本站原创摘要4-5
Abstract5-6
目录6-8
1 引言8-15
1.1 肿瘤及肿瘤血管发生8-9
1.2 血管生原因子9
1.3 碱性成纤维生长因子（bFGF）及其与肿瘤的联系9-10
1.3.1 碱性成纤维生长因子（bFGF）及其生物学作用9-10
1.3.2 碱性成纤维生长因子（bFGF）和肿瘤的联系10
1.4 血管生成素探讨概况及其生物作用机制10-11
1.5 血管生成素和肿瘤的联系11-12
1.6 本实验室对血管生成素和 bFGF 的前期探讨成果12-13
1.6.1 血管生成素和 bFGF 联系的探讨12-13
1.6.2 血管生成素和 bFGF 对肿瘤细胞的影响13
1.7 本论文探讨内容及作用13-15
2 材料与策略15-32
2.1 材料15-21
2.1.1 实验材料15
2.1.2 主要试剂15-16
2.1.3 主要仪器设备16
2.1.4 重要试剂的配制策略16-21
2.1.5 重要引物合成21
2.2 实验策略21-32
2.2.1 凝胶迁移实验（electrophoretic mobipty shift assay，EMSA）21-23
2.2.2 质粒小量提取23-24
2.2.3 哺乳动物细胞瞬时转染-脂质体转染法24
2.2.4 原核表达载体 pGEX-2T-Angiogenin 的构建及在大肠杆菌中的表达24-28
2.2.5 重组真核表达载体 pKH3-bFGF 的构建28-30
2.2.6 细胞总蛋白的提取30
2.2.7 GST Pull down 历程30-32
3 结果与浅析32-43
3.1 血管生成素与 bFGF 启动子中 4CT 重复序列的作用32-33
3.2 原核表达载体 pGEX-2T-Angiogenin 的构建33-35
3.3 重组质粒 pGEX-2T-Angiogenin 在大肠杆菌中的表达35-37
3.3.1 GST- Angiogenin 重组蛋白初步表达35-36
3.3.2 最适蛋白表达条件的确定36-37
3.4 重组真核表达载体 pKH3-bFGF 的构建37-40
3.5 GST-Angiogenin 重组蛋白的提取及纯化40-41
3.6 bFGF 基因的真核表达及 bFGF 蛋白和血管生成素蛋白的体外作用41-43
4 讨论43-46
4.1 血管生成素参与 bFGF 的转录调控43-44
4.2 对血管生成素和 bFGF 在蛋白水平的相互作用机制的探讨44-46
结论46-47