摘要：桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒是由桂枝、炙甘草、龙骨、煅牡蛎四味药组成，具有镇静安神，收敛固涩之功效，临床上用于治疗心阳虚所致的心悸、心烦、失眠、胸闷、身躁、乏力、精神萎靡见上面陈述的症候者。本课题为新药中药天然药物注册分类六类[1]，是以中医药论述为指导，运用现药技术和策略，对桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒的药学及毒理进行了系统的实验探讨，确保制备工艺科学合理，药品制剂安全有效、质量稳定可控。一、立题依据本方来源于《伤寒论》中的经方桂枝甘草龙骨牡蛎汤《伤寒论》118条：“火逆下之,因烧针烦躁者,桂枝甘草龙骨牡蛎汤主之。”桂枝一两(去皮),甘草二两(炙),牡蛎二两(熬),龙骨二两。上四味,以水五升,煮取二升半去滓。温服八合,日三服[2]。本方中桂枝温通心阳，和畅心气，炙甘草温补心气，与桂枝相用，温阳补阳；龙骨镇静安神，使神明内守，煅牡蛎潜镇浮阳之躁动，与龙骨合用潜镇安神[3～4]。国家食品药品监管局发布施行《中药注册管理补充规定》[5]，其规定项下第七条、第八条着重对中药复方制剂的分类进行了细化，增加了“来源于古代经典名方的中药复方制剂”和“主治为证候的中药复方制剂”两个类别，突出中医药特点、继承传统的思想。二、制备工艺的探讨水提取工艺：采取正交试验法优选最佳提取工艺条件。结果水提取工艺条件为：加入10倍加水量，提取三次，每次提取两小时。水提液浓缩工艺：以物料干燥情况为评价指标，考察了浓缩温度、浓缩程度。结果：水提液在80℃以下减压浓缩，至相对密度1.18～1.23（60℃）之间即可。制剂成型工艺：通过比较试验考察了不同稀释剂及用量对制粒情况影响，并考察了颗粒的堆密度、临界相对湿度、休止角情况影响。结果：清膏相对密度在1.18～1.23（60℃）之间，用清膏-辅料（1：2）的比例加入糊精，将二者混匀，制粒，干燥，整粒，即得。三、质量标准探讨TLC定性探讨：采取TLC法对桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒中所含桂枝、炙甘草2味药材进行了鉴别。试验结果表明，供试品色谱中，在对照药材或对照品色谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点，而阴性对照在相应位置无干扰。且经多次试验，重现性良好。Hplc含量测定探讨：采取HPLC法测定了桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒中甘草苷含量，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05%磷酸溶液（三乙胺调Ph至5.0）(18:82)为流动相；检测波长为277nm。论述板数按甘草苷峰计算应不低于5000。并进行了策略学考察，结果表明该策略合理可行，重现性好，可用于桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒的质量制约。本品每克含炙甘草以甘草苷计不得低于1.20mg。四、药物稳定性探讨本品在加速试验条件和室温条件下观察6个月，各项指标均符合规定，各批加速稳定性和长期稳定性炙甘草甘草苷含量RSD小于1.0%，质量检测结果稳定，长期稳定性试验9、12、18、24个月继续观察中。本品以药用复合膜为内包材，结果表明利用此包装材料具有合理性；根据稳定性探讨结果，初步拟定本品有效期为24个月。五、毒理探讨通过灌胃给予大鼠90天桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒，探讨本品所产生的长期毒性反应及其程度。运用SPF级SD大鼠120只，雌雄各半，随机分为4组，每组30只进行试验。分组设高（5.85g浸膏/kg），中(2.93g浸膏/kg)，低（1.46g浸膏/Kg）（分别相当于人临床拟用量的60、30和15倍)三个剂量组和空白对照组。大鼠灌胃给药，每天给药一次，连续90天。每周记录动物体重及摄食量。给药结束后，每组处死20只动物，进行脏器系数、血液学指标、血清生化学、血清电解质；每组剩余10只动物停药30天作恢复期观察及检查。结果整个试验期间大鼠整体情况较好，体重正常增加，体重和摄食量各剂量组与对照组比较差别无显著作用；脏器系数各剂量组与对照组比较差别无显著作用；血液学指标、血清生化学、血清电解质各剂量组与对照组比较差别也无显著作用；组织病理学检查未发现各脏器组织学变化。结论：桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒大鼠90天长期毒性试验对大鼠无毒性损伤及延迟性毒性反应。关键词：桂枝甘草龙骨牡蛎汤论文制备工艺论文质量标准论文毒理探讨论文甘草苷论文
目录3-6
摘要6-9
Abstract9-13
前言13-15
第一部分 桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒立题依据15-17
1. 桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒处方来源15
2. 有关《中药注册管理补充规定》15-17
第二部分 桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒的制备工艺探讨17-32
1. 桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒的制备工艺17-18
1.1 处方17
1.2 剂型17
1.3 制法17-18
2. 桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒制备工艺探讨资料18-32
2.1 药品、试药与仪器18-19
2.2 提取工艺路线设计及指标性成分的选择19-21
2.3 提取工艺探讨21-27
2.4 水提液浓缩工艺探讨27
2.5 制剂成型工艺探讨27-31
2.6 小结31-32
第三部分 成品的质量标准探讨32-46
1. 桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒质量标准草案32-34
2. 桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒质量标准草案起草说明34-46
2.1 药品、试剂与仪器34
2.2 鉴别策略的建立34-36
2.3 甘草苷含量测定策略的建立36
2.4 供试品溶液制备策略确定36-37
2.5 策略学考察37-42
2.6 小试试验42-44
2.7 中试试验44-45
2.8 小结45-46
第四部分 药物稳定性探讨46-54
1. 稳定性探讨用样品46
2. 稳定性试验策略及条件46
3. 稳定性考察项目及策略46-47
4. 稳定性试验结果47
5. 结论47-48
附表48-54
第五部分 桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒急性毒性探讨54-56
1. 试验材料54
2. 策略与结果54-55
3. 结论55-56
第六部分 桂枝甘草龙骨牡蛎汤颗粒长期毒性试验探讨探讨56-71
1. 材料56-57
2. 策略57-59
3. 结果59-60
4. 结论60-61
附表61-71
讨论71-74
1. 选题的目的与处方依据71
2. 关于制备工艺的探讨71-73
3. 关于质量标准的探讨73
4. 关于稳定性的探讨73
5. 关于毒理探讨73-74
结语74-75
文献综述75-80
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