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摘要：目的：检测SD大鼠脑缺血再灌注中小热休克蛋白20(heat shock protein HSP20)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2, Bcl-2)在脑组织中的动态变化,浅析二者之间可能的联系,探讨其在脑缺血再灌注中的作用。探讨丹红注射液对SD大鼠脑缺血再灌注中HSP20、Bcl-2的影响,阐明丹红注射液可能的机制。策略：将250g-320g雄性健康SD大鼠60只,随机划分成四组：正常对照组(normal group)(n=10),检测手术组(sham-operated group)(n=10)(?)口脑缺血再灌注组(I/R group)(n=20),丹红注射液药物干预组(n=20)。运用Longa法建立SD大鼠大脑中动脉缺血两小时再灌注模型,其中IR组和药物干预组又分为四个亚组,每个亚组5只动物,分别是：6小时组、1天组、3天组、7天组。按Bedersonl的5级评分法来评价手术后SD大鼠的神经功能缺损。运用HE染色法观察大鼠脑组织病理学变化情况；运用免疫组织化学法来检测Bcl-2、HSP20的阳性细胞表达水平的动态变化；运用实时荧光定量PCR策略对标本中HSP20mRNA的表达及扩增倍数进行测定。结果：1.HE染色：检测手术组和正常对照组可见SD大鼠脑组织中神经元结构及形态正常、无间质水肿、没有显著的梗塞灶。脑缺血再灌注组可见神经元细胞坏死产生,随着时间的推移病灶侧神经元坏死变性现象加重并伴有胶质细胞增生。而在药物干预组和IR组各个相同时间点的亚组相比较,可以看出药物干预组大鼠脑组织损伤程度显著轻于缺血再灌注组。2.免疫组织化学结果：(1)HSP20在检测手术组和正常组的个时间点偶见阳性细胞,两组比较无统计学作用(P0.05)。在脑缺血再灌注6h组中HSP20的表达有所升高,3d时到达高峰,之后呈逐渐下降走势,7d组阳性细胞数较3d组也有显著减少,但仍高于检测手术组和正常组。表达主要位于海马区的神经元、神经胶质细胞胞浆中及血管内皮细胞。IR组与检测手术组及正常对照组比较HSP20的表达有差别,其差别有统计学作用(P0.01)；(2)Bcl-2在检测手术组和正常组中偶可见阳性细胞,两组比较无统计学作用(P0.05)；Bcl-2在脑缺血再灌注6h组中表达开始升高,并迅速升高在1d时达到高峰,之后随着时间的推移逐渐下降,7d组阳性细胞数较3d组也有显著减少,但依然比检测手术组及正常组高；Bcl-2阳性细胞数在IR组与检测手术组的比较中有差别,且其差别有统计学作用(P0.01)；(3)丹红药物干预组中,HSP20的表达走势与IR组基本相同,但阳性细胞数显著高于IR组,且其差别有统计学作用(P0.05)。丹红药物干预组与脑缺血再灌注组中Bcl-2的表达走势基本相同,但阳性细胞数却显著高于IR组,并且差别有统计学作用(P0.05)。3.RT-PCR检测结果：在脑缺血再灌注组中HSP20mRNA在6h时开始升高,3d时达到最高,之后逐渐降低但7d组仍高于正常对照组及检测手术组,与正常组和检测手术组比较有统计学作用(P0.05)。在丹红药物干预组中HSP20mRNA的表达走势与IR组基本相同,同样在6h时开始升高,3d时达到最高后开始缓慢下降,但HSP20mRNA表达量却显著高于IR组,且其差别有统计学作用(P0.05)。结论：1.脑缺血再灌注后HSP20、Bcl-2表达均升高2.丹红注射液可以上调HSP20和Bcl-2的表达,并且可能有神经保护作用关键词：脑缺血再灌注论文HSP20论文Bcl-2论文丹红注射液论文SD大鼠论文
摘要3-6
ABSTRACT6-11
第一章 引言11-14
第二章 材料与策略14-22
2.1 实验动物14
2.2 主要药品和试剂14-15
2.3 主要实验仪器15
2.4 动物分组15
2.5 MCAO动物模型的制作15-16
2.6 病理学检查16-17
2.7 免疫组化检查17-18
2.8 图像处理及组织病理学测量18
2.9 RT-PCR检测HSP20 mRNA18-21
2.10 统计学浅析21-22
第三章 结果22-33
3.1 模型制备结果22
3.2 病理结果观察22
3.3 大鼠脑缺血再灌注后脑组织中蛋白表达的动态变化22-25
3.4 RT-PCR结果25-29
3.5 附图29-33
第四章 讨论33-40
4.1 脑缺血再灌注模型的制作及评价33
4.2 Bcl-2在脑缺血再灌注中的表达及作用33-35
4.3 HSP20在脑缺血再灌注中的表达及作用35-37
4.4 脑缺血再灌注中HSP20与Bcl-2联系的探讨37-38
4.5 丹红注射液对脑缺血再灌注后HSP20和Bcl-2表达的影响及可能的机理38-40
结论40-41