并且显著转变肿瘤细胞的细胞周期。考察了TSN灌胃给药后在胃肠道部位的吸收情况,在给药后的4h内主要分布于胃、十二指肠、空肠部位,为了进一步探讨在胃肠道中的吸收特性,采取激光扫描共聚焦显微镜观察红色荧光标记的TSN在灌胃给药0.5h后各个部位的摄取,胃和十二指肠最多,空肠次之,回肠和结肠几乎没有。采取Caco-2细胞模型进一步探讨TSN在小肠细胞中的摄取机制,结果表明TSN能够显著提升替尼泊苷在小肠细胞中的摄取,而且4℃下TSN的摄取量仅为37℃下摄取量的13%,加入细胞内吞途径抑制剂Chlorpromazine后细胞摄取降低了30%,而加入Fippin后细胞摄取无显著性变化。由此TSN主要通过网格蛋白介导的内吞途径摄取进入小肠细胞。考察了TSN以胃肠道吸收后的转运情况,结果表明加入淋巴转运抑制剂后其体内吸收降低了近70%,由此TSN主要通过淋巴转运途径吸收进入体循环。采取SD大鼠进行了TSN的药动学探讨,TSN和对照的达峰时间分别为1.0h和0.5h,最大峰浓度分别为969.0和170.75ng.mL-1,提升了5.67倍,AUC0-∞(ng. h. mL-1)提升了5.47倍。组织分布结果探讨表明TSN能够显著提升药物在各组织器官中的分布,并且能够靶向分布于肿瘤组织部位。关键词：替尼泊苷论文纳米乳论文吸收特性论文淋巴转运论文组织分布论文药动学论文
摘要5-7
Abstract7-11
前言11-15
第一章 替尼泊苷体内外浅析策略建立15-27
1 仪器与试药15-16
1.1 仪器15
1.2 试药15-16
1.3 实验动物16
2 策略与结果16-25
2.1 替尼泊苷体外HPLC浅析策略的建立16-18
2.2 大鼠血浆中替尼泊苷HPLC测定策略的建立18-21
2.3 HPLC-MS/MS浅析策略的建立21-25
3 讨论25-26
4 小结26-27
第二章 替尼泊苷纳米乳的制备与表征27-39
1 仪器与试药27-28
1.1 仪器27
1.2 试药27-28
1.3 实验细胞28
2 策略与结果28-36
2.1 替尼泊苷纳米乳的制备28-31
2.2 替尼泊苷纳米乳的表征31-35
2.3 细胞毒性35-36
3 讨论36-38
4小结38-39
第三章 替尼泊苷纳米乳在胃肠道吸收特性的探讨39-50
1 仪器与试药39-40
1.1 仪器39-40
1.2 试药40
1.3 实验动物40
2 策略与结果40-47
2.1 胃肠道分布探讨40-42
2.2 激光共聚焦显微镜观察TSN在胃肠道不同部位的吸收特性42-44
2.3 替尼泊苷纳米乳在Caco-2细胞模型中摄取机制的探讨44-46
2.4 替尼泊苷纳米乳在大鼠胃肠道的淋巴转运46-47
3 讨论47-49
4 小结49-50
第四章 体内药动学及组织分布探讨50-58
1 仪器与试药50
1.1 仪器50
1.2 试药50
1.3 实验动物50
2 策略与结果50-57
2.1 替尼泊苷纳米乳单剂量口服药物动力学探讨51-53
2.2 组织分布特性53-55
2.3 TSN在肿瘤荷瘤小鼠体内的分布特性55-57
3 讨论57
4 小结57-58
全文总结58-60
文献综述60-65