本站原创
摘要：探讨目的:经实验证明心肌缺血预处理和心肌缺血后处理是减轻心肌缺血损伤一个成功的策略。但缺血预处理需要在缺血前给予干预，这就要求预知心肌缺血发生的时间，并且需要复杂的有创性操作来实施局部缺血；与其相比缺血后处理虽然不需预知心肌缺血发生的时间，但仍需复杂的有创操作来完成，同样限制其开展。故此，有探讨者提出用药物来代替缺血处理的检测设，近几年药物预处理及后处理成为探讨的新热点。本探讨以尼可地尔为探讨手段探讨缺血后持续再灌注前的短暂时间窗内进行的药物后处理干预。探讨尼可地尔药物后处理对心肌缺血损伤的保护作用并探讨其作用机制。尼可地尔是临床上唯一具有抗心绞痛作用的钾通道开放剂，以生化和组织学变化等方面探讨这个药物作为后处理的干预手段对缺血心肌的保护作用的较少，尤其是国内更是少见。本探讨用大低剂量ISO腹腔注射诱导急性心肌缺血性损伤模型，以保护线粒体为切入点，用药物后处理模拟缺血后处理，达到良好效果，为心肌缺血性疾病的对症治疗提供新思路，具有非常重要的现实作用。探讨策略:30只健康SD大鼠随机分为3组：盐酸异丙肾上腺素（ISO）组10只，腹腔注射盐酸异丙肾上腺素5mg·kg~(-1)，间隔24小时重复注射1次，共注射3次；对照组10只，大鼠腹腔注射等量生理盐水，策略同ISO组；尼可地尔后处理（NIC）组10只，注射ISO1h后于尾静脉注射尼可地尔(1mg·kg~(-1))，间隔24小时重复注射1次，共注射3次。ISO组和NIC组大鼠于第3次注射ISO后24h处死，同时处死对照组大鼠。各组大鼠处死前取血清进行心肌酶血清乳酸脱氢酶（LDH），磷酸激酸（CK）活性检测及心肌肌钙蛋白I（cTnI）活性检测；通过检测大鼠心肌MDA含量和SOD活性，观察尼可地尔对脂质过氧化的影响；常规HE染色观察各组大鼠心肌的组织形态学变化，评估心肌缺血损伤；TUNEL法检测各组大鼠心肌细胞的调亡情况，通过免疫组织化学染色法检测Caspase-3蛋白，双重免疫荧光染色及WesternBlot检测钾离子通道蛋白Kir6.2及线粒体电压依赖型阴离子通道（VDAC）在心肌组织的表达，进行Nitrotyrosine免疫组织化学染色；半定量PCR法检测IL-10在心肌组织的表达。探讨结果：对照组、尼可地尔后组大鼠LDH、CK没有统计学作用（P0.05），两组均低于ISO组，差别具有统计学作用（P0.05）；尼克地尔后处理组血清cTnI低于ISO组，具有统计学作用（P0.01）。HE染色显示：ISO组大鼠伴有炎细胞浸润，局部心肌组织变性坏死；尼可地尔后处理组大鼠炎症反应轻微，坏死心肌细胞显著减少；对照组大鼠心肌无异常。免疫组织化学染色显示：ISO组大鼠心肌细胞胞浆可见大量表达Caspase-3；而对照组和尼可地尔组大鼠无表达。尼可地尔组细胞凋亡指数（AI）较ISO组显著降低（P0.01）。双重免疫荧光染色显示ISO组局部心肌组织Kir6.2表达显著低于对照组。尼克地尔后处理组Kir6.2表达高于对照组；各组间VDAC表达基本一致。WesternBlot进一步证明尼克地尔后处理组Kir6.2表达增加。ISO组免疫组织化学染色可见大量心肌细胞胞浆表达Nitrotyrosine；对照组和尼克地尔后处理组无表达。尼克地尔后处理组Il-10的表达显著高于ISO组及对照组。结论：1.间隔24小时腹腔注射ISO5mg.Kg~(-1)3天可以有效复制急性心肌缺血模型。2.尼可地尔药物后处理对心肌缺血损伤有显著保护作用。3.尼可地尔药物后处理对心肌缺血损伤的保护作用，与开放线粒体KATP通道，减少心肌缺血时过量氧自由基的产生，提升心肌的抗氧化能力，抑制缺血后心肌细胞的凋亡和炎症反应有关。关键词：心肌缺血损伤论文缺血后处理论文药物后处理论文凋亡论文氧化应激论文
前言4-6
中文摘要6-8
Abstract8-16
第1章 绪论16-20
第2章 文献综述20-44
2.1 心肌缺血再灌注损伤探讨概述20-37
2.2 药物后处理对心肌缺血损伤内源性保护机制影响的探讨37-44
第3章 尼可地尔后处理对大鼠心肌缺血损伤的影响44-60
3.1 实验动物与仪器44-45
3.2 观察指标及检测项目45-49
3.3 统计学浅析49-50
3.4 结果50-54
3.5 讨论54-59
3.5.1 标本选择54-55
3.5.2 模型制备55-56
3.5.3 钾离子通道开放剂对心肌缺血损伤的影响56-58
3.5.4 尼可地尔药物后处理对心肌缺血损伤的保护作用58-59
3.6 小结59-60
第4章 尼可地尔后处理保护大鼠心肌缺血损伤的机制60-84
4.1 材料与策略60-62
4.2 检测项目62-69
4.3 统计学浅析69
4.4 结果69-79
4.5 讨论79-83
4.5.1 尼可地尔药物后处理对大鼠心肌SOD，MDA的影响79-80
4.5.2 尼可地尔药物后处理对心肌细胞凋亡的影响80-81
4.5.3 尼可地尔激活KATP通道的开放，保护缺血的心肌81-82
4.5.4 尼可地尔通过抑制炎症反应保护缺血心肌82-83
4.6 小结83-84
第5章 结论84-86